使用 CMOS-HD-MEA 系统进行芯片制备和脑切片放置以记录高质量的癫痫样活动

首先，将铂金竖琴放在 MEA 平台附近的称重船上。然后用大约 3 毫升的 aCSF 覆盖竖琴，以减少其疏水倾向。用剪刀从移液管的窄尖端修剪约 1.5 英寸。

接下来，使用改良的移液器从切片保持室中收集脑切片。轻轻地将脑切片和移液管中的任何溶液分配到芯片中。要正确定位切片，请使用软画笔在溶液中产生电流，将脑切片推到记录电极上。

使用镊子轻轻地将竖琴放在脑切片上，螺纹向下，将切片压在记录电极上。调整竖琴的方向，使没有框架的一侧面向流入针，并且竖琴的框架不接触任何记录电极。现在取弃管并去除多余的 aCSF。

然后用抗静电擦拭布，扭动一个角形成一个尖端，并用它来吸收记录电极周围剩余的 aCSF，而无需接触记录电极、脑切片或竖琴。使用指定的 aCSF 移液器，快速加入约 2 毫升碳化 aCSF 以覆盖脑切片。用大约 3 毫升的碳化 aCSF 填充孔，直到它大约满四分之三。

然后使用显微镜或相机在 MEA 芯片上拍摄脑切片的高分辨率照片。将流入管和流出管放入装满 aCSF 的烧杯中。将流入针放在靠近芯片底部的地方，就在记录电极的外面。

然后将流出针靠近芯片顶部，朝向边缘，使液体几乎上升到芯片井的边缘，大约 4 毫升。现在将灌注流入量设置为每分钟 5 毫升，将灌注流出量设置为每分钟 7 毫升。打开流入和流出。

从芯片中取出流入针，直到它开始输出溶液而不是空气。之后，将针放回芯片内。然后使用溶液加热器将溶液保持在或接近生理温度，约 34 至 37 摄氏度。

让 aCSF 灌注在脑切片上 10 分钟。10 分钟后，将流出管移至丢弃烧杯中。然后将流入管移至装有促惊厥溶液的烧杯中。

将非惊厥性 aCSF 从灌注系统中冲洗到丢弃烧杯中 10 分钟。最后，将流出管转移到装有促惊厥溶液的烧杯中，并使其循环直至实验结束。在零镁和 4-氨基吡啶范式下，在新皮质区域经常观察到强大的电图癫痫发作样活性。

海马区域在脑切片之间表现出更多的可变性，一些表现出癫痫样活动，而另一些则表现出短暂的放电。与 4-氨基吡啶范式相比，零镁范式下的新皮层活性在多个频带中显示出更高的功率。与 4-氨基吡啶范式中的新皮层和两个大脑区域相比，零镁范式中的海马活动在高 γ 频带中表现出更高的功率。