将麻醉的鼠标放置在立体定位框架中。识别前囟和 lambda,确保两个标志之间的高度差不超过 100 微米。用无菌铅笔在头骨上找到并标记计算出的坐标。
在坐标周围,创建 2 毫米 x 2 毫米开颅手术窗口的轮廓。检查麻醉深度后,使用高速钻头创建一个 2 毫米 x 2 毫米的开颅手术窗。涂抹 0.5 至 1 毫升生理盐水,以防止脑表面干燥。
使用注射器针头和细镊子去除硬脑膜。接下来,使用高速钻头为硅探针参比电极创建一个单独的毛刺孔,通常距离颅窗 1 到 2 毫米。在颅骨上涂抹 0.2 毫升低毒硅粘合剂,以完全密封开颅手术。
使用头板和螺钉,将鼠标头固定在电生理记录装置上。然后用荧光染料涂覆硅探针柄,以便在实验后可以重建探针轨迹。之后,将探头安装在机械手上并设置所需的角度。
要将记录探针降低到颅窗中心内的大脑表面,请手动将探针插入约 300 微米的深度。插入到此深度后,将探针自动缓慢降低至每分钟 200 微米至目标深度,以尽量减少组织损伤。最后,将矿物油涂抹在开颅窗口内的大脑表面以防止干燥。
然后使用 Intan 记录控制器以 30 kHz 的频率记录来自硅探针和 ECOG 的数据。大多数记录的神经元在七氟烷麻醉期间减少了放电。VLPAG 放电从基线到七氟烷期间显着降低。
这种减少在所有 VLPAG 神经元中都是一致的。