小鼠胚胎培养和附着在 Ishikawa 细胞上以探索子宫内膜容受性

首先，从新鲜交配的雌性小鼠中获取胚胎。在 35 毫米培养皿的底部制备 12 微滴单纯钾优化培养基。用 3 到 5 毫升矿物油覆盖微滴，并将培养皿放入 37 摄氏度和 5% 二氧化碳的培养箱中以平衡。

使用移液管将小鼠胚胎从 M2 培养基转移到 KSOM 培养基中。将洗涤后的胚胎放入准备好的 KSOM 微滴中，并在 37 摄氏度和 5% 二氧化碳下孵育四天。根据它们的大小、内细胞质量、滋养层细胞的数量和扩增程度选择有利的囊胚。

将 1 毫升 2% 明胶添加到 12 孔培养板中，并在 37 摄氏度下孵育 30 分钟。然后吸出多余的明胶，让板子底部完全干燥。将人子宫内膜腺癌细胞或 Ishikawa 细胞接种到明胶包被的 12 孔板中，并在板中孵育 24 小时。

将 5 到 15 个新鲜囊胚轻轻放入含有细胞的 12 孔板的每个孔中。48 小时后，在显微镜下观察胚胎，以评估移动板 3 次后的附着状态。未附着的胚胎会在细胞表面漂浮或滚动。

最后，计算在各种雌激素浓度存在下的胚胎着床率。结果表明，与没有 17 β-雌二醇的对照组相比，接近生理浓度的 17 β-雌二醇提高了胚胎着床率。然而，100 纳摩尔左右的超高浓度 17 β-雌二醇显着降低了胚胎着床率。