在小鼠颈静脉/股动脉上创建血栓或穿刺伤口，用于蒙太奇广域电子显微镜分析

首先，用一把剪刀和钝钳，提起并切开右颈静脉上麻醉小鼠的皮肤。在皮肤上切一个足够大的圆窗，以暴露颈静脉和一些周围组织。使用钝性解剖技术轻轻推开脂肪组织、淋巴结和结缔组织。

接下来，在20毫升注射器中加入加热至37摄氏度的生理盐水。将注射器装入注射器输液泵中。然后将 27 号蝶针和相关管路连接到注射器上。

将注射泵设置为每分钟 0.5 毫升的流速，以洗去穿刺静脉或动脉中的血液。将生理盐水流放置在穿刺部位的一侧几毫升，而不是直接放在它上面。清洁颈静脉后，启动计时器。

分别获得 30 号和 33 号皮下注射针，分别用于颈静脉和股动脉。将斜面朝上转动。然后将针头以 25 度角放置在颈静脉或股动脉上。

记下时间后，迅速刺破容器顶部。记下出血完全停止所需的时间。等待血栓形成后再开始灌注固定。

灌注完成后，解剖带有穿刺部位和血栓的颈静脉部分。用一把锋利的剪刀在血管段的远端做一个对角线切口，然后在血管段的近端做一个直线切口。接下来，将固定的组织在 4 摄氏度下放置 24 小时。

第二天，将二甲胂酸钠缓冲溶液倒入含有 5 毫米厚硅胶垫的 35 毫米培养皿中。小心地将组织转移到缓冲液中，确保其浸没在缓冲液中。使用不锈钢细小销和一对细镊子，小心地将容器的每一端固定在垫子上。

仔细清洁颈静脉。用一把微型剪刀纵向剪断与穿刺部位相对的血管壁。轻轻打开血管，然后将其固定在硅胶垫上，腔内侧朝上。

从培养皿中取出缓冲溶液。然后加入 1% 多聚甲醛浸没容器。立即将盖子盖在盘子上以防止变干。