油红 O 染色用于可视化 HepG2 细胞中细胞内脂滴积累

首先，在六孔板的 DMEM 中培养 Hep G2 的种子过夜培养物。在 37 摄氏度下培养细胞 24 小时。孵育后，向每个孔中加入 2 mL 含油酸的细胞培养基。

将细胞在 37 摄氏度下孵育 24 小时。第二天，去除培养基并用 PBS 洗涤细胞两次。向每个孔中加入 1 毫升油红 O 固定剂，孵育 30 分钟。

丢弃固定剂，用蒸馏水洗涤细胞两次。向每个孔中加入 1 毫升 60% 异丙醇，并孵育 30 秒。弃去异丙醇后，加入 1 毫升新鲜制备的油红 O 染色溶液，孵育 20 分钟。

现在，加入 1 毫升 60% 异丙醇并孵育 30 秒。用水洗涤细胞 5 次以去除多余的染料。显微镜成像后，在计算机上观察被蒸馏水覆盖的细胞。

成像后，从板中取出水并使其干燥。向每个孔中加入 2 mL 异丙醇，并在轨道摇床上摇动板 10 分钟。将 100 微升细胞悬液转移到 96 孔板中，每组有 16 个孔。

在 510 纳米的酶标仪上，测量光密度以计算脂质含量。与对照细胞相比，用油酸处理的 Hep G2 细胞显示出红色染色强度增加，表明脂质液滴形成较高。Hep G2 细胞中的脂滴和脂质随着油酸浓度的升高而增加。