用于单分子全内反射荧光显微镜的生物素-PEG 流通池组件的制备

要准备流通池，请将生物素钉盖玻片切成两半。通过蚀刻并将载玻片咬成大约 2.4 厘米乘 1 厘米的块来准备小玻璃块。使用 0.8 毫米的金刚石涂层钻头，在玻璃片上钻两个相距 1.4 毫米的孔。

通过插入入口或出口管路来测试孔。将双面胶带剪成与玻璃片相同的形状。对齐胶带上的载玻片，然后用针刺穿每个孔，以标记它们在胶带上的位置。

使用剃须刀片，切出一个包含两个孔的通道。用丙酮清洁玻璃片。用薄纸擦干玻璃片，然后将其放在干净的表面上。

然后撕下胶带的一侧并将其粘在玻璃片上，使两个孔都完全位于通道内。使用 P1000 移液器吸头，用力按压胶带，将胶带密封到玻璃片上。撕下两块玻璃片胶带的第二面。

将玻片放在干净的表面上，粘性面朝上。使用塑料镊子，从边缘拾取半生物素钉盖玻片，然后将钉子功能化的一面降低到胶粘剂上。用手指按下盖玻片以将其固定到位。

使用适度压力的移液器吸头摩擦盖玻片表面以去除气泡。然后翻转流通池。对于每个流通池，切割大约 10 厘米的聚乙烯 20 和 60 管路。

以小于 45 度的角度切割管路尖端，然后将管路插入载玻片上的孔中。如果整个直径正确，则管子会自行在孔中站立。将环氧树脂成分充分混合。

使用 P200 移液器吸头轻拍管子和每个玻璃片周围的环氧树脂。让环氧树脂固化 30 到 60 分钟。