继续执行曝光测试。一旦收获了足够的细胞,轻轻敲击含有细胞的培养瓶壁以使其均匀分布,然后将细胞悬液转移到 15 mL离心管中。用 DMEM 结合细胞术稀释细胞悬液,以达到所需的细胞密度。
轻轻敲击培养瓶壁以确保细胞均匀分布。接下来,向 96 孔板的外孔中加入 100 微升 PBS,以防止培养基因边缘效应而蒸发。将 100 μL 细胞悬液添加到板的左侧孔中,静置 10 分钟。
将细胞在 37 摄氏度和 5% 二氧化碳中孵育 48 小时。从培养箱中取出 96 孔板后,丢弃培养基。要建立农药代谢物组,将 100 微升制备的不同农药残留暴露溶液添加到每个指定孔中。
然后将 100 微升不同制备的母体农药暴露溶液添加到每个指定孔中进行比较,以建立农药母体组。为了设置空白对照,向每个指定孔中加入 100 微升含有 0.3% DMSO 的 DMEM。将细胞在 37 摄氏度和 5% 二氧化碳中孵育 24 小时。