对从小鼠脑室下区衍生的神经干细胞获得的神经球培养物进行核转染

使用推荐的试剂盒，针对每种所需的核转染条件，在 1.5 mL 试管中制备 95 μL 的核转染溶液。此外，准备一个 T25 培养瓶，每种条件下装满 4 毫升预热的完全培养基，并将其保存在培养箱中直至使用。要进行核转染，请在去除上清液之前，以 300 G 的浓度将所需数量的细胞离心 5 分钟。

加入 1 毫升 DPBS，并通过上下吹打 10 次均匀地重新悬浮沉淀。重复离心后，将沉淀重悬于 95 μL 的 Nucleofection 溶液中。将 95 μL 细胞与预混溶液混合，该溶液含有 5 μL 选择用于核转染的每种质粒。

将此溶液转移到比色皿中后，将其放入 nucleofector 装置中，以使用 nucleofector 系统的优化神经干细胞程序用质粒对细胞进行核染。完成电穿孔后，使用试剂盒中提供的巴斯德移液器，小心地将温热的完全培养基引入比色皿中。将比色皿的内容物转移到先前制备的含有预热完全培养基的 T25 培养瓶中。

将核感染细胞在 37 摄氏度和 5% 二氧化碳的加湿培养箱中孵育 3 到 5 天，并观察核感染的神经球。