首先，将无菌手术设备安排在手术平台上。膈肌肌电图 （EMG） 电极植入后约 72 小时，称量大鼠。在麻醉大鼠之前，将大鼠放在 Bowman 式笼子中。
小心地连接电线，从大鼠背部离开到前置放大器，以记录双侧膈肌肌电图。接下来，将麻醉的大鼠置于俯卧位。从脖子到耳朵左右的地方剃掉头发，一直到肩胛骨。
将裸露的电极线从大鼠的背部连接到放大器。用 4%葡萄糖酸氯己定和异丙醇交替消毒皮肤 3 次。用无菌手术罩覆盖大鼠，上背部除外。
使用手术刀，做一个 4 厘米的头尾切口。缩回皮肤并切割肩峰斜方肌。然后解剖菱形肌，露出脊髓肌。
在手术显微镜下，去除 C1 至 C3 的脊髓。然后使用 rongeur 小心地在 C2 处进行椎板切除术，而不会损伤主要动脉或神经。切开并去除 C2 处的硬脑膜。在监测膈肌肌电图的同时，将角解剖刀插入背根进入脊髓的点正下方，一直切开到腹面的中点。然后记录麻醉大鼠的常呼吸同侧膈肌 EMG 活动，并进行 C2 脊髓半切术。
用 3-0 缝合线缝合脊髓肌肉，然后闭合皮肤切口。为了保持水合作用，每 50 克动物体重皮下注射 1 毫升生理盐水。将大鼠放在带有加热垫的干净笼子中进行回收。
将前置放大器的高带通滤波器设置为 100 赫兹，将低通滤波器设置为 1000 赫兹。收集 1 到 2 分钟的左右半侧膈肌 EMG eupneic 记录后，以适当的格式保存日期以供进一步分析。C2 脊髓半切的一个成功例子显示，在受伤后第 3 天，麻醉下不存在真肺同侧膈肌 EMG 活动。
清醒条件下的膈肌 EMG 活动显示，与受伤前基线相比，同侧膈肌真皮减少。对侧膈肌肌电图活动在麻醉和清醒情况下均增加。
