该协议可以通过使用多泡帮助保持货物稳定性，这既是小分子，也可以是蛋白质，从而减少与溶剂的碳相互作用。这种新技术可用于提高发展中国家的疫苗覆盖率，因为由于运输和储存设施效率低下，疫苗的功能往往受到损害。要制造多泡，首先使用一毫升转移移液器将 800 微升 10%CMC 添加到 0.92 毫升玻璃瓶中。
合成PCLTA，在200微升DCM中混合1000克每毫升14千吨PCL。合成PLGADA，将每毫升1000克5千达吨PLGADA混合成200微升氯仿。以0.005比1的比例将光启动器与感兴趣的聚合物混合物混合，将所得溶液的200微升装入安装在注射器泵上的一毫升玻璃注射器中，该注射器泵连接到内径为0.016英寸的分配不锈钢管。
使用微型电机控制聚合物管的向前和向后运动， 将聚合物注入玻璃瓶中的10%CMC，形成多泡，在紫外光下以每平方厘米2瓦的速度在紫外光下固化多泡60秒，然后闪冻液氮中的多泡30秒，在零下85摄氏度的0.01毫巴真空下将载体冻干过夜。为了将感兴趣的货物居中于多泡中，将货物与 5%CMC 混合在旋转器中过夜，以提高货物的粘度，然后手动将两个微升货物混合物注入多泡中。当所有货物都已注入时，重新固化，闪光冻结，并冻干注入的多泡，正如刚刚证明的。
第二天早上，用钳子将多泡从干燥的CMC分离，用去维化的水清洗多泡，以去除任何残留的CMC。然后将多泡切成两半，用共和显微镜对两半进行成像，以确保货物居中。对于小分子货物释放，在37摄氏度的PBS的400微升中孵育具有中心旗的多泡，以适当的孵育长度。
在每个实验时间点，收集上经剂，并在小瓶中加入400微升新鲜PBS。然后使用板读卡器量化收集的上一液的荧光强度。对于近红外激活，将聚合物溶液与疏水金纳米棒以一比九的比例混合，以0.005比1的比例添加光启动器。
将产生的混合物注入含有 800 微升 10% CMC 的 0.92 毫升玻璃瓶中，并在紫外线照射下固化多泡。如证明，在闪冻和冻干后，用去维化水清洗多泡，并在37摄氏度的PBS中孵育400微升的载体，以进行适当的孵育期。在孵育结束时，在8安培下用8安培激活多泡之前和之后获得多泡的向前的红外图像，每周三次，PLGADA多泡四周，PCL-PCLTA多泡14周。
在每个实验时间点，收集上经剂，并在小瓶中加入400微升新鲜PBS。然后根据前视红外图像的温度值计算激光激活前和激光激活后多泡之间的温差。添加 10%CMC 水溶液可产生完整的多泡悬浮液，成功维护多泡球。
在没有 CMC 的情况下，货物注入多泡会导致泄漏，从而导致多泡内货物滞留不足。为了解决这种泄漏问题，使用碳酸钾在用三聚丙烯酮进行端盖后分离，可增加PCLTA的粘度，通过将货物与5%CMC混合，可提高货物的粘度。PLGADA 多泡的粘度足以方便货物居中，不需要通过碳酸钾进行调制。
请注意，在多泡注射前将HIV gp120/41抗原与无海基糖混合后，抗体的结合效率没有统计学上显著差异。在PLGAD多泡中观察到延迟的爆发释放，在第19天中，在37摄氏度下孵育的多泡，在第5天，在50摄氏度下孵育的多泡。此外，PLGADA多泡和PCL和PCLTA多泡含有金纳米棒可以成功地多次激光激活。
当形成多泡时，请注意保护试剂免受光线的利用，并立即使用溶液。在开发这项技术之后，我们也想探索自动化这个过程，以扩大多泡生产。
