CellTrace 远红 （CT-FR） 染色斑马鱼 T-ALL 细胞的优化和体内增殖

首先，在 1.5 毫升微量离心管中收集 1 次 10 次方的 6 个荧光标记的斑马鱼、T-ALL 细胞。将细胞在 2， 500 G 和 4 摄氏度下离心 5 分钟，然后重悬于 1 mL 0.9 XPBS 中。将 250 μL 细胞悬液放入微量离心管中。

然后，加入 250 微升 0.9 XPBS，使体积达到 500 微升。加入所需体积的 CT-FR 染料储备液，并在 37 摄氏度下避光孵育 20 分钟。在室温下以 2， 500 G 离心细胞 5 分钟。

加入 500 微升鱼培养基以去除多余的染料并再次离心，然后将沉淀重悬于 25 微升鱼培养基中。用台盼蓝对细胞进行染色，并在显微镜下检查它们的活力。使用优化的 CT-FR 浓度，对斑马鱼细胞进行染色，保留一些肿瘤细胞不染色。

使用 Hamilton 微量注射器，将 5 微升染色和未染色的细胞悬液注射到麻醉斑马鱼的腹膜腔内。