开始诱导多能干细胞衍生的视网膜类器官或 RO 的前固定。使用移液器,轻轻地将培养的 RO 之一从培养皿中移动到 1.5 毫升微量离心管中。在移液管的帮助下,从微量离心管中取出培养基,并加入 1.5 毫升 2% 多聚甲醛、2% 戊二醛固定剂。
RO 固定后,在继续洗涤类器官之前去除多聚甲醛-戊二醛固定剂。通过添加 1 毫升 0.01 摩尔 PBS 轻轻悬浮微量离心管中的类器官,以确保完全洗涤。然后移出任何剩余的 PBS,并用大约 150 微升的 1% 渗透酸代替,直到组织块被淹没。
将微量离心管放入暗箱中。