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01:41 min
May 24th, 2024
DOI :
10.3791/202328-v
* 这些作者具有相同的贡献
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首先,从小鼠身上获取视黄醛条带,并在 0.1 摩尔二甲胂酸钠缓冲液中洗涤 5 次,每次 15 分钟。然后将试纸条与亚铁氰化钾和四氧化锇溶液在冰上避光孵育 1.5 小时。用双蒸水洗涤试纸 3 次,并与 1% 硫代碳酰肼一起孵育。
用双蒸水冲洗后,依次用四氧化锇、乙酸铀酰和硝酸铅处理视网膜条带。用增加浓度的乙醇使视网膜条脱水。然后,用含有等量乙醇和丙酮的溶液处理视网膜条带 20 分钟,然后进行两次丙酮洗涤,每次 20 分钟。
在室温下在黑暗中依次将 Retina 条带在丙酮树脂混合物中孵育。在 45 摄氏度下用纯树脂浸润视网膜条带 24 小时,然后在 60 摄氏度下用新鲜树脂浸润 48 小时。与传统的双固定方法相比,使用这种方法对视网膜感光器末梢进行聚焦离子束扫描电子显微镜检查,更清晰地保留了细胞膜结构和囊泡轮廓。
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使用体积电子显微镜在 3D 中可视化视网膜突触结构
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