首先，用漂白剂、乙醇和蒸馏水对饥饿的 Monochamus alternatus 和 Tribolium castaneum 甲虫的表面进行消毒。为了诱导真菌感染，首先，将松树枝或麦麸浸入分生孢子悬浮液中 10 秒。然后将甲虫浸入分生孢子悬浮液中。
干燥后，将一只甲虫和一根树枝放入无菌的 50 毫升试管中。将甲虫饲养在 25 摄氏度的非加湿培养箱中。孵育后，将死去的甲虫转移到一个新的 50 毫升试管中，并在试管内放入一块无菌、湿润的棉花。
将受感染的甲虫身体解剖成触角、头部、胸部、腹部、翅膀和腿等位置。切下成熟真菌菌落的 5 毫米圆盘塞。将受感染的甲虫组织放入 4 摄氏度的预冷 2.5% 戊二醛中两天。
接下来，在 0.1% 磷酸盐缓冲液中洗涤样品 3 次，每次 5 分钟，然后以增加乙醇浓度脱水，每次 10 分钟。在真空冷冻干燥机中干燥样品，然后在扫描电子显微镜下观察真菌结构。用分生孢子悬浮液处理麦麸 10 秒钟，干燥后，将它们转移到培养皿中。
将 T.castaneum 甲虫浸入分生孢子悬浮液中 10 秒，然后放入含有麦麸的培养皿中。孵化后，数盘中的死甲虫。使用真菌基因组 DNA 分离试剂盒提取寄生昆虫病原真菌的基因组 DNA。
使用给定的引物组，制备用于基因特异性扩增的 PCR 反应混合物。测序后，使用 ClustalX 2 比对核苷酸序列。最后，使用基于最大似然法的 MEGA 6 进行系统发育分析。
寄生真菌，如 Aspergillus austwickii、Akanthomyces attenuatus 和 Scopulariopsis alboflavescens 在 M.alternatus 中引起了明显的感染症状。SEM 观察进一步支持了甲虫表面这些寄生真菌的形态特征。与对照组相比，寄生真菌的昆虫致病活性显示死亡率显着升高。
多基因系统发育树显示了三种寄生真菌物种与其各自属内其他物种之间的遗传距离。
