为了开始从适当安乐死的小鼠中提取大脑,在将头部与身体的其他部分分开后,首先沿着矢状缝线切割颅骨,以暴露大脑。在细镊子的帮助下,去除骨头。在此步骤中,小心不要损伤颅骨下方的脑组织。
使用抹刀小心地从颅骨中取出大脑。将其放入含有冷 Dulbecco 磷酸盐缓冲盐水或 DPBS 的 12 孔板中。接下来,将整个大脑转移到硅垫上,在那里进行解剖。
使用手术刀去除位于大脑喙端的嗅球和位于小脑区的小脑,同时保留包含两个侧脑室的大脑中央部分。然后沿纵裂将大脑分成两个半球,然后分别进行两个半球的解剖。使用一个半球,重新调整方向,使内侧区域朝上。
沿着胼胝体线打开大脑,将皮层和纹状体与海马体、隔膜和间脑分开,从而暴露出侧脑室。按照心室的腹侧界限去除海马体、隔膜和脑。然后去除脑室下区或 SVZ 的喙端和顶端以外的组织,以及胼胝体之后的皮层。
倾斜组织,使 SVZ 面向侧面。去除 SVZ 下方的纹状体组织,以获得一块含有神经干细胞的薄组织。将小鼠的两个解剖的 SVZ 储存在含有冷 DPBS 的 12 孔板中,直到组织处理。