首先，将麻醉的鼠标放在立体定位装置上。用手术剪刀沿着头皮中线连续切开，切掉部分头皮，露出颅骨表面。用微钻在指定区域做开颅手术，并设置四个点作为边界。
当脑组织可见时停止钻孔。使用控制面板将注射器设置为注射 80 纳升病毒。单击控制面板上的注入按钮，以每秒 1 纳升的流速将病毒注射到齿状回中。
要吸取脑组织，请将钝针的尖端紧贴脑组织上方旋转，然后轻轻按压以促进误吸。吸痰时用冷盐水不断冲洗，以保持大脑的清晰视野。仔细观察组织特征以监测抽吸深度。
皮质组织呈淡粉色。下面的胼胝体表现为白色纤维组织。海马 CA1 层为深红色和灰色。
当组织表面变得光滑并且大面积的 CA1 暴露时，停止抽吸。将连接到 Grin 镜头的支架移动到钻孔上方。当 Grin Lens 接触脑组织表面时，将 Z 轴设置为零。
将 Grin 镜片插入背腹轴负 1.32 毫米的孔中。让支架静置 5 到 10 分钟。然后，抬起支架并用生理盐水冲洗孔。
用针头将紫外线树脂涂抹在笑容镜片周围。用紫外线照射该区域 15 秒，以确保树脂变成固体。小心地从 Grin Lens 上取下支架。
用紫外线树脂覆盖整个裸露的头骨。将头板放在颅骨上的适当位置。用紫外线照射整个颅骨和头板 15 秒。
用 3D 打印的保护盖住曝光的 Grin 镜片。使用 M1.6 螺钉将盖子固定在头板上。打开 Miniscope 控制软件，然后单击 Select Config File。
然后，选择 vscode，然后选择 用户配置文件。现在，单击 Run。然后，滑动 LED 电源按钮以调节亮度。
滑动对焦调整按钮，将值设置在接近零的位置。将底板安装到迷你望远镜上，并重新调整迷你望远镜的位置，以获得具有良好成像质量的视野。小心地在迷你内窥镜底板周围涂抹第一层义齿基材。
一旦第一层水泥变硬，从底板到顶板上涂上第二层水泥。在所有义齿基材变硬后，松开固定螺钉并将迷你内窥镜从底板上拆下。将底板盖放入底板以保护外露的 Grin 镜头并拧紧固定螺钉。
成像后，将成像数据从 AVI 转换为 HDF5 格式。应用非刚体运动校正并对运动校正的影片进行下采样。对下采样数据应用 extract 以识别单个细胞信号。
然后，应用单元格检查并手动选择潜在的单元格。点击 保存数据 在关闭单元格检查窗口之前。最后，保存数据文件。
在体内钙成像不成功的情况下，在成像视野中没有观察到活性细胞。成功的体内钙成像显示不到 10 个活性细胞，没有明显的血管。超过 50 个活性细胞，可见血管。
以及数百个具有清晰血管的活性细胞。从成功的体内钙成像记录中提取的单个细胞叠加在视野上，并显示具有代表性的钙痕迹。在小鼠脑切片中验证 GCaMP6F 表达的位置和 grin lens 的轨迹。
