要开始培养 5 次，每孔 10 至 5 个 DF-1 细胞，在补充有 10% FBS 的 DMEM 的 DMEM 中。当细胞达到 80% 汇合时，丢弃含有血清的细胞培养基。用 PBS 洗涤细胞 3 次后，向每个孔中加入 2 mL 无血清细胞培养基，然后加入 IBDV 病毒溶液。
病毒吸收 1 小时后，用 PBS 洗涤细胞 3 次，并与 2 毫升补充有 2% FBS 的 DMEM 一起孵育 24 小时。每孔加入 500 μL 胰蛋白酶，然后在 1 分钟后加入 2 mL 含 10% FBS 的 DMEM。离心细胞并小心去除上清液。
在 PBS 中重悬细胞沉淀后，轻轻涡旋试管 3 秒钟，然后如前所述离心细胞。在显微镜下使用血细胞计数器，对细胞进行计数，以将它们重悬于适当体积的流式细胞术染色缓冲液中，并涡旋悬浮液。将 100 μL 单细胞悬液加入 5 ml 圆底聚苯乙烯管中。
将 IBDV 感染的细胞和模拟对照细胞与一微克适当抗体在冰上孵育，在黑暗中放置 30 分钟。每 10 分钟轻轻涡旋试管。用 1 毫升流式细胞术染色缓冲液洗涤细胞并离心管。
弃去上清液后，将沉淀重悬于 100 μL 流式细胞术染色缓冲液中。然后将细胞与每毫升 10 微克碘化丙啶一起在室温下避光孵育 10 分钟。并加入 400 微升流式细胞术染色缓冲液用于流式细胞术测定。
在运行所有样品之前，先使用空白对照管，然后用单根染色管进行流式细胞术，以调整电压和补偿参数。流式细胞术表明，IBV 感染后，相当数量的细胞对鸡 Gasdermin E 的 N 端片段呈阳性，而使用膜表面抗原染色的流式细胞术几乎无法检测到裂解的鸡 Gasdermin E 的 C 端片段。IBDV 感染细胞中鸡 Gasdermin E 和碘化丙啶双阳性细胞的 N 端片段数量显著大于模拟感染对照，表明这部分 IBDV 感染细胞正在发生焦亡。
