首先，将 2 毫升消化缓冲液加入含有小鼠心脏组织的 5 毫升运输瓶中，将 4 毫升消化缓冲液加入含有小鼠骨骼组织的 15 毫升离心管中。将从多刺小鼠中分离的心脏和股四头肌组织放在培养皿的盖子上。用一把纸巾剪刀将其切成小于 1 立方毫米的小块。
将切碎的组织转移到相应的消化管中。以低速涡旋试管内容物 2 秒钟。20 分钟后，从旋转器上取下管子。
让组织块沉淀。使用 P 1000 移液器吸出上清液。将上清液转移到含有 20 毫升冰冷的 FACS 缓冲液的 50 毫升离心管中。
用相应体积的消化缓冲液加满消化管。再次在旋转器上孵育它们。对肌肉进行另一轮消化后，加入冰冷的 FACS 缓冲液以淬灭消化。
将 40 μm 细胞过滤器放在 50 mL 离心管的顶部。过滤消化悬浮液并通过过滤器旋腹。将细胞悬液在 4 摄氏度下以 500 G 离心 8 分钟。
去除上清液后，向沉淀中加入 3 毫升 ACK 裂解缓冲液并重悬。将悬浮液在冰上孵育 5 分钟。用 FACS 缓冲液将体积加满至 40 毫升。
在 4 摄氏度下以 500 G 的离心力再次离心样品 5 分钟。倾析上清液后，将沉淀重悬于 0.5 ml FACS 缓冲液中。最后，通过 40 微米的细胞过滤器盖过滤悬浮液，该过滤器盖放在 5 毫升聚苯乙烯圆底管上。
