首先,将灰霉菌的培养塞从菌落的最外缘转移到无菌马铃薯葡萄糖螺旋板上。将板在 25 摄氏度下孵育 7 到 10 天,或直到真菌菌落到达板的边缘。在蒸汽灭菌、水合、经过认证的有机大麦粒中培养灰芽孢 B 7 至 10 天。
或者直到谷物表面完全定植。接下来,用松木线虫悬浮液接种灰葡萄孢杆菌培养物。将培养瓶在黑暗中孵育 7 到 10 天,或直到真菌菌落完全消耗并且线虫爬上培养瓶壁。
要分离松木线虫,请用自来水冲洗培养瓶壁。然后将内容物倒在纸巾上,放在 Baermann 漏斗或托盘中,并将线虫浸入水中。24 至 48 小时后,使用 38 微米筛网回收线虫。
将积累的线虫清洗到装有自来水的容器中。使用这种方法,松林线虫种群在 8 天的生长期内增加了 100 倍。