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ATP 生物荧光法测定

Overview

萤火虫,在荧光素酶酶转换成氧化荧光素,叫荧光素的化合物并因此产生光或"发光"。这种反应需要能量来源于 ATP 要继续进行,所以研究人员利用荧光素酶-荧光素相互作用来衡量细胞 ATP 含量。鉴于 ATP 的作用作为单元格的货币的能量,ATP 生物发光技术可以提供洞察细胞代谢和细胞的整体健康。

在这个视频中,朱庇特讨论细胞呼吸,专门审查葡萄糖代谢在 ATP 生产的结果。这被其次是 ATP 生物发光技术和广义的协议,这种技术背后的原理。最后,一项调查研究人员是怎样目前使用 ATP 生物发光技术来评估细胞活力在各种实验条件。

Procedure

ATP 生物发光技术是一种常用的技术,用于定量 ATP 水平和生活、 新陈代谢活跃细胞检测。ATP 或三磷酸腺苷是所有生物能源的主要来源和"所有"我们指的是所有。在细胞水平上,ATP 生成通过一组称为细胞呼吸作用的代谢过程。

今天,我们将简要讨论参与细胞呼吸作用的的途径。接下来,我们会介绍 ATP 生物发光技术,背后的原则并通过执行这个方法一步一步的协议。最后,我们将看到如何科学家们正应用这一技术在他们当前的研究。

让我们首先通过引入细胞呼吸作用。这种现象涉及到几个的代谢过程,但我们会专注于处理葡萄糖代谢的一个。

在细胞质,糖酵解途径将葡萄糖转换为丙酮酸,和在过程中会生成两个 ATP 分子。丙酮酸被运输到线粒体,在那里它转化为乙酰辅酶 A — — 一个还会生成二氧化碳的过程。虽然仍然在线粒体,乙酰辅酶 A 则进入三羧酸或三羧酸循环,在此期间再次生成二氧化碳,作为是高能的分子 NADH 和 FADH2。这些分子最终"带入"电子的电子传递链或等。

内等,电子按顺序转移之间不同的蛋白复合物在线粒体内膜之前将氧气转换为水。在此过程中,质子是"注入"线粒

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