三位一体体回流是一种常见的瓣膜疾病,会导致心力衰竭。这个老鼠 MR 模型可以帮助我们进一步理解心力衰竭的基本机制。该模型可用于诱导 MR 在跳动的心脏模仿血动力学观察到的患者的这种瓣膜病变,使该模型临床相关。
显微外科和处理经验将有助于复制此协议,熟悉超声心动成像和图像解释是成功插针的关键方面。由于这是一种图像引导技术,因此对方法的可视化演示有助于理解过程。在麻醉的350至400克成年Sprague-Dawley大鼠中按照标准方案进行左胸切除术后,使用6-0PROLENE缝合线和微内夹持有人在左心室顶点放置一个包条缝合线。
轻轻系绳状缝合线,以稳定顶点,并插入一个 23 量表针,用盐水冲洗,并在近端的插针插入包条缝合线的中心和左心室腔。用一只手稳定引导针头,用另一只手同时操作跨食管回波探头,实现最佳回波视图,使针头可视化。使用实时超声波指导,将针头推进到前手套叶的心室侧。
确认针头位置后,通过阀单在一次精细运动中推进针头。一旦通过传单,将针头缩回远离手套阀的左心室,并让一个助手打开彩色多普勒成像,以确认 MR 调整回声探头,以便获得更好的视图。一旦 MR 得到确认,从左心室腔完全缩回针头,并轻轻地系上包条缝合线。
然后使用无菌纱布吸收顶点和胸腔上的任何血液。经过5至10分钟的稳定心脏功能,使用中断的4-0Vicryl缝合线近似肋骨,同时将异氟素减至2%下,插入胸管到第六间腹腔空间,并将管子固定到无菌窗帘上,以避免管子意外进入胸腔,然后完成接近肋骨。使用连续缝合将同氟的肌肉层关闭在 1.5%,用异氟兰的皮层在 1%时将 10 毫升 Luer 锁阀倾斜注射器连接到胸管,并在取出管前从胸腔排出 10 到 12 毫升的空气。
一旦管被切除,管理最后皮下剂量的卡普罗芬。关闭异氟烃后,继续机械通气,同时大鼠从麻醉中分出监测生命体征。在自发呼吸开始时,关闭通风,以测试大鼠保持这种呼吸的能力和良好的外周腔氧饱和度。
一旦大鼠能够在没有通风的情况下保持外周毛细管氧饱和度,将锚定缝合线切到气管上,并排泄动物。当大鼠是流动的,将动物转移到一个干净的笼子与最小的床上用品,并继续监测生命体征与手持外设毛细管氧饱和度监测器。醒来后三小时内,服用丁丙诺啡。
手术后两周,将麻醉大鼠放在右侧的十分区域内,插入一个8兆赫的8-法国心内超声探针,将少量凝胶涂在动物的食道上。在双室视图中使用彩色多普勒成像,将左心室和左中庭可视化,并测量左中庭和 MR 喷射的面积,以便按指示计算 MR 喷射面积分数。要近似回流孔的面积,请使用针头的外径使用公式计算 23 个量表指针的面积。
使用回流喷射孔口的多普勒门获得连续波多普勒成像,并跟踪波形以计算回流喷射的速度时间积分。使用公式估计 MR 卷。然后顺时针顺时针旋转回波,获得肺静脉的脉冲波多普勒成像,并使用方程计算收缩和舒张波速度。
在这些图像中,可以观察到针头插入手套阀的方向。在这里,在手术显示后两周内,在一只具有代表性的大鼠中,在手套瓣叶上的孔中留下的孔。手术后两周,MR大鼠的心脏是球形的,严重扩张,一个生动的 MR 喷射是明显的,平均面积约21平方毫米,平均速度时间积分约40厘米。
规范化的 MR 分数通常约为 42%,根据美国超声心动图学会的指南,这被认为是严重的。MR 的严重程度足以诱发肺流量逆转,收缩/舒张比从基线的约 0.9 降至两周时约负 0.7。使用食管超声心动图进行实时成像,并在跳动的心脏中引入针头以刺穿手套传单,这是一种可行的外科手术,可以传授。
我们的模型可以与心室心肌病相结合,研究心脏重塑,并有助于调查早期发病与晚发性 MR 对心脏重塑的影响。