我们的研究重点是使用受控成像设置进行标准化的宏观伤口测量，通过确保一致性和光线位置和距离或协议旨在最大限度地减少可变性并提高临床前模型中伤口闭合测量的通用性。我们解决了显微伤口测量中缺乏标准化的问题。当前方法通常缺乏控制条件，导致数据不一致。
我们的协议提供了适用的设置，可确保均匀的照明、定位和距离，降低概率并提高可重复性。我们的方案通过标准化成像条件消除了常见的测量偏差来源。与手动方法不同，它确保了实验之间的一致性，从而能够进行准确比较并减少伤口面积和周长测量的可变性。
我们的结果通过提供标准化方法实现更精确和可重复的伤口测量数据。这是评估治疗干预和临床前伤口研究的基础。首先，将开槽铝型材固定在屋顶侧边的内部区域。
将两块中心为聚乙烯的矩形铝板放入屋顶型材的凹槽中，以便滑过两个型材。使用双面胶带将 20 厘米 RGB LED 日光灯以 45 度角安装在第一个面板的下侧边缘。然后，在每个屋顶板上安装一个矩形泡沫板，其中央圆形切口为 7.82 厘米，以便安装相机镜头。
对于地板结构，首先从 2.54 x 40 厘米的白色泡沫板的每个角切割边长为 40 厘米的方块。此步骤可确保泡沫板正确安装在地板区域轮廓内。修剪边角后，将泡沫板放在地板区域轮廓的顶部。
将钩环紧固件条连接到铝型材 A 和 B，以轻松作内部照相亭元件。固定的胶粘剂紧固件在距离一侧两个泡沫纸板方块的边缘一厘米处，并将它们放置在前后墙上。使用硅胶，将两块面板粘在 C 面和 D 面上，形成左右两侧壁。
将 3D 打印面罩放置在距离预切割的 40 x 28 厘米白色泡沫板矩形边缘 11.5 厘米处，以保持小鼠处于吸入麻醉状态。然后，将其粘在参考底座的中心。将 3D 打印的标尺块固定在距离鼠标底座左侧 1 厘米的位置，以容纳用于数字图像处理的测量参考元件。
然后，将一把 15 厘米的不锈钢刻度尺连接到标尺块上，并将完整的参考底座安装在机舱内以进行图像缩放。麻醉小鼠后，使用无菌的 5 毫米活检打孔器以圆周运动施加压力，以在肩胛骨水平创建真皮表皮切口。用锯齿镊子取下皮瓣，用虹膜尖剪刀剪断。
使用珠宝镊子，在伤口上放置一厘米直径的圆形真皮膜，以防止污染和收缩。要拍摄伤口的图像，请将参考底座放在照相亭地板的中央。然后，将麻醉的鼠标置于鼠标平台上的俯卧位置。
安装 Photo Booth 的前墙并拍摄宏观图像。要在 imagej 中打开创建的备份映像，请导航到 文件， 可选 和 搜索.然后，单击 Open（打开）。
现在最大化图像，选择直线工具，然后使用加号键放大鼠标旁边的标尺。在标尺图像上绘制一条 10 毫米的直线。转到 analyze 并设置 scale。
输入 10 作为已知距离。将长度单位设置为毫米，然后单击 确定。接下来，使用矩形工具选择伤口周围宽度和高度为 150 的区域，并记录 X 和 Y 值。
然后，右键单击矩形并选择 duplicate。为复制的图像命名，然后按 Enter。在新图像中，按两次加号可放大。
要将图像分隔为颜色通道，请导航到 Image（图像）、Type（类型）和 RGB Stack（RGB 堆栈）。在红色通道图像中，右键单击图像，选择复制，然后按 好 在复制窗口中。然后，单击红色通道图像，选择图像、调整和阈值对其进行分割。
选择 Default （默认） 并单击 Apply （应用） 以应用阈值。校正感兴趣区域或 ROI，以确保伤口完全覆盖并避免分割失真。要定义感兴趣区域的周长，请选择 Edit，然后转到选择并选择 Create Selection。
之后，选择 编辑，然后选择 选择 并单击 添加到管理器 将其添加到 ROI 管理器。要验证分段，请打开 ROI manager 窗口并选择要查看的 ROI。点击 更多， 翻译，输入记录的 X 和 Y 值，然后按 Ok.
最大化原始图像，然后在 ROI 管理器中选择 ROI。使用箭头键调整 ROI，直到它与伤口对齐。确认分割后，通过选择 Analyze and Measure 获取伤口测量值。
由于炎症过程，伤口闭合百分比最初在第 2 天增加到 138.04%，然后下降并进展到修复和巩固阶段，第 7 天后观察到一致的闭合。伤口边缘回缩距离最初在炎症阶段增加，但在第 3 天后开始减小，如 Gilman 方程所示，表明伤口逐渐收缩。
