首先,称取 5 克干燥的高吸水性聚合物或 SAP,并将其与 500 毫升 MMS1 营养液混合。组装前大约一周,在培养皿中用 MMS1 营养液润湿的吸墨纸上发芽车前草种子。然后在室温下在黑暗中孵育培养皿。
要开始组装 SAP-AS 系统,请将幼苗茎放在培养皿侧面的凹槽中,根向内,子叶或叶子和茎向外。用大约 1.5 到 2 克的蛭石覆盖根部。然后,用 8 毫升 MMS1 营养液滋润根室。
沿着根室侧面的尼龙网过滤器清理无蛭石的空间,并加入 5 克水合 SAP。然后将 15 克水合的 SAP 加入高填充隔间。现在对齐盖子的侧槽口和培养皿底部,以避免损坏茎并关闭盖子。
然后用一条封口膜密封培养皿,连接底座和盖子。称量培养皿并记录其平均重量,以确定 SAP-AS 何时需要再水化。然后堆叠培养皿以优化空间。
使用侧面有开口的不透明盖子,将幼苗保持在黑暗中。使用火焰蜡烛或本生灯,加热玻璃移液管,并在玻璃管熔化时拉伸玻璃管以将其分离。在立体显微镜下,折断玻璃移液器的尖端以减小其内径。
现在打开培养皿并找到要放置孢子的位置。沿着尼龙网过滤膜在 5 克水合汁液中清理出一个空间,露出根的一部分。在解剖显微镜下,用挤出的移液管吸取液体悬浮液中的孢子,同时在收集孢子之前移液一些液体。
之后,小心地将孢子沉积在根部。然后更换根碎片上的汁液,以保持根和孢子的湿润微环境。24 小时后,如果需要,冲洗根室,注意不要洗掉孢子。
将盖子的侧槽与培养皿的底部对齐,以避免损坏幼苗茎,并用盖子关闭培养皿。