Serial Enrichment of Spermatogonial Stem and Progenitor Cells (SSCs) in Culture for Derivation of Long-term Adult Mouse SSC Lines

Spermatogonial stem and progenitor cells (SSCs) of the testis represent a classic example of adult mammalian stem cells and preserve fertility for nearly ...

Weill Cornell Medical College 

&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x8868;&#x660E;&#x4E86;&#x65B0;&#x8840;&#x6DB2;&#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x7ED2;&#x6BDB;&#x5C3F;&#x56CA;&#x819C; (CAM) &#x7684;&#x9E21;&#x80DA;&#x653E;&#x7684; onplants &#x662F;&#x5173;&#x952E;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x5BF9;&#x7684;&#x9488;&#x72B6;&#x80F6;&#x539F;&#x4EE5;&#x524D;&#x4E0D;&#x660E;&#x7684;&#x95F4;&#x8D28;&#x80F6;&#x539F;&#x9176;&#x88C2;&#x89E3;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7528;&#x4E8E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684; CAM &#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x641C;&#x7D22;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x7279;&#x70B9;&#x4E3B;&#x673A;&#x79BD;&#x80F6;&#x539F;&#x9176;&#x8D1F;&#x8D23;&#x80F6;&#x539F;&#x91CD;&#x5851;&#x4E0E;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; (&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;) &#x786E;&#x5B9A;&#x51F8;&#x8F6E; onplant &#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x9E21;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-13 &#xFF08;chMMP-13&#xFF09; &#x662F;&#x552F;&#x4E00;&#x7684;&#x9176;&#xFF0C;&#x5176;&#x611F;&#x5E94;&#x548C;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E0E;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x53CA;&#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x53D1;&#x75C5;&#x4E0D;&#x8C0B;&#x800C;&#x5408;&#x3002;ChMMP-13 cDNA &#x514B;&#x9686;&#x5E76;&#x5DF2; recombinantly &#x8868;&#x793A;&#x3002;ChMMP-13 &#x86CB;&#x767D;&#x4E00;&#x76F4;&#x7EAF;&#x51C0;&#x3001; &#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x4F53;&#x5916;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x51F8;&#x8F6E;&#x539F;&#x4F4D;&#x3002;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-13 &#x9633;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8840;&#x7BA1;&#x523A;&#x6FC0;&#x540E;&#x4E0D;&#x4E45;&#x51FA;&#x73B0;&#x5728;&#x51F8;&#x8F6E;&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x5806;&#x79EF;&#x5728;&#x80F6;&#x539F; onplant &#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;&#x5F62;&#x6001;&#x4E0A;&#xFF0C;chMMP-13 &#x5305;&#x542B;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x663E;&#x793A;&#x4E3A;&#x9020;&#x8840;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;/&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBF;&#x88AD;&#x3002;&#x4F53;&#x5916;&#xFF0C;chMMP-13 &#x9176;&#x539F;&#x662F;&#x8FC5;&#x901F;&#x548C;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x901A;&#x8FC7;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5C3F;&#x6FC0;&#x9176;&#x578B;&#x7EA4;&#x6EB6;&#x9176;&#x539F;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5242;/&#x7EA4;&#x6EB6;&#x9176;&#x539F;/&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x6EB6;&#x9176;&#x5C42;&#x53E0;&#x6210;&#x80F6;&#x539F;&#x9176;&#x88C2;&#x89E3;&#x672C;&#x673A;&#x6709;&#x80FD;&#x529B;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; (r/r) &#x7A81;&#x53D8;&#x6297;&#x80F6;&#x539F;&#x9176;&#x80F6;&#x539F;&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x6606;&#x866B;&#x5916;&#x6FC0;&#x7D20;&#x7684;&#x7EAF;&#x51C0; chMMP 13 &#x5F81;&#x6C42;&#x4E2D;&#x76F8;&#x5F53;&#x4E8E;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x51F8;&#x8F6E; onplants &#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x54CD;&#x5E94;&#x3002;ChMMP-13 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x963B;&#x6B62;&#x7684;&#x6307;&#x793A;&#xFF0C;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x6EB6;&#x9176;&#x6FC0;&#x6D3B; chMMP-13 &#x53EF;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4F53;&#x5185;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x5B8C;&#x5168;&#xFF0C;&#x6269;&#x5927;&#x8F6F;&#x9AA8;/&#x9AA8;&#x5438;&#x6536;&#x5230;&#x7684;&#x4EE5;&#x524D;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-13 &#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x4F5C;&#x7528;&#x80F6;&#x539F;&#x91CD;&#x6784;&#x53C2;&#x4E0E;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7EA7;&#x8054;&#x3002;

&#x80F6;&#x539F;&#x9176;&#x6EB6;&#x89E3;&#x672F;&#x4F9D;&#x8D56;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-13 (&#x80F6;&#x539F;&#x9176;-3&#xFF09;&#x3002;

We have demonstrated previously that new blood vessel formation induced by angiogenic growth factors in onplants placed on the chorioallantoic membrane (CAM) of the chick embryos is critically dependent on the cleavage of fibrillar collagen by a previously unidentified interstitial collagenase. In the present study we have used a quantitative CAM angiogenesis system to search for and functionally characterize host avian collagenases responsible for the collagen remodeling associated with angiogenesis. Among the matrix metalloproteinases (MMPs) identified in the CAM onplant tissue, the chicken MMP-13 (chMMP-13) was the only enzyme whose induction and expression coincided with the onset of angiogenesis and blood vessel formation. The chMMP-13 cDNA has been cloned and recombinantly expressed. The chMMP-13 protein has been purified, characterized in vitro, and examined in situ in the CAM. MMP-13-positive cells appear in the CAM shortly after angiogenic stimulation and then accumulate in the collagen onplant tissue. Morphologically, the chMMP-13-containing cells appear as hematopoietic cells of monocyte/macrophage lineage. In vitro, the chMMP-13 proenzyme is rapidly and efficiently activated through the urokinase plasminogen activator/plasminogen/plasmin cascade into a collagenase capable of cleaving native but not the (r/r) mutant collagenase-resistant collagen. Surprisingly, nanogram levels of purified chMMP-13 elicit an angiogenic response in the CAM onplants comparable with that induced by the angiogenic growth factors. The chMMP-13-mediated response was efficiently blocked by select protease inhibitors indicating that plasmin-activated chMMP-13 can function as an angiogenic factor in vivo. Altogether, the results of this study extend the physiological role of MMP-13, previously associated with cartilage/bone resorption, to the collagen remodeling involved in the angiogenic cascade.

Collagenolysis-dependent angiogenesis mediated by matrix metalloproteinase-13 (collagenase-3).

Nous avons d&#xE9;montr&#xE9; pr&#xE9;c&#xE9;demment que la formation de nouveaux vaisseaux sanguins induite par des facteurs de croissance angiog&#xE9;niques dans onplants plac&#xE9;s sur la membrane chorio (CAM) des embryons de poulet d&#xE9;pend de fa&#xE7;on critique sur le clivage du collag&#xE8;ne fibrillaire par une collag&#xE9;nase interstitielle non identifi&#xE9;s auparavant. Dans la pr&#xE9;sente &#xE9;tude, nous avons utilis&#xE9; un syst&#xE8;me de l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se quantitative CAM pour rechercher et &#xE0; caract&#xE9;riser fonctionnellement collag&#xE9;nases h&#xF4;tes aviaires responsables de la remodelage du collag&#xE8;ne associ&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se. Parmi les m&#xE9;talloprot&#xE9;ases matricielles (MMP) identifi&#xE9;s dans le tissu onplant CAM, le poulet MMP-13 (chMMP-13) &#xE9;tait la seule enzyme dont l&#x26;#39;induction et d&#x26;#39;expression a co&#xEF;ncid&#xE9; avec le d&#xE9;but de l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se et la formation des vaisseaux sanguins. L&#x26;#39;ADNc chMMP-13 a &#xE9;t&#xE9; clon&#xE9; et exprim&#xE9; par recombinaison. La prot&#xE9;ine chMMP-13 a &#xE9;t&#xE9; purifi&#xE9;, caract&#xE9;ris&#xE9; en ce vitro, et examin&#xE9; in situ dans la CAM. MMP-13-cellules positives apparaissent dans la CAM peu de temps apr&#xE8;s la stimulation angiog&#xE9;nique, puis s&#x26;#39;accumulent dans les tissus onplant collag&#xE8;ne. Morphologiquement, les cellules chMMP-13-contenant apparaissent comme les cellules h&#xE9;matopo&#xEF;&#xE9;tiques de monocytes / macrophages lign&#xE9;e. In vitro, l&#x26;#39;chMMP-13 proenzyme est rapidement et efficacement activ&#xE9; par l&#x26;#39;activateur du plasminog&#xE8;ne urokinase / plasminog&#xE8;ne / plasmine cascade dans une collag&#xE9;nase capable de cliver natif mais pas l&#x26;#39;(r / r) mutante r&#xE9;sistante collag&#xE9;nase collag&#xE8;ne. &#xC9;tonnamment, les niveaux de l&#x26;#39;ordre du nanogramme de purifier chMMP-13 provoquer une r&#xE9;ponse angiog&#xE9;nique dans les onplants CAM comparables &#xE0; celle induite par les facteurs de croissance angiog&#xE9;niques. La r&#xE9;ponse chMMP-13-m&#xE9;diation a &#xE9;t&#xE9; bloqu&#xE9; efficacement par certains inhibiteurs de la prot&#xE9;ase indiquant que la plasmine activ&#xE9;e chMMP-13 peut fonctionner comme un facteur angiog&#xE9;nique in vivo. Au total, les r&#xE9;sultats de cette &#xE9;tude d&#x26;#39;&#xE9;tendre le r&#xF4;le physiologique de la MMP-13, qui &#xE9;taient pr&#xE9;c&#xE9;demment associ&#xE9;s avec le cartilage / r&#xE9;sorption osseuse, le remodelage du collag&#xE8;ne impliqu&#xE9; dans la cascade angiog&#xE9;nique.

Angiogen&#xE8;se induite collag&#xE9;nolyse-d&#xE9;pendante par Matrix Metalloproteinase-13 (collag&#xE9;nase-3)

Kollagenolyse-abh&#xE4;ngigen Angiogenese durch Matrix-Metalloproteinase-13 (Kollagenase-3) vermittelt.

Abbiamo dimostrato in precedenza che formazione vaso nuovo sangue indotta da fattori di crescita angiogenetici in onplants collocati sulla membrana chorioallantoic (CAM) di embrioni del pulcino dipende criticamente la fenditura del collagene fibrillare da una non meglio identificata precedentemente collagenasi interstiziale. Nel presente studio abbiamo utilizzato un sistema di angiogenesi CAM quantitativo per cercare e caratterizzare funzionalmente collagenasi avian host responsabile per il rimodellamento del collagene associati con l&#39;angiogenesi. Tra la matrice metalloproteinasi (MMP) identificato nel tessuto onplant CAM, il pollo MMP-13 (chMMP-13) era il solo enzima cui induzione ed espressione ha coinciso con l&#39;inizio della formazione dell&#39;angiogenesi e dei vasi sanguigni. Il cDNA di chMMP-13 &egrave; stato clonato e recombinantly espresso. La proteina chMMP-13 &egrave; stata purificata, caratterizzata in vitro ed esaminata in situ nel CAM. MMP-13-positivo cellule appaiono nel CAM poco dopo stimolo angiogenico e quindi si accumulano nel tessuto collagene onplant. Morfologicamente, le cellule contenenti chMMP-13 appaiono come cellule ematopoietiche del lignaggio di monociti/macrofagi. In vitro, il proenzima chMMP-13 &egrave; rapidamente ed efficientemente attivato attraverso la cascata di attivatore/plasminogeno/plasmina plasminogeno urochinasi in una collagenasi in grado di scissione nativo ma non il collagene collagenasi-resistente mutante (r/r). Sorprendentemente, livelli nanogrammo di chMMP-13 purificato suscitano una risposta angiogenic nella CAM onplants paragonabile a quella indotta dai fattori di crescita angiogenetici. La risposta di chMMP-13-mediata in modo efficiente &egrave; stata bloccata da inibitori della proteasi selezionare indicando che quello attivato a plasmina chMMP-13 pu&ograve; funzionare come un fattore angiogenic in vivo. Complessivamente, i risultati di questo Studio estendono il ruolo fisiologico della MMP-13, precedentemente associati con cartilagine riassorbimento, per il rimodellamento del collagene coinvolti nella cascata della angiogenesi.

Collagenolysis-dipendente angiogenesi mediata da matrix metalloproteinase-13 (collagenasi-3).

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30CB;&#x30EF;&#x30C8;&#x30EA;&#x80DA;&#x306E;&#x6F3F;&#x5C3F;&#x819C;&#xFF08;CAM&#xFF09;&#x4E0A;&#x306B;&#x914D;&#x7F6E;onplants&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306F;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x6B63;&#x4F53;&#x4E0D;&#x660E;&#x306E;&#x9593;&#x8CEA;&#x30B3;&#x30E9;&#x30B2;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x306E;&#x5207;&#x65AD;&#x306B;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x7684;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3092;&#x691C;&#x7D22;&#x3057;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E;&#x30EA;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x9CE5;&#x985E;&#x306E;&#x30B3;&#x30E9;&#x30B2;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x306A;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;CAM&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; CAM&#x306E;onplant&#x7D44;&#x7E54;&#x3067;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;MMP&#xFF09;&#x306E;&#x3046;&#x3061;&#x3001;&#x9D8F;MMP-13&#xFF08;chMMP-13&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x958B;&#x59CB;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x305F;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002; chMMP-13&#x306E;cDNA&#x3092;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x3001;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; chMMP-13&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3001;CAM&#x306E;&#x5834;&#x3067;&#x691C;&#x8A0E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; MMP-13&#x967D;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3059;&#x3050;&#x306B;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x523A;&#x6FC0;&#x5F8C;&#x306B;CAM&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;onplant&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F62;&#x614B;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x3001;chMMP-13-&#x542B;&#x6709;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x5358;&#x7403;/&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7CFB;&#x306E;&#x9020;&#x8840;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002; in vitro&#x3067;&#x3001;chMMP-13&#x30D7;&#x30ED;&#x9175;&#x7D20;&#x306F;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x304B;&#x3064;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5207;&#x65AD;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#xFF08;R / R&#xFF09;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x30B3;&#x30E9;&#x30B2;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x8010;&#x6027;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x30B3;&#x30E9;&#x30B2;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x30A6;&#x30ED;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30CE;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;/&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30CE;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;/&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30F3;&#x30AB;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C9;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3002;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;chMMP-13&#x306E;&#x7CBE;&#x88FD;&#x30CA;&#x30CE;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x306B;&#x5339;&#x6575;&#x3059;&#x308B;CAM onplants&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x51FA;&#x3059;&#x3002; chMMP-13-&#x5A92;&#x4ECB;&#x6027;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;chMMP-13&#x306F;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x9078;&#x629E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x306F;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x30AB;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C9;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E;&#x30EA;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3001;&#x8EDF;&#x9AA8;/&#x9AA8;&#x5438;&#x53CE;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;MMP-13&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x62E1;&#x5F35;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;-13&#xFF08;&#x30B3;&#x30E9;&#x30B2;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;-3&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;Collagenolysis&#x4F9D;&#x5B58;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;

&#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCD1;&#xC544;&#xB9AC; &#xD0DC;&#xC544;&#xC758; chorioallantoic &#xB9C9; (CAM)&#xC5D0; onplants&#xC5D0;&#xC11C; angiogenic &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD608;&#xC561; &#xD608;&#xAD00; &#xD615;&#xC131;&#xC740; &#xBE44;&#xD310;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xAC04; &#xC9C8; &#xC131; &#xCF5C;&#xB77C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; fibrillar &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90;&#xC758; &#xCABC;&#xAC1C; &#xC9D0;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC99D;&#xBA85; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB97C; &#xAC80;&#xC0C9; &#xD558; &#xACE0; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC870;&#xB958; collagenases &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; &#xB9AC; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;&#xC744; &#xC591;&#xC801; &#xCEA0; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC774;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinases (MMPs) &#xCEA0; onplant &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD655;&#xC778;, &#xB2ED;&#xACE0;&#xAE30; MMP-13 (chMMP-13)&#xB294; &#xADF8;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xC2DD; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xACFC; &#xD608;&#xAD00; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xBC1C;&#xBCD1;&#xACFC; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;. ChMMP-13 cDNA &#xBCF5;&#xC81C; &#xB418; &#xACE0; recombinantly &#xD45C;&#xD604;. ChMMP-13 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC815;&#xD654; &#xD558; &#xACE0;, &#xCCB4; &#xC678;, &#xD2B9;&#xC9D5; &#xACE0; &#xCEA0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6D0;&#xB798;&#xC758; &#xC7A5;&#xC18C;&#xC5D0; &#xAC80;&#xC0AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. MMP-13-&#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC138;&#xD3EC; angiogenic &#xC790;&#xADF9; &#xC9C1;&#xD6C4; &#xCE74;&#xBA54;&#xB77C;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; onplant &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xB204;&#xC801; &#xB420;. &#xD615;&#xD0DC;&#xD559;, chMMP-13-&#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xC140; monocyte/macrophage &#xD608;&#xD1B5;&#xC758; &#xC870; &#xD608; &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCCB4; &#xC678;, chMMP 13 proenzyme&#xC740; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; urokinase plasminogen activator/plasminogen/plasmin &#xCE90;&#xC2A4;&#xCF00;&#xC774;&#xB4DC;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xCF5C;&#xB77C; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xACE0;&#xCC29; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; (r/r) &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xCF5C;&#xB77C; &#xBC29;&#xC9C0; &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90;&#xC73C;&#xB85C;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xB098;&#xB178; &#xADF8;&#xB7A8; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC21C;&#xD654; chMMP 13 angiogenic &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xBC1C; &#xB41C; &#xB300; &#xCEA0; onplants&#xC5D0;&#xB294; angiogenic &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. ChMMP-13-&#xC911;&#xC7AC; &#xC751;&#xB2F5; plasmin &#xD65C;&#xC131;&#xD654; chMMP 13 &#xADF8; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; angiogenic &#xC694;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; &#xC791;&#xB3D9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xC120;&#xD0DD; protease &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xCC28;&#xB2E8; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xC5F0;&#xACE8;/&#xBF08; &#xC7AC;&#xD761;&#xC218;&#xC5D0; MMP-13&#xC758; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD655;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xC804;&#xBD80;, angiogenic &#xCE90;&#xC2A4;&#xCF00;&#xC774;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC; &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; &#xB9AC; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1;.

Collagenolysis &#xC885;&#xC18D; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinase-13 (&#xCF5C;&#xB77C;-3)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC;.

Hemos demostrado anteriormente que la formaci&#xF3;n de nuevos vasos sangu&#xED;neos inducida por factores de crecimiento angiog&#xE9;nicos en Onplant colocados en la membrana corioalantoidea (CAM) de los embriones de pollo es cr&#xED;ticamente dependiente de la divisi&#xF3;n de col&#xE1;geno fibrilar por una colagenasa intersticial que era desconocido. En el presente estudio hemos utilizado un sistema CAM cuantitativa angiog&#xE9;nesis para buscar y caracterizar funcionalmente colagenasas de acogida de aves responsables de la remodelaci&#xF3;n del col&#xE1;geno asociada con la angiog&#xE9;nesis. Entre las metaloproteinasas de la matriz (MMP) identificadas en el tejido onplant CAM, el pollo MMP-13 (chMMP-13) fue la &#xFA;nica enzima cuya inducci&#xF3;n y expresi&#xF3;n coincidi&#xF3; con el inicio de la angiog&#xE9;nesis y la formaci&#xF3;n de vasos sangu&#xED;neos. El cDNA chMMP-13 ha sido clonado y expresado recombinantemente. La prote&#xED;na chMMP-13 ha sido purificado, caracterizado in vitro, y se examinaron in situ en la CAM. MMP-13-positivas c&#xE9;lulas aparecen en la CAM poco despu&#xE9;s de la estimulaci&#xF3;n angiog&#xE9;nica y luego se acumulan en el tejido onplant col&#xE1;geno. Morfol&#xF3;gicamente, las c&#xE9;lulas chMMP-13-que contienen aparecen como c&#xE9;lulas hematopoy&#xE9;ticas de monocitos / macr&#xF3;fagos linaje. In vitro, el chMMP-13 proenzima es r&#xE1;pida y eficazmente activado a trav&#xE9;s del activador del plasmin&#xF3;geno de uroquinasa / plasmin&#xF3;geno / plasmina en una cascada de colagenasa capaz de escindir nativo pero no el (r / r) col&#xE1;geno mutante resistente a la colagenasa. Sorprendentemente, los niveles de nanogramos purific&#xF3; chMMP-13 provocan una respuesta angiog&#xE9;nica en los Onplant CAM comparables con la inducida por los factores de crecimiento angiog&#xE9;nicos. La respuesta chMMP-13-mediada fue bloqueada eficientemente por inhibidores de la proteasa selectas que indican que la plasmina activada por chMMP-13 puede funcionar como un factor angiog&#xE9;nico in vivo. En conjunto, los resultados de este estudio ampliar el papel fisiol&#xF3;gico de la MMP-13, previamente asociado con el cart&#xED;lago / reabsorci&#xF3;n &#xF3;sea, a la remodelaci&#xF3;n del col&#xE1;geno participa en la cascada angiog&#xE9;nica.

Colagenolisis dependiente de la angiog&#xE9;nesis mediada por MMP-13 (colagenasa-3)

&#x96C7;&#x7528;&#x80F6;&#x539F; onplants &#x653E;&#x4E0A;&#x9E21;&#x80DA;&#x5C3F;&#x56CA;&#x819C; (CAM) &#x5B9A;&#x91CF;&#x4F53;&#x5185;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x6A21;&#x578B;&#x5DF2;&#x88AB;&#x7528;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x6765;&#x8BC4;&#x4F30;&#x4E4B;&#x95F4;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7B49;&#x708E;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5373;&#x9E21; heterophils &#x548C;&#x65B0;&#x8840;&#x7BA1;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x7A7A;&#x95F4;&#x548C;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x6211;&#x4EEC;&#x6F14;&#x793A;&#x4E86;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;/&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D78;&#x6DA6; onplants &#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x5173;&#x8054;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#x91CD;&#x5851;&#x548C;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x63D0;&#x4F9B;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-13 &#x80F6;&#x539F;&#x9176;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x5F15;&#x5165;&#x4F5C;&#x4E3A; heterophils &#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x9E21;&#x660E;&#x80F6;&#x9176; B &#xFF08;chMMP-9&#xFF09;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x73B0;&#x5728;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x53D1;&#x75C5;&#x548C;&#x591A;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7531;&#x7EAF;&#x51C0;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x6216;&#x76F8;&#x5173;&#x7684; chMMP-9 &#x9633;&#x6027; heterophils &#x521D;&#x59CB;&#x6D8C;&#x5165;&#x7684;&#x4EBA; HT 1080 &#x7EA4;&#x7EF4;&#x8089;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x65E9;&#x671F;&#x7684; heterophil &#x5230;&#x8FBE;&#x662F;&#x8DDF;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;/&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6E17;&#x900F;&#xFF0C;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x7EF4;&#x6301;&#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;2 &#x673A;&#x68B0;&#x5316;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x6297;&#x708E;&#x836F;&#x7269;&#xFF0C;&#x53EF;&#x7684;&#x677E;&#x548C;&#x5E03;&#x6D1B;&#x82AC;&#xFF0C;&#x708E;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5927;&#x91CF;&#x6D8C;&#x5165;&#x7684;&#x4E2D;&#x65AD;&#x663E;&#x8457;&#x6291;&#x5236;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x65B0;&#x8840;&#x8239;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x7684;&#x708E;&#x75C7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x53C2;&#x4E0E;&#x3002;&#x5B64;&#x7ACB;&#x7684; heterophils &#x6216;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684; chMMP 9 &#x76F4;&#x63A5;&#x52A0;&#x5165;&#x540C;&#x79CD;&#x5F02;&#x4F53;&#x76AE;&#x8D28;&#x6216;&#x5E03;&#x6D1B;&#x82AC;&#x6CBB;&#x7597;&#x80DA;&#x80CE;&#x7684; HT 1080 onplants &#x9006;&#x8F6C;&#x6297;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x836F;&#x7269;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x5916;&#x90E8;&#x6DFB;&#x52A0;&#x7684; heterophils &#x4F53;&#x5185;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; heterophils &#x548C;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x6E17;&#x900F;&#x548C;&#x5927;&#x5927;&#x6551;&#x51FA;&#x53D7;&#x635F;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#xFF0C;&#x5F3A;&#x8C03;&#x65E9;&#x671F;&#x708E;&#x75C7;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x80BF;&#x7624;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x4E2D;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x7EB3;&#x5165; onplants &#x7F3A;&#x4E4F;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x6216;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684; heterophils &#x8BF1;&#x5BFC;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x7684; nontreated &#x80DA;&#x80CE;&#xFF0C;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8868;&#x660E;&#x76F4;&#x63A5; proangiogenic &#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6837;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Proangiogenic &#x7684;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6837;&#x708E;&#x6027; heterophils &#x671F;&#x95F4;&#x65B0;&#x751F;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x4E0E;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

A quantitative in vivo angiogenesis model employing collagen onplants placed on the chick embryo chorioallantoic membrane (CAM) has been used in this study to assess the spatial and temporal associations between neutrophil-like inflammatory cells, namely chicken heterophils, and the development of new blood vessels. Previously we have demonstrated that monocytes/macrophages infiltrating the onplants were associated with extracellular matrix remodeling and angiogenesis, in particular by delivering MMP-13 collagenase. By introducing chicken gelatinase B (chMMP-9) as a specific marker for heterophils, we now show that the onset and extent of angiogenesis induced by purified growth factors or by human HT-1080 fibrosarcoma cells correlated with the initial influx of chMMP-9-positive heterophils. This early heterophil arrival was followed by the infiltration of monocytes/macrophages and appeared to sustain further blood vessel formation. The disruption of inflammatory cell influx by 2 mechanistically distinct anti-inflammatory drugs, cortisone and ibuprofen, significantly inhibited angiogenesis, indicating a functional involvement of these inflammatory cells in new blood vessel development. A direct addition of isolated heterophils or purified chMMP-9 into the HT-1080 onplants engrafted into cortisone- or ibuprofen-treated embryos reversed the antiangiogenic effects of the drugs. The exogenously added heterophils induced in vivo a further infiltration of endogenous heterophils and monocytes and dramatically rescued the impaired angiogenesis, highlighting the importance of early inflammatory leukocytes in tumor-induced angiogenesis. Moreover, purified heterophils incorporated into onplants lacking growth factors or tumor cells induced angiogenesis in nontreated embryos, further indicating a direct proangiogenic role for neutrophil-like leukocytes.

Proangiogenic role of neutrophil-like inflammatory heterophils during neovascularization induced by growth factors and human tumor cells.

Un quantitative dans le mod&#xE8;le de l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se in vivo employant onplants collag&#xE8;ne plac&#xE9;s sur la membrane chorio embryon de poulet (CAM) a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;e dans cette &#xE9;tude pour &#xE9;valuer les associations spatiales et temporelles entre les neutrophiles, comme les cellules inflammatoires, h&#xE9;t&#xE9;rophiles de poulet &#xE0; savoir, et le d&#xE9;veloppement de nouveaux vaisseaux sanguins . Pr&#xE9;c&#xE9;demment, nous avons d&#xE9;montr&#xE9; que les monocytes et des macrophages infiltrant les onplants ont &#xE9;t&#xE9; associ&#xE9;es &#xE0; un remodelage de la matrice extracellulaire et de l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se, en particulier en fournissant des MMP-13 de la collag&#xE9;nase. En introduisant de poulet g&#xE9;latinase B (chMMP-9) comme un marqueur sp&#xE9;cifique de h&#xE9;t&#xE9;rophiles, nous allons montrer que l&#x26;#39;apparition et l&#x26;#39;ampleur de l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se induite par les facteurs de croissance purifi&#xE9;s ou par des cellules de fibrosarcome HT-1080 en corr&#xE9;lation avec l&#x26;#39;afflux initial de chMMP-9- h&#xE9;t&#xE9;rophiles positifs. Cette arriv&#xE9;e h&#xE9;t&#xE9;rophiles a imm&#xE9;diatement &#xE9;t&#xE9; suivie par l&#x26;#39;infiltration des monocytes et des macrophages et semblait soutenir encore la formation des vaisseaux sanguins. La perturbation de l&#x26;#39;influx de cellules inflammatoires par 2 m&#xE9;caniquement distinctes m&#xE9;dicaments anti-inflammatoires, cortisone et l&#x26;#39;ibuprof&#xE8;ne, inhib&#xE9; de mani&#xE8;re significative l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se, indiquant une implication fonctionnelle de ces cellules inflammatoires dans le d&#xE9;veloppement de nouveaux vaisseaux sanguins. Un ajout direct de h&#xE9;t&#xE9;rophiles isol&#xE9;es ou purifi&#xE9;es chMMP-9 dans les onplants HT-1080 greff&#xE9;es dans des embryons de la cortisone ou de l&#x26;#39;ibuprof&#xE8;ne trait&#xE9;s renvers&#xE9; les effets anti-angiog&#xE9;niques de la drogue. Les h&#xE9;t&#xE9;rophiles ajout&#xE9; de mani&#xE8;re exog&#xE8;ne induits in vivo une infiltration de h&#xE9;t&#xE9;rophiles endog&#xE8;nes et les monocytes et de fa&#xE7;on spectaculaire sauv&#xE9; l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se avec facult&#xE9;s affaiblies, en soulignant l&#x26;#39;importance des premiers leucocytes inflammatoires dans l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se induite par la tumeur. En outre, purifi&#xE9; h&#xE9;t&#xE9;rophiles incorpor&#xE9;s dans onplants manque de facteurs de croissance ou des cellules tumorales induite angiogen&#xE8;se dans les embryons non trait&#xE9;s, indiquant en outre un r&#xF4;le direct pro-angiog&#xE9;nique pour les neutrophiles, comme les leucocytes.

R&#xF4;le pro-angiog&#xE9;nique des neutrophiles comme H&#xE9;t&#xE9;rophiles inflammatoire au cours n&#xE9;ovascularisation induite par des facteurs de croissance et de l&#x26;#39;homme des cellules tumorales

Ein Modell des quantitativen in-vivo-Angiogenese besch&auml;ftigt Kollagen Onplants platziert auf der K&uuml;ken Embryos chorioallantoic Membrane (CAM) wurde in dieser Studie verwendet um die r&auml;umlichen und zeitlichen Zuordnungen zwischen Neutrophilen-wie Entz&uuml;ndungszellen, n&auml;mlich Huhn Heterophils, und die Entwicklung neuer Blutgef&auml;&szlig;e zu bewerten. Zuvor haben wir bewiesen, dass Monozyten/Makrophagen infiltrieren die Onplants Umgestaltung der extrazellul&auml;ren Matrix und Angiogenese, insbesondere zugeordnet wurden durch die Bereitstellung von MMP-13 Collagenase. Durch die Einf&uuml;hrung von Huhn Gelatinase B (ChMMP-9) als spezifische Marker f&uuml;r Heterophils, zeigen wir nun, dass den Beginn und den Umfang der Angiogenese durch gereinigte Wachstumsfaktoren oder HT-1080 Fibrosarkom Humanzellen korreliert mit dem anf&auml;nglichen Zustrom von ChMMP-9-Positive Heterophils induziert. Diese fr&uuml;hen Heterophil Ankunft war folgte die Infiltration von Monozyten/Makrophagen und schien blutgef&auml;&szlig;anordnung weiter aufrecht zu erhalten. Die Unterbrechung der entz&uuml;ndlichen Zelle Zustrom von 2 mechanistisch verschiedene entz&uuml;ndungshemmende Medikamente, Kortison und Ibuprofen, gehemmt deutlich Angiogenese, angibt, eine funktionelle Einbeziehung dieser entz&uuml;ndlichen Zellen in New Blood-Schiff-Entwicklung. Ein Direktzugabe isolierten Heterophils oder gereinigtes ChMMP-9 in der HT-1080 Onplants Abbau in Cortison oder Ibuprofen-behandelten Embryonen umgekehrt die Antiangiogenetische Effekte der Drogen. Die exogen hinzugef&uuml;gt Heterophils in Vivo induziert eine weitere Infiltration des endogenen Heterophils und Monozyten und drastisch die gest&ouml;rte Angiogenese, die Bedeutung des fr&uuml;hen entz&uuml;ndlichen Leukozyten im Tumor-induzierte Angiogenese gerettet. Dar&uuml;ber hinaus induzierte gereinigten Heterophils in Onplants in Ermangelung Wachstumsfaktoren oder Tumorzellen aufgenommen Angiogenesis in unbehandelten Embryonen, weiter, die eine direkte Proangiogenic-Rolle f&uuml;r die Neutrophilen-wie Leukozyten angibt.

Proangiogenic Rolle der Neutrophilen-wie entz&uuml;ndliche Heterophils w&auml;hrend Neovaskularisation induziert durch Wachstumsfaktoren und menschlichen Tumorzellen.

Un modello di angiogenesi in vivo quantitativa che impiegano collagene onplants collocati sulla membrana chorioallantoic di embrione del pulcino (CAM) &egrave; stato utilizzato in questo studio per valutare le associazioni spaziali e temporali tra neutrofili-come le cellule infiammatorie, vale a dire heterophils di pollo e lo sviluppo di nuovi vasi sanguigni. In precedenza abbiamo dimostrato che monociti/macrofagi infiltranti la onplants erano associati con rimodellamento della matrice extracellulare e l&#39;angiogenesi, in particolare fornendo collagenasi MMP-13. Con l&#39;introduzione di pollo gelatinasi B (chMMP-9) come un marcatore specifico per heterophils, mostriamo ora che l&#39;insorgenza e la misura dell&#39;angiogenesi indotta da fattori di crescita purificati o da cellule umane di fibrosarcoma HT-1080 correlate con l&#39;afflusso iniziale di heterophils di chMMP-9-positivo. Questo precoce arrivo heterophil fu seguito da infiltrazione dei monociti/macrofagi e apparso a sostenere ulteriormente la formazione dei vasi sanguigni. L&#39;interruzione dell&#39;afflusso di cellule infiammatorie da 2 meccanicistico distinti farmaci anti-infiammatori, cortisone e ibuprofene, inibito significativamente l&#39;angiogenesi, che indica un coinvolgimento funzionale di queste cellule infiammatorie nel sangue nuovo sviluppo di nave. Un aggiunta diretta di heterophils isolato o purificata chMMP-9 nell&#39;HT-1080 onplants trapiantati negli embrioni trattati di cortisone o ibuprofene invertito effetti dei farmaci antiangiogenetici. Il heterophils esogenicamente aggiunto indotta in vivo un&#39;ulteriore infiltrazione di heterophils endogeni e monociti e drammaticamente salvato l&#39;alterata angiogenesi, evidenziando l&#39;importanza della precoce infiammatori leucociti nell&#39;angiogenesi tumorale indotta. Inoltre, purificato heterophils incorporate onplants priva di fattori di crescita o cellule tumorali indotta angiogenesi in embrioni, ulteriormente indicando un ruolo diretto proangiogenic per leucociti neutrofili-like.

Proangiogenic ruolo di neutrofili-come heterophils infiammatorie durante la neovascolarizzazione indotta da fattori di crescita e cellule tumorali umane.

&#x30CB;&#x30EF;&#x30C8;&#x30EA;&#x80DA;&#x6F3F;&#x5C3F;&#x819C;&#xFF08;CAM&#xFF09;&#x4E0A;&#x306B;&#x914D;&#x7F6E;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;onplants&#x3092;&#x63A1;&#x7528;&#x3057;&#x305F;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061;&#x9D8F;&#x306E;&#x597D;&#x7570;&#x3001;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6642;&#x9593;&#x7684;&#x95A2;&#x9023;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;MMP-13&#x30B3;&#x30E9;&#x30B2;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3001;&#x7279;&#x306B;onplants&#x306B;&#x6D78;&#x6F64;&#x5358;&#x7403;/&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x30EA;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x597D;&#x7570;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x9D8F;&#x30BC;&#x30E9;&#x30C1;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;B&#xFF08;chMMP-9&#xFF09;&#x3092;&#x5C0E;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x73FE;&#x5728;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306E;&#x767A;&#x75C7;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x306F;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x305F;&#x308A;&#x3001;&#x521D;&#x671F;&#x6D41;&#x5165;chMMP-9&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x30D2;&#x30C8;HT-1080&#x7DDA;&#x7DAD;&#x8089;&#x816B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6B63;&#x597D;&#x7570;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x7570;&#x597D;&#x5230;&#x7740;&#x306F;&#x3001;&#x5358;&#x7403;/&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x6D78;&#x6F64;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x767B;&#x5834;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 2&#x6A5F;&#x69CB;&#x7684;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x6297;&#x708E;&#x75C7;&#x85AC;&#x3001;&#x30B3;&#x30EB;&#x30C1;&#x30BE;&#x30F3;&#x3001;&#x30A4;&#x30D6;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A7;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x708E;&#x75C7;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6D41;&#x5165;&#x306E;&#x4E2D;&#x65AD;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x708E;&#x75C7;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5B64;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x597D;&#x7570;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30B3;&#x30EB;&#x30C1;&#x30BE;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30A4;&#x30D6;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A7;&#x30F3;&#x6295;&#x4E0E;&#x80DA;&#x306B;&#x79FB;&#x690D;&#x3057;&#x305F;HT-1080 onplants&#x306B;chMMP-9&#x306E;&#x7CBE;&#x88FD;&#x76F4;&#x63A5;&#x6DFB;&#x52A0;&#x306F;&#x3001;&#x85AC;&#x5264;&#x306E;&#x6297;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x9006;&#x8EE2;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x5916;&#x56E0;&#x7684;&#x306B;&#x6DFB;&#x52A0;&#x597D;&#x7570;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;&#x597D;&#x7570;&#x7403;&#x3068;&#x5358;&#x7403;&#x306E;&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x6D78;&#x900F;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x3001;&#x5287;&#x7684;&#x306B;&#x816B;&#x760D;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x708E;&#x75C7;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x3057;&#x3001;&#x969C;&#x5BB3;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x3092;&#x6551;&#x52A9;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x672A;&#x51E6;&#x7406;&#x80DA;&#x306B;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x3084;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;onplants&#x306B;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x305F;&#x597D;&#x7570;&#x3092;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D2;&#x30C8;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x4E2D;&#x306E;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x597D;&#x7570;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;

&#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; onplants &#xBCD1;&#xC544;&#xB9AC; &#xD0DC;&#xC544; chorioallantoic &#xB9C9; (CAM)&#xC5D0; &#xCC44;&#xC6A9; &#xC591;&#xC801; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xBAA8;&#xB378; neutrophil &#xAC19;&#xC740; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; &#xC138;&#xD3EC;, &#xC989; &#xCE58;&#xD0A8; heterophils&#xC640; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD608;&#xAD00;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xAC04;&#xC758; &#xACF5;&#xAC04; &#xBC0F; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xBCF8;&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; monocytes/&#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; onplants&#xAC00; &#xCE68;&#xD22C; &#xD588;&#xB2E4; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xAE30;&#xC9C8;&#xC744; &#xAC1C;&#xC7A5; &#xD558; &#xACE0; &#xC2E0;&#xC0DD;, &#xD2B9;&#xD788; MMP 13 &#xCF5C;&#xB77C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xC5EC; &#xC124;&#xBA85; &#xD588;&#xB2E4;. Heterophils&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC815; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB85C; &#xCE58;&#xD0A8; gelatinase B (chMMP-9)&#xC744; &#xB3C4;&#xC785; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC9C0;&#xAE08; &#xBC1C;&#xBCD1;&#xACFC; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC21C;&#xD654; &#xB41C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xB610;&#xB294; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; HT 1080 fibrosarcoma &#xC140; chMMP 9 &#xC591;&#xC131; heterophils&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xC720;&#xC785; &#xC0C1;&#xD638; &#xC5F0;&#xAD00; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xCD08;&#xAE30; heterophil &#xB3C4;&#xCC29; &#xB4A4;&#xC5D0; monocytes/&#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xCE68;&#xD22C; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; &#xD608;&#xAD00; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xB354; &#xC720;&#xC9C0;&#xD560; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC778;&#xB2E4;. 2 Mechanistically &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xD56D; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; &#xC57D;&#xBB3C;, &#xCF54; &#xD2F0; &#xC874;&#xACFC;&#xC774; &#xBD80; &#xD504;&#xB85C;&#xD39C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xC785; &#xC911;&#xB2E8; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD608;&#xC561; &#xC120;&#xBC15; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xAD00;&#xB828; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xC800;&#xD574;. &#xCF54; &#xD2F0; &#xB610;&#xB294; &#xBD80; &#xD504;&#xB85C;&#xD39C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0; engrafted HT 1080 onplants&#xB85C; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; heterophils &#xB610;&#xB294; &#xC21C;&#xD654; chMMP-9&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; &#xCD94;&#xAC00; &#xD56D; &#xD608;&#xAD00; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC57D;&#xBB3C;&#xC758; &#xBC18;&#xC804;. &#xCD94;&#xAC00; &#xB41C; exogenously heterophils &#xC0DD; heterophils &#xCD94;&#xAC00; &#xCE68;&#xD22C; monocytes vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558; &#xACE0; &#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xCD08;&#xAE30; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; &#xBC31;&#xD608;&#xAD6C; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xC885;&#xC591; &#xC720;&#xBC1C;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xAC15;&#xC870; &#xD558;&#xB294; &#xC7A5;&#xC560;&#xAC00; &#xC788;&#xB294; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC744; &#xAD6C;&#xCD9C;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC815;&#xD654; heterophils onplants &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xB610;&#xB294; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD80;&#xC871;&#xC5D0; &#xD1B5;&#xD569; &#xCD94;&#xAC00; neutrophil &#xAC19;&#xC740; &#xBC31;&#xD608;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C1;&#xC811; proangiogenic &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; nontreated &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xC720;&#xB3C4;.

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; neovascularization &#xB3D9;&#xC548; neutrophil &#xAC19;&#xC740; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; heterophils&#xC758; Proangiogenic &#xC5ED;&#xD560;.

Un modelo cuantitativo de la angiog&#xE9;nesis in vivo empleando Onplant col&#xE1;geno colocadas en la membrana corioalantoidea del embri&#xF3;n de pollo (CAM) se ha utilizado en este estudio para evaluar las asociaciones espaciales y temporales entre los neutr&#xF3;filos como las c&#xE9;lulas inflamatorias, es decir, heter&#xF3;filos de pollo, y el desarrollo de nuevos vasos sangu&#xED;neos . Anteriormente hemos demostrado que la infiltraci&#xF3;n de monocitos y macr&#xF3;fagos de los Onplant se asociaron con la remodelaci&#xF3;n de la matriz extracelular y la angiog&#xE9;nesis, en particular mediante la entrega de la colagenasa MMP-13. Mediante la introducci&#xF3;n de pollo gelatinasa B (chMMP-9) como un marcador espec&#xED;fico de heter&#xF3;filos, ahora nos muestran que la aparici&#xF3;n y extensi&#xF3;n de la angiog&#xE9;nesis inducida por factores de crecimiento o purificada por las c&#xE9;lulas de fibrosarcoma HT-1080 se correlacionaron con la afluencia inicial de chMMP-9- heter&#xF3;filos positivos. Esta llegada heter&#xF3;filos temprano fue seguido por la infiltraci&#xF3;n de monocitos y macr&#xF3;fagos y apareci&#xF3; para sostener la formaci&#xF3;n de m&#xE1;s vaso sangu&#xED;neo. La interrupci&#xF3;n de la afluencia de c&#xE9;lulas inflamatorias por 2 mec&#xE1;nicamente distintos f&#xE1;rmacos anti-inflamatorios, cortisona y el ibuprofeno, inhibi&#xF3; significativamente la angiog&#xE9;nesis, lo que indica una implicaci&#xF3;n funcional de estas c&#xE9;lulas inflamatorias en el desarrollo de nuevos vasos sangu&#xED;neos. Una adici&#xF3;n directa de heter&#xF3;filos aislados o purificados chMMP-9 en los Onplant HT-1080 injertadas en los embriones tratados con cortisona o el ibuprofeno, invirti&#xF3; los efectos antiangiog&#xE9;nicos de los medicamentos. Los heter&#xF3;filos ex&#xF3;geno agregado inducidos in vivo una infiltraci&#xF3;n de heter&#xF3;filos y monocitos end&#xF3;genos y rescatado dram&#xE1;ticamente el deterioro de la angiog&#xE9;nesis, destacando la importancia de los primeros leucocitos inflamatorios en la angiog&#xE9;nesis inducida por tumor. Por otra parte, se purifica heter&#xF3;filos incorporados en Onplant que carecen de factores de crecimiento o las c&#xE9;lulas tumorales inducida por la angiog&#xE9;nesis en los embriones no tratados, indicando adem&#xE1;s un papel directo proangiog&#xE9;nico de neutr&#xF3;filos, como los leucocitos.

El papel de los neutr&#xF3;filos proangiog&#xE9;nico-inflamatorias como heter&#xF3;filos Durante neovascularizaci&#xF3;n inducida por factores de crecimiento y las c&#xE9;lulas tumorales humanas

&#x82CF;&#x5C3C;&#x66FF;&#x5C3C;&#x5BF9;&#x80C3;&#x80A0;&#x9053;&#x95F4;&#x8D28;&#x7624;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x662F;&#x6709;&#x522B;&#x4E8E;&#x5176;&#x53CD;&#x8840;&#x7BA1;&#x589E;&#x751F;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

The activity of sunitinib against gastrointestinal stromal tumor seems to be distinct from its antiangiogenic effects.

L&#39;activit&eacute; du sunitinib contre les tumeurs stromales gastro-intestinales semble &ecirc;tre distinct de ses effets anti-angiog&eacute;niques.

Die Aktivit&auml;t von Sunitinib gegen Gastrointestinaler Stromatumor scheint seine antiangiogenetische Wirkung unterscheiden.

L&#39;attivit&agrave; di sunitinib contro tumore stromale gastrointestinale sembra essere distinto dai suoi effetti antiangiogenetici.

&#x6D88;&#x5316;&#x7BA1;&#x9593;&#x8CEA;&#x816B;&#x760D;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x30B9;&#x30CB;&#x30C1;&#x30CB;&#x30D6;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306F;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x963B;&#x5BB3;&#x4F5C;&#x7528;&#x304B;&#x3089;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xC704;&#xC7A5; stromal &#xC885;&#xC591;&#xC5D0; &#xB300;&#xD558;&#xC5EC; sunitinib &#xD65C;&#xB3D9; &#xD56D; &#xD608;&#xAD00; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xD6A8;&#xACFC; &#xB2E4;&#xB97C; &#xAC83; &#xAC19;&#xB2E4;.

La actividad de sunitinib contra tumor estromal gastrointestinal parece ser distinto de sus efectos antiangiog&eacute;nicos.

&#x6210;&#x5E74;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x777E;&#x4E38;&#x662F;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6765;&#x6E90;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x7279;&#x6709;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#x7684;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x963B;&#x788D;&#x4E86;&#x8BC6;&#x522B;&#x548C;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x7684;&#x65E0;&#x6CD5;&#x8BC6;&#x522B;&#x7684;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B50;&#x96C6;&#xFF0C;&#x5F15;&#x8D77;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x540E;&#x4EC5;&#x51E0;&#x4E2A;&#x661F;&#x671F;&#x4F53;&#x5916;&#x80DA;&#x80CE;&#x6837;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x4ECE;&#x6210;&#x4EBA;&#x777E;&#x4E38;&#x6587;&#x5316;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x4F17;&#x6240;&#x5468;&#x77E5;&#x662F;&#x6210;&#x4EBA;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x7CBE;&#x539F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x957F;&#x671F;&#x57F9;&#x517B;&#x4E2D;&#x7684;&#x662F;&#x5426;&#x53EF;&#x4EE5;&#x751F;&#x6210;&#x4EE5;&#x53CA;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7; mitotically &#x706D;&#x6D3B;&#x777E;&#x4E38;&#x9988;&#x7EBF;&#x542B; /cd34 + &#x57FA;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0A;&#x57F9;&#x517B;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x83B7;&#x5F97;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x589E;&#x6B96;&#x6210;&#x4EBA;&#x7CBE;&#x539F;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE; (SPCs)&#x3002;SPCs &#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x777E;&#x4E38; repopulating &#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4FDD;&#x6301;&#x957F;&#x671F;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#x5F15;&#x8D77;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x6210;&#x4EBA;&#x7CBE;&#x539F;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (MASCs) &#x4E2D;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;SPCs &#x548C; MASCs &#x8868;&#x8FBE; GPR125&#xFF0C;&#x5B64;&#x513F;&#x7C98;&#x8FDE;&#x578B; G &#x86CB;&#x767D;&#x5076;&#x8054;&#x53D7;&#x4F53;&#x3002;&#x5728;&#x6572;&#x5165;&#x5C0F;&#x9F20;&#x8F74;&#x627F; GPR125-beta-&#x4E73;&#x7CD6;&#x82F7; (LacZ) &#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x672C;&#x673A; Gpr125 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50; (GPR125 LacZ) &#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5728;&#x777E;&#x4E38;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E13;&#x95E8;&#x5728;&#x7CBE;&#x539F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x548C;&#x4E0D;&#x5728;&#x6709;&#x533A;&#x522B;&#x7684;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x4E3B; GPR125 LacZ SPC &#x884C;&#x4FDD;&#x7559; GPR125 &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x7ECF;&#x5386;&#x4E86;&#x65E0;&#x6027;&#x7CFB;&#x6269;&#x5F20;&#xFF0C;&#x4FDD;&#x6301;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x751F;&#x6B96;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C; busulphan &#x6CBB;&#x7597;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7CBE;&#x5B50;&#x53D1;&#x751F;&#x91CD;&#x7EC4;&#x3002;GPR125 + SPCs &#xFF08;GSPCs&#xFF09; &#x7684;&#x957F;&#x671F;&#x6587;&#x5316;&#x4E5F;&#x8F6C;&#x6362;&#x4E3A; GPR125 + &#x70ED;&#x5FC3;&#x7684;&#x6B96;&#x6C11;&#x5730;&#x3002;GPR125 + MASCs &#x751F;&#x6210;&#x4E09;&#x4E2A;&#x80DA;&#x5C42;&#x7684;&#x884D;&#x751F;&#x54C1;&#x548C; chimaeric &#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#xFF0C;&#x4E0E; GPR125 GPR125 &#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x76F8;&#x5E94;&#x4E0B;&#x8C03;&#x4F5C;&#x51FA;&#x4E86;&#x8D21;&#x732E;&#x3002;MASCs &#x8FD8;&#x5411;&#x6536;&#x7F29;&#x5FC3;&#x810F;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4F53;&#x5916;&#x5206;&#x5316;&#x548C;&#x5F62;&#x6210;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x8840;&#x7BA1;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;&#x5206;&#x5B50;&#x4E66;&#x7B7E;&#x7531; GPR125 &#x6210;&#x4EBA;&#x9F20;&#x6807;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5E76;&#x6700;&#x7EC8;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x777E;&#x4E38;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4E30;&#x5BCC; SPCs &#x4EBA;&#x53E3;&#x4E3A; GPR125 + MASCs&#xFF0C;&#x4E5F;&#x8BB8;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x9057;&#x4F20;&#x64CD;&#x7EB5;&#x3001; &#x7EC4;&#x7EC7;&#x518D;&#x751F;&#x548C;&#x7F3A;&#x8840;&#x6027;&#x5668;&#x5B98;&#x7684;&#x8840;&#x8FD0;&#x91CD;&#x5EFA;&#x7684;&#x63A8;&#x5BFC;&#x3002;

&#x4ECE; GPR125 + &#x751F;&#x6B96;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x6210;&#x4F53;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4E00;&#x4EE3;&#x3002;

Adult mammalian testis is a source of pluripotent stem cells. However, the lack of specific surface markers has hampered identification and tracking of the unrecognized subset of germ cells that gives rise to multipotent cells. Although embryonic-like cells can be derived from adult testis cultures after only several weeks in vitro, it is not known whether adult self-renewing spermatogonia in long-term culture can generate such stem cells as well. Here, we show that highly proliferative adult spermatogonial progenitor cells (SPCs) can be efficiently obtained by cultivation on mitotically inactivated testicular feeders containing CD34+ stromal cells. SPCs exhibit testicular repopulating activity in vivo and maintain the ability in long-term culture to give rise to multipotent adult spermatogonial-derived stem cells (MASCs). Furthermore, both SPCs and MASCs express GPR125, an orphan adhesion-type G-protein-coupled receptor. In knock-in mice bearing a GPR125-beta-galactosidase (LacZ) fusion protein under control of the native Gpr125 promoter (GPR125-LacZ), expression in the testis was detected exclusively in spermatogonia and not in differentiated germ cells. Primary GPR125-LacZ SPC lines retained GPR125 expression, underwent clonal expansion, maintained the phenotype of germline stem cells, and reconstituted spermatogenesis in busulphan-treated mice. Long-term cultures of GPR125+ SPCs (GSPCs) also converted into GPR125+ MASC colonies. GPR125+ MASCs generated derivatives of the three germ layers and contributed to chimaeric embryos, with concomitant downregulation of GPR125 during differentiation into GPR125- cells. MASCs also differentiated into contractile cardiac tissue in vitro and formed functional blood vessels in vivo. Molecular bookmarking by GPR125 in the adult mouse and, ultimately, in the human testis could enrich for a population of SPCs for derivation of GPR125+ MASCs, which may be employed for genetic manipulation, tissue regeneration and revascularization of ischaemic organs.

Generation of functional multipotent adult stem cells from GPR125+ germline progenitors.

Les testicules chez les mammif&egrave;res adultes est une source de cellules souches pluripotentes. Toutefois, l&#39;absence de marqueurs de surface sp&eacute;cifiques a entrav&eacute; identification et le suivi du sous-ensemble non reconnu des cellules germinales qui donne naissance aux cellules multipotentes. Bien que les cellules embryonnaires peuvent &ecirc;tre d&eacute;riv&eacute;s de cultures testicule adulte apr&egrave;s plusieurs semaines seulement in vitro, on ne sait pas si adulte autorenouvelables spermatogonies en culture &agrave; long terme peut g&eacute;n&eacute;rer des cellules souches ainsi. Ici, nous montrons que les prog&eacute;niteurs spermatogonies adulte tr&egrave;s prolif&eacute;ratives (CCP) peuvent &ecirc;tre efficacement obtenues par culture sur des mangeoires testiculaires mitotically inactiv&eacute;s contenant les cellules stromales de CD34 +. CMN pi&egrave;ce testiculaire repopulation activit&eacute; in vivo et maintenir la capacit&eacute; dans les cultures &agrave; long terme pour donner naissance &agrave; adultes spermatogonies d&eacute;riv&eacute;es de cellules souches multipotentes (MASCs). En outre, les CCP et les MASCs expriment GPR125, un orphelin adh&eacute;rence-type r&eacute;cepteurs coupl&eacute;s aux prot&eacute;ines G. Souris knock-in portant une prot&eacute;ine de fusion GPR125-b&ecirc;ta-galactosidase (LacZ) sous contr&ocirc;le du promoteur Gpr125 natif (GPR125-LacZ), expression dans le testicule a &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute;e dans les spermatogonies et pas en diff&eacute;renci&eacute;s de cellules germinales. Primaire GPR125-LacZ SPC lignes conserv&eacute;es GPR125 expression, connaissait une expansion clonale, maintenue le ph&eacute;notype des cellules souches dans les cellules germinales et reconstitu&eacute;e la spermatog&eacute;n&egrave;se chez les souris trait&eacute;es busulphan. Les cultures &agrave; long terme des GPR125 + CCP (GSPCs) a &eacute;galement converti en colonies GPR125 + MASC. GPR125 + MASCs g&eacute;n&eacute;r&eacute; des d&eacute;riv&eacute;s des trois couches germinales et contribu&eacute; &agrave; des embryons chim&eacute;rique, avec la diminution concomitante de GPR125 au cours de la diff&eacute;renciation en lymphocytes GPR125. MASCs aussi diff&eacute;rencient dans les tissus cardiaques contractiles in vitro et forment des vaisseaux sanguins fonctionnelles in vivo. Bookmarking mol&eacute;culaire par GPR125 chez la souris adulte et, finalement, dans le testicule humain pourrait enrichir pour une population de CCP pour la d&eacute;rivation de GPR125 + MASCs, qui peuvent &ecirc;tre utilis&eacute;s pour des manipulations g&eacute;n&eacute;tiques, la r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration tissulaire et revascularisation des organes isch&eacute;mique.

G&eacute;n&eacute;ration des fonctionnels cellules souches adultes multipotentes de germline prog&eacute;niteurs GPR125 +.

Erwachsene S&auml;ugetier-Hoden ist eine Quelle von pluripotenten Stammzellen. Jedoch hat der Mangel an spezifischen Oberfl&auml;che Marker behindert, Identifikation und Verfolgung der unbekannte Teilmenge von Keimzellen, die multipotenten Zellen entstehen. Obwohl embryonalen-&auml;hnlichen Zellen von Erwachsenen Hoden Kulturen nach nur einigen Wochen in-vitro abgeleitet werden k&ouml;nnen, ist nicht bekannt, ob Erwachsener selbstverl&auml;ngerndes Spermatogonien in Langzeitkultur solche Stammzellen als auch erzeugen kann. Hier zeigen wir, dass stark proliferativ-Erwachsene Spermatogonien Vorl&auml;uferzellen (SPCs) effizient durch Anbau auf mitotically inaktivierte testikul&auml;re Feeder mit CD34 + Stromale Zellen abgerufen werden k&ouml;nnen. F&ouml;rderzentren zeigen testikul&auml;re repopulating in-vivo und pflegen die F&auml;higkeit in Langzeitkultur zu multipotenten adulten Spermatogonien gewonnenen Stammzellen (MASCs) f&uuml;hren. Dar&uuml;ber hinaus schnelles F&ouml;rderzentren und MASCs GPR125, ein verwaistes Adh&auml;sion-Typ G-Protein-gekoppelter Rezeptor. Knock-in M&auml;usen ein Fusionsprotein GPR125-Beta-Galaktosidase (LacZ) unter Kontrolle des systemeigenen Gpr125 Projekttr&auml;gers (GPR125-LacZ) Lager Ausdruck in den Hoden wurde ausschlie&szlig;lich in Spermatogonien ermittelt und nicht in differenzierte Keimzellen. Prim&auml;rer GPR125-LacZ SPC Linien beibehalten GPR125 Ausdruck, unterzog klonalen Expansion, beibehalten der Ph&auml;notyp der Keimbahn-Stammzellen und rekonstituierten Spermatogenese Busulphan-behandelten M&auml;usen. Langfristige Kulturen der GPR125 + ESZ (GSPCs) auch in GPR125 + MASC Kolonien umgewandelt. GPR125 + MASCs generiert Derivate aus den drei Schichten der Keim und trug zur chimaeric Embryonen, mit begleitenden Heraufregulation des GPR125 w&auml;hrend der Differenzierung in GPR125-Zellen. MASCs auch unterschieden in KONTRAKTILER Herzgewebe in Vitro und bildete funktionale Blutgef&auml;&szlig;e in-vivo. Molekulare bookmarking von GPR125 in der adulten Maus und letztlich in den menschlichen Hoden k&ouml;nnte f&uuml;r eine Bev&ouml;lkerung von F&ouml;rderzentren f&uuml;r Ableitung der GPR125 + MASCs, bereichern die Genmanipulation, Geweberegeneration und Revascularization isch&auml;mische Organe eingesetzt werden kann.

Generation von funktionalen multipotenten adulten Stammzellen aus GPR125 + Germline Vorl&auml;uferzellen.

Testicoli dei mammiferi adulti sono una fonte di cellule staminali pluripotenti. Tuttavia, la mancanza di specifici marcatori di superficie ha ostacolato identificazione e tracciabilit&agrave; del sottoinsieme non riconosciuto di cellule germinali che d&agrave; origine a cellule multipotenti. Sebbene le cellule embrionali-come possono essere derivate da culture testicolo adulto dopo solo alcune settimane in vitro, non &egrave; noto se adulto direttamente spermatogoni in coltura a lungo termine pu&ograve; generare tali cellule staminali pure. Qui, ci mostra che le cellule progenitrici di spermatogoni adulti altamente proliferativo (SPCs) possono essere ottenute in modo efficiente da coltivazione su alimentatori testicolare mitoticamente inattivati contenente CD34 + cellule stromali. SPCs esibiscono testicolare ripopolante attivit&agrave; in vivo e mantenere la capacit&agrave; in coltura a lungo termine danno origine ad adulti spermatogoni derivate da cellule staminali multipotenti (MASCs). Inoltre, entrambi SPCs e MASCs express GPR125, un orfano adesione-tipo G-protein-coupled receptor. Knock-in topi recanti una proteina di fusione GPR125-beta-galattosidasi (LacZ) sotto il controllo del promotore Gpr125 nativo (GPR125-LacZ), espressione nel testicolo &egrave; stato rilevato esclusivamente in spermatogoni e non in differenziato le cellule germinali. Primaria GPR125-LacZ SPC linee mantenuti GPR125 espressione, sub&igrave; un espansione clonale, mantenuto il fenotipo di cellule staminali germinali e ricostituito spermatogenesi nei topi trattati con busulphan. Colture a lungo termine di GPR125 + SPCs (GSPCs) anche convertito in colonie GPR125 + MASC. GPR125 + MASCs generate derivati dei tre strati germinali e contribuito alla trasduzione embrioni, con concomitante downregulation di GPR125 durante la differenziazione in cellule GPR125. MASCs anche differenziato in tessuto cardiaco contrattile in vitro e formano vasi funzionali in vivo. Bookmarking molecolare da GPR125 nel topo adulto e, in definitiva, nel testicolo umano potrebbe arricchire per una popolazione di SPCs per la derivazione di GPR125 + MASCs, che possono essere impiegati per la manipolazione genetica, rigenerazione dei tessuti e della rivascolarizzazione degli organi ischemici.

Generazione di funzionale cellule staminali adulte multipotenti da GPR125 + linea germinale progenitori.

&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x7CBE;&#x5DE3;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x4E0A;&#x6607;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x3068;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x3092;&#x59A8;&#x3052;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;In vitro &#x3067;&#x306E;&#x308F;&#x305A;&#x304B;&#x6570;&#x9031;&#x9593;&#x5F8C;&#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x4EBA;&#x7CBE;&#x5DE3;&#x57F9;&#x990A;&#x304C;&#x7531;&#x6765;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x840C;&#x82BD;&#x671F;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x3001;&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x7CBE;&#x7956;&#x7D30;&#x80DE;&#x9577;&#x671F;&#x57F9;&#x990A;&#x306E;&#x81EA;&#x529B;&#x66F4;&#x65B0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x3082;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x79C1;&#x9054;&#x306F;&#x683D;&#x57F9;&#x3092;&#x542B;&#x3080; cd34 &#x9593;&#x8CEA;&#x7D30;&#x80DE;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x306E;&#x7CBE;&#x5DE3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C0;&#x30FC;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x6210;&#x4EBA;&#x7CBE;&#x539F;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE; (Spc) &#x3092;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Spc &#x306F; in vivo &#x3067;&#x7CBE;&#x5DE3;&#x306E;&#x518D;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3057;&#x3001;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x6210;&#x4EBA;&#x7CBE;&#x539F;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B; &#xFF08;MASCs&#xFF09; &#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3059;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;Spc &#x3068; MASCs &#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3001;&#x5B64;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x63A5;&#x7740;&#x578B; G &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x5171;&#x5F79;&#x578B;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; GPR125 &#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;GPR125-&beta;-&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC; &#xFF08;LacZ&#xFF09; &#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306E; Gpr125 &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#xFF08;GPR125-LacZ&#xFF09; &#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x4E0B;&#x3067;&#x306E;&#x8EF8;&#x53D7;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A4;&#x30F3; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7CBE;&#x5DE3;&#x306E;&#x5F0F;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x7CBE;&#x7956;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA; GPR125 LacZ SPC &#x884C;&#x4FDD;&#x6301; GPR125 &#x5F0F;&#x3001;&#x751F;&#x6B96;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068; busulphan &#x6295;&#x4E0E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x6027;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x65BD;&#x884C;&#x3057;&#x305F;.GPR125 + Spc (GSPCs) &#x306E;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x6587;&#x5316;&#x3082; GPR125 +&#xFF1A;MASC &#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x306B;&#x5909;&#x63DB;&#x3002;GPR125 + MASCs 3 &#x3064;&#x306E;&#x80DA;&#x5C64;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x4F53;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x3001;GPR125 &#x306E;&#x4F75;&#x7528;&#x306E;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; GPR125 &#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x4E2D;&#x3067;&#x306E;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x80DA;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;MASCs &#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;in vitro &#x3067;&#x306E;&#x53CE;&#x7E2E;&#x5FC3;&#x81D3;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x6A5F;&#x80FD;&#x6027;&#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5206;&#x5B50; GPR125 &#x3067;&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3068;&#x3001;&#x6700;&#x7D42;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x3072;&#x3068;&#x7CBE;&#x5DE3;&#x30D6;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AF;&#x5C0E;&#x51FA; GPR125 + &#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x518D;&#x751F;&#x3068;&#x865A;&#x8840;&#x6027;&#x81D3;&#x5668;&#x306E;&#x8840;&#x884C;&#x518D;&#x5EFA;&#x8853;&#x306B;&#x7528;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B; MASCs &#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E; Spc &#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x3092;&#x8C4A;&#x304B;&#x306B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x6210;&#x4F53;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE; GPR125 + &#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x4E16;&#x4EE3;&#x3002;

&#xC131;&#xC778; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; testis pluripotent &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC6D0;&#xCC9C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xD2B9;&#xC815; &#xD45C;&#xBA74; &#xB9C8;&#xCEE4; &#xBD80;&#xC871; &#xC2E0;&#xBD84;&#xC99D;&#xACFC; multipotent &#xC140;&#xC744; &#xC0DD;&#xACA8;&#xB098;&#xAC8C; &#xC138;&#xADE0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC778;&#xC2DD; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xBD80;&#xBD84; &#xC9D1;&#xD569;&#xC758; &#xCD94;&#xC801; &#xBC29;&#xD574; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBC30;&#xC544; &#xBAA8;&#xC591;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xCCB4; &#xC678; &#xBA87; &#xC8FC; &#xBC16;&#xC5D0; &#xD6C4; &#xC131;&#xC778; &#xACE0;&#xD658; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xBE44;&#xB85D; &#xC7A5;&#xAE30; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; spermatogonia self-renewing &#xC131;&#xC778; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC5EC;&#xBD80; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC9C0;&#xB294; &#xC54A;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC99D;&#xC2DD; &#xC131;&#xC778; spermatogonial &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; (&#xAD6D;&#xACFC;) CD34 + stromal &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; mitotically &#xC0AC; &#xACE0;&#xD658; &#xC9C0;&#xB958;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7AC;&#xBC30; &#xD558; &#xC5EC; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5BB;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAD6D;&#xACFC; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xD658; repopulating &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xC0C1;&#xC2B9; multipotent spermatogonial&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (MASCs)&#xC5D0; &#xAC8C; &#xC7A5;&#xAE30; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0;. &#xB610;&#xD55C;, &#xAD6D;&#xACFC; MASCs gpr125&#xB294; &#xACE0;&#xC544; &#xC811;&#xCC29; &#xD0C0;&#xC785; G-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACB0;&#xD569; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4;. &#xB178;&#xD06C;&#xC5D0; &#xC950; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; Gpr125 &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130; (GPR125-LacZ)&#xC758; &#xD1B5;&#xC81C; &#xD558;&#xC5D0; GPR125-&#xBCA0;&#xD0C0;-galactosidase (LacZ) &#xD4E8;&#xC804; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBCA0;&#xC5B4;&#xB9C1;&#xB294; &#xACE0;&#xD658;&#xC5D0; &#xC2DD; spermatogonia&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3C5;&#xC810;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC80;&#xC0C9; &#xB41C; &#xBC0F; &#xD558;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xBD84;&#xD654;. &#xAE30;&#xBCF8; GPR125 LacZ SPC &#xB77C;&#xC778; &#xC720;&#xC9C0; GPR125 &#xC2DD;, &#xD074;&#xB860; &#xD655;&#xC7A5;&#xC744;, busulphan &#xCC98;&#xB9AC; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7AC;&#xAD6C;&#xC131;&#xB41C; spermatogenesis &#xBC88;&#xC9F8; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xD615; &#xC720;&#xC9C0;&#xB97C; &#xBC1B;&#xC558;&#xB2E4;. GPR125 + &#xAD6D;&#xACFC; (GSPCs)&#xC758; &#xC7A5;&#xAE30; &#xBB38;&#xD654; &#xB610;&#xD55C; GPR125 + MASC &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xB85C; &#xBCC0;&#xD658; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. GPR125 + MASCs 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xC138;&#xADE0; &#xCE35;&#xC758; &#xD30C;&#xC0DD; &#xC0C1;&#xD488;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; GPR125 &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; &#xBD84;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; gpr125&#xC758; &#xBD80;&#xC218;&#xC801;&#xC778; downregulation&#xC640; chimaeric &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD588;&#xB2E4;. MASCs &#xB610;&#xD55C; &#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0; &#xC2EC;&#xC7A5; &#xC218;&#xCD95; &#xC131; &#xC870;&#xC9C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xACE0; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC131; &#xD608;&#xAD00; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xD615;&#xC131;. GPR125 + MASCs, &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC791;, &#xC870;&#xC9C1; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xBC0F; revascularization ischaemic &#xC7A5;&#xAE30;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACE0;&#xC6A9; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC758; &#xC720;&#xB798;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD6D;&#xACFC;&#xC758; &#xC778;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD48D;&#xC694;&#xB86D;&#xAC8C; &#xC218; &#xC131;&#xC778; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xACE0;, &#xAD81;&#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xACE0;&#xD658;&#xC5D0; gpr125&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD84;&#xC790;&#xB97C; &#xC990;&#xACA8;&#xCC3E;&#xAE30;&#xC5D0;.

GPR125 + progenitors &#xBC88;&#xC9F8;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xB2A5; multipotent &#xC131;&#xC778; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC0DD;&#xC131;.

Test&iacute;culo mam&iacute;fero adultos es una fuente de c&eacute;lulas madre pluripotentes. Sin embargo, la falta de marcadores espec&iacute;ficos de la superficie ha obstaculizado la identificaci&oacute;n y seguimiento del desconocida subconjunto de c&eacute;lulas germinales que da lugar a c&eacute;lulas pluripotentes. Aunque las c&eacute;lulas embrionarias pueden derivarse de las culturas test&iacute;culo adulto despu&eacute;s de varias semanas in vitro, no se sabe si el adulto auto-renovaci&oacute;n espermatogonios en cultura a largo plazo puede generar tales c&eacute;lulas as&iacute;. Aqu&iacute;, demostramos que las c&eacute;lulas progenitoras de espermatogonias adultos altamente proliferativas (CCP) pueden obtenerse eficientemente por cultivo en alimentadores testiculares mitotically inactivadas que contienen las c&eacute;lulas estromales de CD34 +. CCP exhibe testicular repoblamiento actividad in vivo y mantener la capacidad en la cultura a largo plazo para dar lugar a multipotentes espermatogonias derivadas de c&eacute;lulas madre adultas (MASCs). Adem&aacute;s, CCP tanto MASCs express GPR125, un tipo de adherencia hu&eacute;rfano receptores g-prote&iacute;na-juntados. En knock-in ratones una prote&iacute;na de fusi&oacute;n GPR125-beta-galactosidasa (LacZ) bajo el control del promotor Gpr125 nativo (GPR125-LacZ), expresi&oacute;n en el test&iacute;culo se detect&oacute; exclusivamente en espermatogonias y no en distingue las c&eacute;lulas germinales. Primaria GPR125-LacZ SPC l&iacute;neas retenidas GPR125 expresi&oacute;n, experiment&oacute; la expansi&oacute;n clonal, mantuvo el fenotipo de las c&eacute;lulas madre de l&iacute;nea germinal y espermatog&eacute;nesis reconstituida en ratones tratados con busulphan. Cultivos a largo plazo de GPR125 + SPC (GSPCs) tambi&eacute;n convierten en colonias GPR125 + MASC. GPR125 + MASCs generado derivados de las tres capas germinales y contribuy&oacute; a embriones chimaeric, con la concomitante downregulation de GPR125 durante la diferenciaci&oacute;n en c&eacute;lulas GPR125. MASCs tambi&eacute;n hab&iacute;a distinguido en tejido contr&aacute;ctil cardiaco in vitro y hab&iacute;a formado de vasos sangu&iacute;neos funcionales in vivo. Marcadores moleculares por GPR125 en el rat&oacute;n adulto y, en definitiva, en el test&iacute;culo humano podr&iacute;an enriquecer para una poblaci&oacute;n de CCP para derivaci&oacute;n de GPR125 + MASCs, que pueden ser empleados para la manipulaci&oacute;n gen&eacute;tica, regeneraci&oacute;n tisular y revascularizaci&oacute;n de &oacute;rganos isqu&eacute;mico.

Generaci&oacute;n de c&eacute;lulas de madre adultas multipotentes funcionales de GPR125 + del germline progenitores.

&#x672A;&#x5206;&#x5316;&#x7CBE;&#x539F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6210;&#x5E74;&#x5C0F;&#x9F20;&#x777E;&#x4E38;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x771F;&#x6B63;&#x7684;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x76EE;&#x524D;&#x8FD8;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x662F;&#x4EC0;&#x4E48;&#x901A;&#x5E38;&#x4ECE;&#x8868;&#x73B0;&#x8111;&#x795E;&#x7ECF;&#x9632;&#x6B62;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6210;&#x4EBA;&#x7684;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5173;&#x952E;&#x8981;&#x7D20;&#x7684;&#x7CBE;&#x539F;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9F9B;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x751A;&#x5C11;&#xFF0C;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x662F;&#x777E;&#x4E38;&#x652F;&#x6301;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6;&#x51E0;&#x79CD;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C7B;&#x578B;&#x7EC4;&#x6210;&#x8FD1;&#x5728;&#x54AB;&#x5C3A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6700;&#x8FD1;&#x53D1;&#x73B0; G &#x86CB;&#x767D;&#x5076;&#x8054;&#x53D7;&#x4F53; (GPR125)&#xFF0C;&#x4EC5;&#x9650;&#x4E8E;&#x5728;&#x777E;&#x4E38;&#x5185;&#x672A;&#x5206;&#x5316;&#x7CBE;&#x539F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x65B0;&#x578B;&#x5B64;&#x513F;&#x3002;&#x5F53;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x662F;&#x4ECE;&#x4F53;&#x5185;&#x9F9B;&#x4E2D;&#x63D0;&#x53D6;&#x548C;&#x627C;&#x8981;&#x7684;&#x751F;&#x6001;&#x4F4D;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x8981;&#x7D20;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x4F20;&#x64AD;&#xFF0C;&#x88AB;&#x4FDD;&#x6301; GPR125 &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6761;&#x4EF6;&#x4FDD;&#x7559;&#x751F;&#x6210;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7684;&#x884D;&#x751F;&#x54C1;&#xFF0C;&#x79F0;&#x4E3A;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x6210;&#x4EBA;&#x7CBE;&#x539F;&#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE; (MASCs) &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x540E;&#x5206;&#x5316;&#xFF0C;&#x540E;&#x8005;&#x4EA7;&#x751F;&#x5305;&#x62EC;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x8BF4;&#x660E;&#x8FD9;&#x79CD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x5E94;&#x7528;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;GPR125 &#x8868;&#x793A;&#x51C0;&#x5316;&#x6210;&#x4EBA;&#x7684;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC4;&#x7EC7;&#xFF0C;&#x76EE;&#x6807;&#x662F;&#x5F00;&#x53D1;&#x81EA;&#x4F53;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x7684;&#x65B0;&#x9776;&#x6807;&#x3002;

&#x7ADE;&#x4E89;&#x8005;&#xFF1A; &#x7531; GPR125 &#x7956;&#x7CBE;&#x539F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6807;&#x8BB0;&#x3002;

The undifferentiated spermatogonia of adult mouse testes are composed of both true stem cells and committed progenitors. It is unclear what normally prevents these adult germ cells from manifesting multipotency. The critical elements of the spermatogonial stem cell niche, while poorly understood, are thought to be composed of Sertoli cells with several other somatic cell types in close proximity. We recently discovered a novel orphan G-protein coupled receptor (GPR125) that is restricted to undifferentiated spermatogonia within the testis. GPR125 expression was maintained when the progenitor cells were extracted from the in vivo niche and propagated under growth conditions that recapitulate key elements of the niche. Such conditions preserved the ability of the cells to generate multipotent derivatives, known as multipotent adult spermatogonial derived progenitor cells (MASCs). Upon differentiation, the latter produced a variety tissues including functional endothelium, illustrating the potential applications of such cells. Thus, GPR125 represents a novel target for purifying adult stem and progenitors from tissues, with the goal of developing autologous multipotent cell lines.

Niche players: spermatogonial progenitors marked by GPR125.

Les spermatogonies indiff&eacute;renci&eacute;s des testicules de souris adultes sont compos&eacute;es de deux cellules souches vrais et commis des prog&eacute;niteurs. On ignore ce qui normalement emp&ecirc;che ces cellules germinales adultes manifestant multipotentialit&eacute;. Les &eacute;l&eacute;ments essentiels de la niche des cellules souches spermatogoniales, tandis que mal comprise, sont cens&eacute;s &ecirc;tre compos&eacute;e de cellules de Sertoli avec plusieurs autres types de cellules somatiques &agrave; proximit&eacute;. Nous avons r&eacute;cemment d&eacute;couvert un orphelin roman coupl&eacute;s aux prot&eacute;ines G r&eacute;cepteur (GPR125) qui se limite &agrave; des spermatogonies indiff&eacute;renci&eacute;es dans le testicule. Expression GPR125 persistait lorsque les cellules prog&eacute;nitrices ont &eacute;t&eacute; extraites de la niche in vivo et propag&eacute;s dans des conditions de croissance qui r&eacute;capitulent les &eacute;l&eacute;ments cl&eacute;s de la niche. Ces conditions conserve la capacit&eacute; des cellules pour produire des d&eacute;riv&eacute;s multipotentes multipotent adult progenitor d&eacute;riv&eacute;e de spermatogonies, cellules (MASCs). Lors de la diff&eacute;renciation, ce dernier produit un tissus de vari&eacute;t&eacute;, y compris l&#39;endoth&eacute;lium fonctionnel, illustrant les applications potentielles de ces cellules. Ainsi, GPR125 repr&eacute;sente une nouvelle cible pour la purification des souches adultes et des prog&eacute;niteurs de tissus, dans le but de d&eacute;velopper des lign&eacute;es de cellules multipotentes autologue.

Joueurs de niche : cellules souches spermatogoniales marqu&eacute;e par GPR125.

Die undifferenzierten Spermatogonien der adulten Maus Hoden bestehen beide wahre Stammzellen und Vorl&auml;uferzellen begangen. Es ist unklar, was normalerweise diese Erwachsenen Keimzellen verhindert Multipotenz manifestieren. Die kritischen Elemente der Spermatogonien Stammzelle Nische, sind zwar oft missverstanden, Gedanken, Sertoli-Zellen mit mehreren anderen somatischen Zellen in der N&auml;he bestehen. K&uuml;rzlich entdeckten wir eine neuartige Waise, G-Protein-Rezeptor (GPR125) gekoppelt, die auf undifferenzierte Spermatogonien innerhalb der Hoden beschr&auml;nkt ist. GPR125 Ausdruck wurde beibehalten, wenn die Vorl&auml;uferzellen wurden aus der in-vivo-Nische extrahiert und propagiert unter Wachstumsbedingungen, die Schl&uuml;sselelemente der Nische zu rekapitulieren. Solche Bedingungen erhalten die F&auml;higkeit der Zellen, multipotenten Derivate, bekannt als multipotenten Erwachsenen Spermatogonien abgeleiteten Vorl&auml;uferzellen (MASCs) zu generieren. Auf Differenzierung produziert letzterer eine Vielzahl Gewebe einschlie&szlig;lich funktionale Endothel, zur Veranschaulichung der m&ouml;glichen Anwendungen solcher Zellen. Daher steht der GPR125 ein Roman vorbei zur Reinigung von Erwachsenen Stamm- und Vorl&auml;uferzellen von Geweben, mit dem Ziel der Entwicklung von autologen multipotenten Zelllinien.

Nischen-Spieler: Spermatogonien Vorfahre von GPR125 gepr&auml;gt.

L&#39;indifferenziato spermatogoni di testicoli di topo adulto sono composte da entrambe le cellule staminali vera e commesso progenitori. Non &egrave; chiaro ci&ograve; che normalmente impedisce queste cellule germinali adulte manifestando multipotency. Gli elementi critici della nicchia spermatogoni sulle cellule staminali, mentre capita male, si pensiero sia costituito da cellule di Sertoli con diversi altri tipi di cellule somatiche in prossimit&agrave;. Abbiamo recentemente scoperto un romanzo orfano che g-protein coupled receptor (GPR125) che &egrave; limitato a spermatogoni indifferenziati all&#39;interno del testicolo. GPR125 espressione fu mantenuta quando le cellule progenitrici sono stati estratti dalla nicchia in vivo e propagate in condizioni di crescita che riassumere gli elementi chiave della nicchia. Tali condizioni conservata la capacit&agrave; delle cellule di generare derivati multipotenti, conosciute come cellule progenitrici derivate spermatogoni adulti multipotenti (MASCs). Sulla differenziazione, quest&#39;ultimo prodotto un tessuti di variet&agrave; tra cui funzionale dell&#39;endotelio, illustrando le potenziali applicazioni di tali cellule. Cos&igrave;, GPR125 rappresenta una destinazione romanzo per la purificazione di staminali adulte e progenitori dai tessuti, con l&#39;obiettivo di sviluppare linee di cellule multipotenti autologhe.

I giocatori di nicchia: spermatogoni progenitori contrassegnato da GPR125.

&#x672A;&#x5206;&#x5316;&#x306A;&#x7CBE;&#x539F;&#x6210;&#x4F53;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7CBE;&#x5DE3;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x771F;&#x306E;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x30B3;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4F55;&#x304C;&#x901A;&#x5E38;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7387;&#x3092;&#x3051;&#x3093;&#x3057;&#x3087;&#x3046;&#x304B;&#x3089;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x304F;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x306F;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x7CBE;&#x539F;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C1;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8981;&#x7D20;&#x306F;&#x3001;&#x4E0D;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x7406;&#x89E3;&#x304C;&#x3001;&#x8FD1;&#x304F;&#x306B;&#x306F;&#x4ED6;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306E;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x30BB;&#x30EB;&#x30C8;&#x30EA;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x6700;&#x8FD1; G &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x7D50;&#x5408;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; (GPR125) &#x306E;&#x672A;&#x5206;&#x5316;&#x306A;&#x7CBE;&#x539F;&#x7CBE;&#x5DE3;&#x5185;&#x306B;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x65B0;&#x898F;&#x306E;&#x5B64;&#x5150;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE; in vivo &#x3067;&#x306E;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C1;&#x304B;&#x3089;&#x62BD;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C1;&#x5E02;&#x5834;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8981;&#x7D20;&#x3092;&#x8981;&#x7D04;&#x3059;&#x308B;&#x6210;&#x9577;&#x6761;&#x4EF6;&#x306E;&#x4E0B;&#x3067;&#x4F1D;&#x9054;&#x3059;&#x308B;&#x3068; GPR125 &#x5F0F;&#x304C;&#x7DAD;&#x6301;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x72B6;&#x6CC1;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x6210;&#x4EBA;&#x7CBE;&#x539F;&#x6D3E;&#x751F;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE; &#xFF08;MASCs&#xFF09; &#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3001;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x8A98;&#x5C0E;&#x4F53;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x305F;&#x308A;&#x3001;&#x4FDD;&#x6301;&#x3002;&#x5206;&#x5316;&#x306B;&#x3001;&#x5F8C;&#x8005;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5FDC;&#x7528;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x6A5F;&#x80FD;&#x6027;&#x5185;&#x76AE;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x7D44;&#x7E54;&#x751F;&#x7523;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;GPR125 &#x306F;&#x6210;&#x4F53;&#x5E79;&#x30FB;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x7D44;&#x7E54;&#x81EA;&#x5DF1;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x76EE;&#x6A19;&#x304B;&#x3089;&#x6D44;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30CB;&#x30C3;&#x30C1; &#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E4;&#x30FC;: &#x7CBE;&#x539F;&#x7D30;&#x80DE;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AF; GPR125 &#x3067;&#x3002;

&#xC131;&#xC778; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; testes&#xC758; undifferentiated spermatogonia &#xB450; &#xC0AC;&#xC2E4; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC73C;&#xBA70; progenitors &#xCD5C;&#xC120;&#xC744; &#xB2E4;&#xD558;&#xACE0;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xBD84;&#xBA85; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xC5B4; &#xB0B8; multipotency&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC131;&#xC778; &#xC138;&#xADE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC29;&#xC9C0;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Spermatogonial &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xD2C8;&#xC0C8;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC694;&#xC18C; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xAC00;&#xAE4C;&#xC774;&#xC5D0; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB2E4;&#xB978; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC; &#xC885;&#xB958;&#xC640; Sertoli &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB418;&#xC5B4; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0DD;&#xAC01; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xCD5C;&#xADFC; G-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACB0;&#xD569; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (GPR125)&#xB294; &#xACE0;&#xD658; &#xB0B4;&#xC758; undifferentiated spermatogonia&#xB97C; &#xC81C;&#xD55C; &#xC18C;&#xC124; &#xACE0;&#xC544; &#xBC1C;&#xACAC;. GPR125 &#xC2DD; &#xB54C; &#xC870;&#xC0C1; &#xC140;&#xC744; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2C8;&#xC0C8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD94;&#xCD9C;&#xD55C; &#xD2C8;&#xC0C8;&#xC758; &#xD575;&#xC2EC; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC815;&#xB9AC; &#xD558;&#xB294; &#xC131;&#xC7A5; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xD30C;&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC870;&#xAC74; multipotent &#xC131;&#xC778; spermatogonial &#xD30C;&#xC0DD;&#xB41C; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; (MASCs)&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; multipotent &#xD30C;&#xC0DD; &#xC0C1;&#xD488;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC720;&#xC9C0;. &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;, &#xB530;&#xB77C; &#xD6C4;&#xC790; &#xAC19;&#xC740; &#xC140;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC131; &#xB0B4; &#xD53C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC9C1;&#xBB3C; &#xC0DD;&#xC0B0;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, GPR125 &#xC131;&#xC778; &#xC904;&#xAE30;&#xC640; &#xD5CC; multipotent &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xBAA9;&#xD45C;&#xC640; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; progenitors &#xC815;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC18C;&#xC124; &#xB300;&#xC0C1;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD2C8;&#xC0C8; &#xD50C;&#xB808;&#xC774;&#xC5B4;: spermatogonial progenitors gpr125&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD45C;&#xC2DC;.

Las espermatogonias indiferenciadas de test&iacute;culos de rat&oacute;n adulto est&aacute;n constituidos por dos c&eacute;lulas madre verdaderas y cometieron de progenitores. No est&aacute; claro lo que normalmente impide estas c&eacute;lulas de germen que manifiesta multipotencia. Los elementos cr&iacute;ticos del nicho espermatogonias c&eacute;lulas, mientras que mal entendida, se cree que se compone de c&eacute;lulas de Sertoli con varios otros tipos de c&eacute;lulas som&aacute;ticas en proximidad cercana. Recientemente hemos descubierto a un novela hu&eacute;rfano que prote&iacute;na G hab&iacute;a acoplada del receptor (GPR125) que se limita a espermatogonias indiferenciadas dentro del test&iacute;culo. GPR125 expresi&oacute;n mantuvo cuando las c&eacute;lulas progenitoras fueron extra&iacute;das del nicho en vivo y se propaga bajo condiciones de crecimiento que recapitulan los elementos clave del nicho. Tales condiciones conservan la capacidad de las c&eacute;lulas para generar derivados multipotentes, conocidos como c&eacute;lulas progenitoras derivadas espermatogonias adultas multipotentes (MASCs). Al diferenciaci&oacute;n, este &uacute;ltimo produce un tejidos de variedad incluyendo endotelio funcional, que ilustran las aplicaciones potenciales de tales c&eacute;lulas. As&iacute;, GPR125 representa una nueva diana para purificar el tallo adulto y progenitores de tejidos, con el objetivo de desarrollar l&iacute;neas de c&eacute;lulas multipotentes aut&oacute;logo.

Los jugadores de nicho: espermatogonias progenitores marcaron por GPR125.

&#x5C11;&#x6570;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5; &#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x7531;&#x6765;&#x7D30;&#x80DE; (&#x9ED2;&#x8C37;) &#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x3092;&#x518D;&#x751F;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x816B;&#x760D;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C; 2 &#x3064;&#x306E;&#x8AD6;&#x6587;&#x306E;&#x554F;&#x984C;&#x3067; MMP 9 &#x9ED2;&#x8C37;&#x3067;&#x914D;&#x4FE1;&#x304C;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x4E21;&#x65B9;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x308B;&#x6539;&#x9020;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x65B0;&#x751F;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9ED2;&#x8C37;&#x3067; MMP 9 &#x8868;&#x73FE;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x89E3;&#x5256;&#x5B66;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x8457;&#x3057;&#x304F;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5B89;&#x30D6;&#x30E9;&#x30A6;&#x30F3;&#x3067;&#x63A1;&#x7528; preirradiated &#x816B;&#x760D;&#x8840;&#x7BA1;&#x5E8A;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x5229;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x5B9F;&#x969B;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x74B0;&#x5883;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x3055;&#x3068;&#x816B;&#x760D;&#x4FC3;&#x9032;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5225;&#x306E;&#x814E;&#x4E0D;&#x5168;&#x96C6;&#x56E3;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x3055;&#x3092;&#x30DF;&#x30E9;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0; &#x30FB; &#x30C7;&#x30E5; &#x30FB;&#x3089;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x4FB5;&#x8972;&#x7684;&#x306A;&#x795E;&#x7D4C;&#x81A0;&#x82BD;&#x816B;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5; &#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x7531;&#x6765;&#x7D30;&#x80DE;&#x816B;&#x760D;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x89E6;&#x5A92;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3002;

Proangiogenic &#x9AA8;&#x9AD3;&#x6765;&#x6E90;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;) &#x6570;&#x91CF;&#x5F88;&#x5C11;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5728;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x5173;&#x952E;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E00;&#x95EE;&#x9898;&#x7684;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4E24;&#x4EFD;&#x6587;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x5229;&#x7528;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7531;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9 &#x7684;&#x67E5;&#x627E;&#x8C03;&#x8282; neovessel &#x91CD;&#x5851;&#x3001; &#x4ECE;&#x800C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x80BF;&#x7624;&#x751F;&#x957F;&#x3002;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; 9 &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5FAE;&#x8840;&#x7BA1;&#x89E3;&#x5256;&#x7684;&#x6539;&#x53D8;&#x662F;&#x5B89;&#x548C;&#x5E03;&#x6717;&#x6240;&#x91C7;&#x7528;&#x7684;&#x9884;&#x8F90;&#x5C04;&#x63A5;&#x679D;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x8840;&#x7BA1;&#x5E8A;&#x6A21;&#x578B;&#x548C;&#x4FB5;&#x88AD;&#x6027;&#x80F6;&#x8D28;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7624;&#x6A21;&#x578B;&#x5229;&#x7528; Du et al &#x771F;&#x6B63;&#x80BF;&#x7624;&#x5FAE;&#x73AF;&#x5883;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x6027;&#x548C;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x73B0;&#x4EE3;&#x821E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x80BF;&#x7624;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x89D2;&#x8272;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x6027;&#x5F88;&#x53EF;&#x80FD;&#x955C;&#x50CF;&#x4E4B;&#x95F4;&#x660E;&#x663E;&#x4E0D;&#x540C;&#x3002;

Proangiogenic &#x9AA8;&#x9AD3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x80BF;&#x7624;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x4E2D;&#x7684;&#x50AC;&#x5316;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Small numbers of proangiogenic bone marrow-derived cells (BMDCs) can play pivotal roles in tumor progression. In this issue of Cancer Cell, two papers, utilizing different tumor angiogenesis models, both find that activated MMP-9 delivered by BMDCs modulates neovessel remodeling, thereby promoting tumor growth. The changes in microvascular anatomy induced by MMP-9-expressing BMDCs are strikingly different between the preirradiated tumor vascular bed model employed by Ahn and Brown and the invasive glioblastoma model utilized by Du et al., likely mirroring the complexity of the real tumor microenvironment and the intricacy of roles of different BMDC populations in mediating tumor neoangiogenesis.

A catalytic role for proangiogenic marrow-derived cells in tumor neovascularization.

Un petit nombre de cellules de moelle osseuse on (BMDCs) peut jouer un r&ocirc;le essentiel dans la progression tumorale. Dans ce num&eacute;ro de cellule canc&eacute;reuse, deux documents, l&#39;utilisation de mod&egrave;les de l&#39;angiogen&egrave;se tumorale diff&eacute;rente, les deux trouver qui a activ&eacute; la MMP-9 envoy&eacute;es par BMDCs module n&eacute;ovaisseaux remodelage, favorisant ainsi la croissance tumorale. Les changements dans l&#39;anatomie microvasculaire induite par le BMDCs exprimant le MMP-9 sont remarquablement diff&eacute;rents entre le mod&egrave;le de lit vasculaire tumorale preirradiated employ&eacute; par Ahn et Brown et le mod&egrave;le de glioblastome envahissantes utilis&eacute;es par Du et al., probablement mise en miroir de la complexit&eacute; du microenvironnement tumeur r&eacute;elle et la complexit&eacute; des r&ocirc;les des diff&eacute;rentes populations BMDC dans la m&eacute;diation la n&eacute;oangiogen&egrave;se tumorale.

Un r&ocirc;le de catalyseur pour les cellules de moelle osseuse on de la n&eacute;ovascularisation tumorale.

Eine kleine Gruppe Proangiogenic Knochenmark gewonnenen Zellen (BMDCs) k&ouml;nnen im Tumor Fortschreiten entscheidende Rollen spielen. In dieser Ausgabe der Krebszelle, zwei Papiere, unter Verwendung verschiedener Tumor Angiogenesis Modelle moduliert beide suchen, die MMP-9 geliefert von BMDCs aktiviert Neovessel Umbau, so f&ouml;rdern Tumorwachstum. Die &Auml;nderungen in mikrovaskul&auml;re Anatomie von MMP-9-Ausdruck BMDCs induziert unterscheiden sich auffallend zwischen die preirradiated Tumor vaskul&auml;re Bett von Ahn und Brown besch&auml;ftigt und dem invasiven Glioblastom Modell von Du Et Al., wahrscheinlich spiegeln die Komplexit&auml;t der realen Tumor-Untersuchungsverfahren und die Kompliziertheit der Rollen der verschiedenen Populationen der BMDC bei der Vermittlung von Tumor-Neoangiogenesis genutzt.

Als Katalysator f&uuml;r Proangiogenic Knochenmark gewonnenen Zellen im Tumor Neovaskularisation.

Un piccolo numero di cellule derivate dal midollo osseo di proangiogenic (BMDCs) pu&ograve; svolgono un ruolo cruciale nella progressione del tumore. In questo numero di Cancer Cell, due carte, utilizzando modelli di angiogenesi tumorale differenti, entrambi trovare che attiva MMP-9 consegnati da BMDCs modula neovessel rimodellamento, promuovendo cos&igrave; la crescita del tumore. I cambiamenti nell&#39;anatomia microvascolare indotte da BMDCs che esprimono MMP-9 sono straordinariamente diversi tra il modello di letto vascolare preirradiated tumore impiegato da Ahn e Brown e il modello di glioblastoma invasiva utilizzata da Du et al., probabilmente il mirroring della complessit&agrave; del microambiente del tumore vero e proprio e la complessit&agrave; dei ruoli delle diverse popolazioni BMDC nella mediazione tumore neoangiogenesis.

Un ruolo catalitico per proangiogenic derivate da midollo osseo cellule nel tumore neovascolarizzazione.

Proangiogenic &#xACE8; &#xC218; &#xC720;&#xB798; &#xC138;&#xD3EC; (BMDCs)&#xC758; &#xC791;&#xC740; &#xC22B;&#xC790;&#xB294; &#xC885;&#xC591; &#xC9C4;&#xD589;&#xC5D0; &#xC911;&#xCD94;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xC885;&#xC774; &#xB2E4;&#xB978; &#xC885;&#xC591; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xD608;&#xAD00; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758;&#xC774; &#xBB38;&#xC81C;&#xC5D0; MMP 9 Bmdcs&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC804;&#xB2EC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBAA8;&#xB450; &#xCC3E;&#xAE30; neovessel &#xB9AC; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1; &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368; &#xC885;&#xC591;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xCD94;&#xC9C4; &#xD558; &#xACE0;, &#xBCC0;&#xC870;. Microvascular &#xD574;&#xBD80;&#xD559; MMP 9 &#xD45C;&#xD604; Bmdcs&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xBCC0;&#xD654; preirradiated &#xC885;&#xC591; &#xD608;&#xAD00; &#xCE68;&#xB300; &#xBAA8;&#xB378; &#xC548;&#xC640; &#xBE0C;&#xB77C;&#xC6B4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACE0;&#xC6A9; &#xBC0F; &#xD65C;&#xC6A9; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xC2E4;&#xC81C; &#xC885;&#xC591; microenvironment&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1;&#xC131;&#xACFC; &#xB2E4;&#xB978; BMDC &#xC778;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC885;&#xC591; neoangiogenesis &#xC911;&#xC7AC;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC758; intricacy &#xBBF8;&#xB7EC;&#xB9C1; &#xB4A4; &#xC678;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCE68;&#xB7B5; glioblastoma &#xBAA8;&#xB378; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xB2E4;&#xB974;&#xB2E4;.

Proangiogenic &#xACE8; &#xC218; &#xC720;&#xB798; &#xC138;&#xD3EC; &#xC885;&#xC591; neovascularization&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCD09;&#xB9E4; &#xC5ED;&#xD560;.

Una peque&ntilde;a cantidad de c&eacute;lulas de m&eacute;dula &oacute;sea proangiog&eacute;nico (BMDCs) puede desempe&ntilde;ar papeles clave en la progresi&oacute;n tumoral. En esta edici&oacute;n de la c&eacute;lula cancerosa, dos documentos, utilizando modelos de la angiog&eacute;nesis de tumores diferentes, ambos encontrar que activa la MMP-9 por BMDCs modula neovessel remodelado, promoviendo as&iacute; el crecimiento del tumor. Los cambios en la anatom&iacute;a microvascular inducida por la expresi&oacute;n de MMP-9 BMDCs difieren notablemente entre el modelo de lecho vascular del tumor preirradiated utilizado por Ahn y Brown y el modelo de glioblastoma invasivo utilizado por Du et al, probablemente reflejando la complejidad del microambiente tumoral real y la complejidad de los roles de diferentes poblaciones de BMDC en la mediaci&oacute;n de neoangiog&eacute;nesis tumoral.

Una funci&oacute;n catalizadora para proangiog&eacute;nico las c&eacute;lulas de m&eacute;dula en neovascularizaci&oacute;n tumoral.

&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9A7B;&#x7559;&#x5728;&#x4E13;&#x95E8;&#x521B;&#x5EFA;&#x7684;&#x652F;&#x6301;&#x534F;&#x8C03;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x548C;&#x6CBF;&#x88AD;&#x7279;&#x5B9A;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x57FA;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5FAE;&#x89C2;&#x73AF;&#x5883;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x77E5;&#x9053;&#x786E;&#x5207;&#x8EAB;&#x4EFD;&#x7684;&#x652F;&#x6301;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;&#x4F8B;&#x5982;&#xFF0C;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5982;&#x6210;&#x4EBA;&#x7CBE;&#x539F;&#x5E72;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE; (SPCs) &#x4F53;&#x5916;&#x957F;&#x671F;&#x57F9;&#x517B;&#x53D7;&#x963B;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x548C;&#x7EF4;&#x6301;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x7684;&#x6700;&#x4F73;&#x57FA;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x3002;&#x4E8B;&#x5B9E;&#x4E0A;&#xFF0C;&#x73B0;&#x884C;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x5229;&#x7528;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE; (MEFs)&#xFF0C;&#x5C1A;&#x672A;&#x6709;&#x6548;&#xFF0C;&#x901A;&#x5E38;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E0D;&#x4E00;&#x81F4;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x79F0;&#x4E3A; JK1&#xFF0C;&#x6765;&#x81EA;&#x5C0F;&#x9F20;&#x777E;&#x4E38;&#x95F4;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x4EC5;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x4E86;&#x957F;&#x671F; SPC &#x6587;&#x5316;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x5141;&#x8BB8;&#x5FE0;&#x5B9E;&#x4EE3; SPCs &#x548C;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x65B0;&#x578B; CD34 &#x9633;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x7684;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x3002;SPCs JK1 &#x4E0A;&#x751F;&#x6210;&#x4FDD;&#x6301;&#x80DA;&#x82BD;&#x884C;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; PLZF&#x3001; DAZL &#x548C; GCNA &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x9988;&#x7EBF;&#x4E5F;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x4E86;&#x5176;&#x4ED6;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x539F;&#x59CB;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x6210;&#x4EBA;&#x7CBE;&#x539F;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x6765;&#x81EA;&#x539F;&#x59CB;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x957F;&#x671F;&#x57F9;&#x517B;&#x3002;&#x53EF;&#x4E32;&#x884C;&#x548C;&#x4ECD;&#x4FDD;&#x6301;&#x7279;&#x6027;&#x7684;&#x6807;&#x8BB0;&#xFF0C;&#x5982; OCT4 &#x548C; NANOG &#x4F53;&#x5916;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x751F;&#x6210;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x4E09;&#x4E2A;&#x80DA;&#x5C42;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x8868;&#x8FBE; passaged &#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; JK1 &#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x662F;&#x80FD;&#x591F;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x539F;&#x59CB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x957F;&#x671F;&#x57F9;&#x517B;&#x3002;&#x8FD9;&#x6837;&#xFF0C;&#x6B64;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x5141;&#x8BB8;&#x652F;&#x6301;&#x957F;&#x671F;&#x6269;&#x6563;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x95F4;&#x8D28;&#x6D3E;&#x751F;&#x56E0;&#x7D20;&#x7684;&#x8BC6;&#x522B;&#x548C;&#x6784;&#x6210;&#x65B9;&#x4FBF;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#xFF0C;&#x5176;&#x4ED6;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x8FDB;&#x7EB8;&#x5668;&#x56FE;&#x5C42;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x7BC7;&#x6587;&#x7AE0;&#x7684;&#x672B;&#x5C3E;&#x627E;&#x5230;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x5229;&#x76CA;&#x51B2;&#x7A81;&#x7684;&#x62AB;&#x9732;&#x3002;

/Cd34 + &#x777E;&#x4E38;&#x95F4;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x652F;&#x6301;&#x957F;&#x671F;&#x6269;&#x5F20;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x548C;&#x6210;&#x4EBA;&#x5E72;&#x548C;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

Stem cells reside in specialized microenvironments created by supporting stromal cells that orchestrate self-renewal and lineage-specific differentiation. However, the precise identity of the cellular and molecular pathways that support self-renewal of stem cells is not known. For example, long-term culture of prototypical stem cells, such as adult spermatogonial stem and progenitor cells (SPCs), in vitro has been impeded by the lack of an optimal stromal cell line that initiates and sustains proliferation of these cells. Indeed, current methods, including the use of mouse embryonic fibroblasts (MEFs), have not been efficient and have generally led to inconsistent results. Here, we report the establishment of a novel CD34-positive cell line, referred to as JK1, derived from mouse testicular stromal cells that not only facilitated long-term SPC culture but also allowed faithful generation of SPCs and multipotent stem cells. SPCs generated on JK1 maintained key features of germ line stem cells, including expression of PLZF, DAZL, and GCNA. Furthermore, these feeders also promoted the long-term cultivation of other types of primitive cells including multipotent adult spermatogonial-derived stem cells, pluripotent murine embryonic stem cells, and embryonic germ cells derived from primordial germ cells. Stem cells could be passaged serially and still maintained expression of characteristic markers such as OCT4 and NANOG in vitro, as well as the ability to generate all three germ layers in vivo. These results indicate that the JK1 cell line is capable of promoting long-term culture of primitive cells. As such, this cell line allows for identification of stromal-derived factors that support long-term proliferation of various types of stem cells and constitutes a convenient alternative to other types of feeder layers. Disclosure of potential conflicts of interest is found at the end of this article.

CD34+ testicular stromal cells support long-term expansion of embryonic and adult stem and progenitor cells.

Cellules souches se trouvent dans des micro-environnements sp&eacute;cialis&eacute;s cr&eacute;&eacute;s par des cellules stromales qui orchestrent la diff&eacute;renciation autorenouvellement et lign&eacute;e sp&eacute;cifique de soutien. Cependant, on conna&icirc;t pas l&#39;identit&eacute; exacte des voies mol&eacute;culaires et cellulaires qui supportent l&#39;autorenouvellement des cellules souches. Par exemple, les cultures &agrave; long terme de prototypiques des cellules souches, comme les adultes spermatogonies cellules souches et prog&eacute;nitrices (CCP), in vitro a &eacute;t&eacute; entrav&eacute;e par l&#39;absence d&#39;une ligne de cellules stromales optimale qui initie et soutient la prolif&eacute;ration de ces cellules. En effet, les m&eacute;thodes actuelles, y compris l&#39;utilisation des fibroblastes embryonnaires de souris (MEFs), n&#39;ont pas &eacute;t&eacute; efficaces et ont g&eacute;n&eacute;ralement abouti &agrave; des r&eacute;sultats incoh&eacute;rents. Nous rapportons ici, la cr&eacute;ation d&#39;une lign&eacute;e de cellules CD34 positifs nouvelle, d&eacute;nomm&eacute;e JK1, provenant de souris des cellules stromales testiculaire qui non seulement facilit&eacute; de culture SPC &agrave; long terme, mais a &eacute;galement permis une g&eacute;n&eacute;ration fid&egrave;le du CCP et de cellules souches multipotentes. CCP September JK1 maintient des caract&eacute;ristiques principales des cellules souches germinales, dont l&#39;expression de PLZF, DAZL et GCNA. En outre, ces mangeoires a aussi favoris&eacute; la culture &agrave; long terme d&#39;autres types de cellules primitives, y compris les adultes spermatogonies d&eacute;riv&eacute;es de cellules souches multipotentes, les cellules souches embryonnaires pluripotentes murins et des cellules germinales embryonnaires d&eacute;riv&eacute;es de cellules germinales primordiales. Les cellules souches pourraient &ecirc;tre repiqu&eacute;es en s&eacute;rie et toujours maintenu l&#39;expression des marqueurs caract&eacute;ristiques tels que OCT4 et NANOG in vitro, ainsi que la capacit&eacute; de g&eacute;n&eacute;rer tous les trois couches de germe in vivo. Ces r&eacute;sultats indiquent que la lign&eacute;e cellulaire JK1 est capable de promouvoir la culture &agrave; long terme des cellules primitives. Par cons&eacute;quent, cette lign&eacute;e cellulaire permet l&#39;identification des facteurs stromales d&eacute;riv&eacute;es qui prennent en charge la prolif&eacute;ration de divers types de cellules souches &agrave; long terme et constitue une alternative pratique &agrave; d&#39;autres types de couches d&#39;engraissement. Divulgation des conflits d&#39;int&eacute;r&ecirc;ts potentiels se trouve &agrave; la fin de cet article.

Cellules stromales testiculaires CD34 + soutiennent l&#39;expansion &agrave; long terme des cellules souches et prog&eacute;nitrices, embryonnaires et adultes.

Stammzellen befinden sich in spezialisierte Mikroumgebungen erstellt durch die Unterst&uuml;tzung von stromal Zellen, die Selbsterneuerung und Herkunfts-spezifische Differenzierung zu orchestrieren. Die genaue Identit&auml;t der zellul&auml;ren und molekularen Bahnen, die Selbsterneuerung von Stammzellen zu unterst&uuml;tzen ist jedoch nicht bekannt. Beispielsweise hat die Langzeitkultur prototypische Stammzellen, wie Erwachsene Stamm- und Vorl&auml;uferzellen Spermatogonien (SPCs), in-vitro-durch das Fehlen einer optimalen stromal Zelle-Linie behindert wurde, die initiiert und Vermehrung dieser Zellen tr&auml;gt. In der Tat aktuelle Methoden, einschlie&szlig;lich der Verwendung von M&auml;useembryonalen (MEFs), wurden nicht effizient und im Allgemeinen zu inkonsistenten Ergebnissen gef&uuml;hrt haben. Hier berichten wir &uuml;ber die Schaffung einer neuartigen CD34-positiven-Zelllinie, genannt JK1, abgeleitet von Maus testikul&auml;re stromal Zellen, die nicht nur SPC Langzeitkultur erleichtert aber auch treu Generation von F&ouml;rderzentren und multipotenten Stammzellen erlaubt. Erstellt am JK1 F&ouml;rderzentren gepflegt Key Features von Keim Linie Stammzellen, einschlie&szlig;lich Ausdruck PLZF DAZL und GCNA. Dar&uuml;ber hinaus f&ouml;rderte diese Feeder auch den langfristigen Anbau von anderen Arten von primitiven Zellen multipotenten adulten Spermatogonien gewonnenen Stammzellen Pluripotent murinen embryonalen Stammzellen und embryonalen Keimzellen von primordialen Keimzellen abgeleitet. Stammzellen k&ouml;nnten seriell und noch gepflegt Ausdruck des charakteristischen Marker wie OCT4 und NANOG in-vitro-, sowie die M&ouml;glichkeit, alle drei Keim-Schichten, die in-vivo generieren passaged werden. Diese Ergebnisse zeigen, dass die JK1-Zelllinie langfristige Kultur der primitiven Zellen f&ouml;rdern kann. So diese Zelllinie erm&ouml;glicht die Identifizierung der stromal abgeleiteten Faktoren, die langfristige Verbreitung der verschiedenen Arten von Stammzellen zu unterst&uuml;tzen und stellt eine bequeme Alternative zu anderen Arten von Zubringer-Schichten. Offenlegung von m&ouml;glichen Interessenkonflikten findet sich am Ende dieses Artikels.

CD34 + Hoden Stromale Zellen unterst&uuml;tzen langfristige Ausbau der embryonalen und adulten Stammzellen und Vorl&auml;uferzellen Zellen.

Cellule staminali risiedono in microambienti specializzati creati da cellule stromali che orchestrare la differenziazione di auto-rinnovamento e lineage-specifici di supporto. Tuttavia, l&#39;identit&agrave; precisa delle vie molecolari e cellulari che supportano l&#39;auto-rinnovamento delle cellule staminali non &egrave; noto. Ad esempio, cultura a lungo termine di cellule prototipiche, quali spermatogoni staminali e progenitrici cellule adulte (SPCs), in vitro &egrave; stato ostacolato dalla mancanza di una linea ottimale delle cellule stromali che avvia e sostiene la proliferazione di queste cellule. Infatti, attuali metodi, compreso l&#39;uso dei fibroblasti embrionali (MEFs), non sono efficienti e in genere hanno portato a risultati inconsistenti. Qui, segnaliamo l&#39;istituzione di una linea di cellule CD34-positivi romanzo, indicata come JK1, derivato da cellule stromali testicolare del mouse che non solo ha facilitato a lungo termine cultura SPC ma anche consentito fedele generazione di riassunti e di cellule staminali multipotenti. SPCs generato su JK1 mantenuto le caratteristiche principali delle cellule staminali linea germinale, tra cui espressione di PLZF, DAZL e GCNA. Inoltre, questi alimentatori anche promosso la coltura a lungo termine di altri tipi di celle primitive adulti spermatogoni derivate da cellule staminali multipotenti, murino cellule staminali embrionali pluripotenti e cellule embrionali germinali derivate da cellule germinali primordiali. Le cellule staminali potrebbero essere attraversate in serie e ancora mantenuta espressione di marcatori caratteristici come OCT4 e NANOG in vitro, come pure la capacit&agrave; di generare tutti i tre strati germinali in vivo. Questi risultati indicano che la linea cellulare JK1 &egrave; in grado di promuovere la cultura a lungo termine di cellule primitive. Come tale, questa linea cellulare consente per l&#39;identificazione di fattori stromali derivate che supportano la proliferazione a lungo termine di vari tipi di cellule staminali e costituisce una comoda alternativa ad altri tipi di strati dell&#39;alimentatore. Divulgazione dei potenziali conflitti di interesse si trova alla fine di questo articolo.

Cellule stromale testicolare CD34 + supportano l&#39;espansione a lungo termine delle cellule staminali e progenitrici adulte ed embrionali.

&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x8CEA;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x81EA;&#x5DF1;&#x8907;&#x88FD;&#x3068;&#x7CFB;&#x7D71;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x8ABF;&#x6574;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F5C;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7279;&#x6B8A;&#x306A;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x81EA;&#x5DF1;&#x8907;&#x88FD;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5206;&#x5B50;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A; id &#x306F;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x305F;&#x3068;&#x3048;&#x3070;&#x3001;&#x6210;&#x4EBA;&#x7CBE;&#x539F;&#x5E79;&#x30FB;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE; (Spc) &#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x539F;&#x578B;&#x306E;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9577;&#x671F;&#x57F9;&#x990A;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x652F;&#x3048;&#x308B;&#x6700;&#x9069;&#x306A;&#x9593;&#x8CEA;&#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x59A8;&#x5BB3;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5B9F;&#x969B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE; (MEFs) &#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A; SPC &#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3060;&#x3051;&#x3067; Spc &#x3068;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x306A;&#x4E16;&#x4EE3;&#x3082;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7CBE;&#x5DE3;&#x9593;&#x8CEA;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F; JK1 &#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x65B0;&#x898F;&#x306E; CD34 &#x967D;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306E;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;JK1 &#x3067;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F; Spc &#x306E;&#x751F;&#x6B96;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;PLZF&#x3001;DAZL&#x3001;&#x30AB;&#x30EA;&#x30E8;&#x30F3;&#x594F;&#x8005;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x9001;&#x308A;&#x88C5;&#x7F6E;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x4ED6;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306E;&#x539F;&#x59CB;&#x7684;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x6210;&#x4EBA;&#x7CBE;&#x539F;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x59CB;&#x539F;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x80DA;&#x6027;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x683D;&#x57F9;&#x3092;&#x63A8;&#x9032;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x9023;&#x7D9A;&#x7684;&#x3001;&#x307E;&#x3060;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x308B; OCT4 &#x3068; in vitro &#x306A;&#x3069;&#x7279;&#x5FB4;&#x7684;&#x306A;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E; in vivo &#x3067;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E; 3 &#x3064;&#x80DA;&#x306E;&#x5C64;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x7D99;&#x4EE3;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F; JK1 &#x30BB;&#x30EB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x539F;&#x59CB;&#x7684;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x6587;&#x5316;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x9593;&#x8CEA;&#x7531;&#x6765;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x3067;&#x304D;&#x4FBF;&#x5229;&#x306B;&#x4ED6;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306E;&#x9001;&#x308A;&#x88C5;&#x7F6E;&#x306E;&#x5C64;&#x3092;&#x69CB;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x5229;&#x76CA;&#x76F8;&#x53CD;&#x306E;&#x958B;&#x793A;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x8CC7;&#x6599;&#x306E;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Cd34 &#x7CBE;&#x5DE3;&#x9593;&#x8CEA;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x80CE;&#x5150;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6210;&#x4F53;&#x5E79;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x62E1;&#x5927;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xC790;&#xAE30; &#xAC31;&#xC2E0;&#xACFC; &#xACC4;&#xBCF4; &#xAD00;&#xB828; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xC870;&#xC815; stromal &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD558; &#xC5EC; &#xB9CC;&#xB4E0; &#xC804;&#xBB38;&#xB41C; microenvironments&#xC5D0; &#xAC70;&#xC8FC;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC790;&#xAE30; &#xAC31;&#xC2E0;&#xC744; &#xC9C0; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xC774; &#xACE0; &#xBD84;&#xC790; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xC815;&#xCCB4;&#xC131;&#xC740; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4;, &#xC131;&#xC778; spermatogonial &#xC904;&#xAE30;&#xC640; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xB4F1; (&#xAD6D;&#xACFC;) &#xCCB4; &#xC678; &#xC6D0;&#xD615; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC7A5;&#xAE30; &#xBB38;&#xD654; &#xCD5C;&#xC801;&#xC758; stromal &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;&#xC744; &#xC2DC;&#xC791; &#xD558; &#xACE0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC744; &#xACA9;&#xB824; &#xD558; &#xACE0;&#xC758; &#xBD80;&#xC871;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC7A5;&#xC560;&#xAC00; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC0AC;&#xC2E4;, &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBBF8; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; (MEFs)&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xD604;&#xC7AC; &#xBC29;&#xBC95; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xACE0; &#xC77C;&#xAD00;&#xC131; &#xC5C6;&#xB294; &#xACB0;&#xACFC;&#xB97C; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC84C;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC18C;&#xC124; CD34 &#xC591;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xACE0;&#xD658; stromal &#xC138;&#xD3EC; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC7A5;&#xAE30; SPC &#xBB38;&#xD654;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB610;&#xD55C; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xAD6D;&#xACFC; multipotent &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xCDA9;&#xC2E4; &#xD55C; &#xC138;&#xB300;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; JK1 &#xB77C;&#xACE0; &#xC124;&#xB9BD;&#xC744; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAD6D;&#xACFC; JK1 &#xC0DD;&#xC131; &#xC138;&#xADE0; &#xC120; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;, PLZF, DAZL, GCNA&#xC758; &#xC2DD; &#xB4F1;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC9C0;&#xB958;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC140; multipotent &#xC131;&#xC778; spermatogonial &#xC720;&#xB798; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;, &#xBC30;&#xC544; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xC6D0;&#xC2DC; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C;, pluripotent murine &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xB4F1;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xC885;&#xB958;&#xC758; &#xC7A5;&#xAE30; &#xC7AC;&#xBC30; &#xC2B9;&#xC9C4;. &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xC9C1;&#xB82C;&#xB85C; &#xC544;&#xC9C1;&#xB3C4; &#xC138; &#xC138;&#xADE0; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD2B9;&#xC131; &#xB9C8;&#xCEE4; OCT4 &#xBC0F; NANOG &#xC2DC;&#xD5D8;&#xAD00;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC19;&#xC740; &#xC2DD;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; passaged &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; JK1 &#xC140; &#xB77C;&#xC778; &#xC6D0;&#xC2DC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC7A5;&#xAE30; &#xBB38;&#xD654;&#xB97C; &#xD64D;&#xBCF4; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC74C;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;,&#xC774; &#xC140; &#xB77C;&#xC778; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC885;&#xB958;&#xC758; &#xC7A5;&#xAE30; &#xD655;&#xC0B0;&#xC744; &#xC9C0; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; stromal &#xC694;&#xC778;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xAD6C;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xC720;&#xD615;&#xC758; &#xD53C;&#xB354; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4;&#xB97C; &#xD3B8;&#xB9AC; &#xD558; &#xAC8C; &#xB300;&#xC548;. &#xAD00;&#xC2EC;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xCDA9;&#xB3CC;&#xC758; &#xACF5;&#xAC1C;&#xB294;&#xC774; &#xBB38;&#xC11C;&#xC758; &#xB05D;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB41C;&#xB2E4;.

CD34 + &#xACE0;&#xD658; stromal &#xC138;&#xD3EC; &#xBC30;&#xC544;&#xC640; &#xC131;&#xC778; &#xC904;&#xAE30;&#xC640; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC7A5;&#xAE30; &#xD655;&#xC7A5;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Las c&eacute;lulas madre residen en microambientes especializados creados por apoyar a las c&eacute;lulas del estroma que orquestaran diferenciaci&oacute;n de auto renovaci&oacute;n y linaje espec&iacute;fico. Sin embargo, se desconoce la identidad precisa de las v&iacute;as celulares y moleculares que apoyar la renovaci&oacute;n de las c&eacute;lulas madre. Por ejemplo, cultura a largo plazo de c&eacute;lulas prototipo, como adultos madre y progenitoras espermatogonias (CCP), in vitro ha sido impedida por la falta de una l&iacute;nea de c&eacute;lulas estromales &oacute;ptimo que inicia y sostiene la proliferaci&oacute;n de estas c&eacute;lulas. De hecho, los m&eacute;todos actuales, incluyendo el uso de fibroblastos embrionarios de rat&oacute;n (MEFs), no han sido eficientes y generalmente han conducido a resultados inconsistentes. Aqu&iacute;, Divulgamos el establecimiento de una l&iacute;nea de c&eacute;lulas CD34 positivas novela, denominado JK1, derivadas de c&eacute;lulas de estroma testicular de rat&oacute;n que no s&oacute;lo facilitaron la cultura SPC a largo plazo pero tambi&eacute;n permitieron fiel generaci&oacute;n de CCP y c&eacute;lulas madre pluripotentes. CCP generada en JK1 mantiene caracter&iacute;sticas clave de germen l&iacute;nea de c&eacute;lulas madre, incluyendo la expresi&oacute;n de PLZF, DAZL y GCNA. Adem&aacute;s, estos alimentadores tambi&eacute;n promovieron el cultivo a largo plazo de otros tipos de c&eacute;lulas primitivas como pluripotentes adultas espermatogonias c&eacute;lulas murino c&eacute;lulas embrionarias pluripotenciales y c&eacute;lulas de germen embrionarias derivadas de las c&eacute;lulas germinales primordiales. Las c&eacute;lulas madre podr&iacute;an ser pasadas en serie y todav&iacute;a mantiene la expresi&oacute;n de marcadores caracter&iacute;sticos como OCT4 y NANOG in vitro, as&iacute; como la capacidad para generar las tres capas del germen en vivo. Estos resultados indican que la l&iacute;nea celular de JK1 es capaz de promover la cultura a largo plazo de las c&eacute;lulas primitivas. As&iacute;, esta l&iacute;nea celular permite la identificaci&oacute;n de factores derivados del estroma que apoyan a largo plazo proliferaci&oacute;n de varios tipos de c&eacute;lulas madre y constituye una alternativa conveniente a otros tipos de capas de alimentador. Divulgaci&oacute;n de potenciales conflictos de inter&eacute;s se encuentra al final de este art&iacute;culo.

C&eacute;lulas del estroma testiculares CD34 + soporte de expansi&oacute;n a largo plazo de las c&eacute;lulas madre y progenitoras embrionarias y adultas.

&#x8840;&#x7BA1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x5B98;&#x548C;&#x80BF;&#x7624;&#x53D1;&#x751F;&#x6240;&#x8D21;&#x732E;&#x4EA7;&#x751F;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x4E3B;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x4F69;&#x5947;) &#x8BC6;&#x522B;&#x652F;&#x6301;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x80BF;&#x7624;&#x5185;&#x7A33;&#x6001;&#x7684;&#x56E0;&#x7D20;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6709;&#x6559;&#x80B2;&#x610F;&#x4E49;&#x7684;&#x5E73;&#x53F0;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x957F;&#x671F;&#x7EF4;&#x62A4;&#x7684;&#x4F69;&#x5947;&#x9700;&#x8981;&#x523A;&#x6FC0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x548C;&#x8840;&#x6E05;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5176;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x5C5E;&#x6027;&#x4E22;&#x5931;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x907F;&#x5F00;&#x8FD9;&#x4E00;&#x969C;&#x788D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2; E4ORF1 &#x57FA;&#x56E0;&#x4EA7;&#x54C1;&#x4FDD;&#x6301;&#x957F;&#x671F;&#x751F;&#x5B58;&#x548C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5668;&#x5B98;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x7EAF;&#x5316;&#x4F69;&#x5947;&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x4FDD;&#x7559;&#x5176;&#x8840;&#x7BA1;&#x6C47;&#x8F91;&#x4E3A;&#x8840;&#x6E05;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x81EA;&#x7531;&#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x6708;&#x3002;E4ORF1 &#x6162;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5F15;&#x5165;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4F69;&#x5947; (E4ORF1(+) ECs) &#x589E;&#x52A0;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8840;&#x6E05;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x4FDD;&#x6301;&#x5176;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210; tubulogenesis &#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#x548C;&#x53D1;&#x82BD;&#x7684;&#x957F;&#x671F;&#x751F;&#x5B58;&#x3002;&#x867D;&#x7136; E4ORF1&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6269;&#x6563;&#x7684; ECs&#xFF0C;&#x523A;&#x6FC0;&#x4E0E; VEGF A &#x548C; &#xFF08;&#x6216;&#xFF09; FGF-2 &#x63A5;&#x89E6;&#x6291;&#x5236;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x8BF1;&#x5BFC; E4ORF1(+) ECs &#x6269;&#x5F20;&#x3002;&#x4E8B;&#x5B9E;&#x4E0A;&#xFF0C;E4ORF1(+) ECs VEGF-A &#x8BF1;&#x5BFC;&#x78F7;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E0E;&#x5929;&#x771F;&#x4F69;&#x5947;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E; VEGF &#x53D7;&#x4F53;&#x4FDD;&#x6301;&#x529F;&#x80FD;&#x540E; E4ORF1 &#x4ECB;&#x7ECD;&#xFF0C;&#x76F8;&#x5F53;&#x3002;E4ORF1(+) ECs &#x63A5;&#x79CD;&#x690D;&#x5165; Matrigel &#x63D2;&#x5934;&#x5F62;&#x6210;&#x529F;&#x80FD;&#x3001; &#x4E13;&#x5229;&#x3001; &#x4EBA;&#x6027;&#x5316;&#x5FAE;&#x8840;&#x7BA1;&#x8FDE;&#x63A5;&#x5230;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x6D41;&#x901A;&#x3002;E4ORF1(+) ECs &#x4E5F;&#x7EB3;&#x5165;&#x65B0;&#x8239;&#x53EA;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80BF;&#x7624;&#x5F02;&#x4F53;&#x5668;&#x5B98;&#x7684;&#x79FB;&#x690D;&#x548C;&#x652F;&#x6301;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x548C;&#x80DA;&#x80CE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8840;&#x6E05;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x81EA;&#x7531;&#x6269;&#x5C55;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x7EF4;&#x62A4; FGF-2/FGF-R1 &#x4FE1;&#x53F7;&#x548C;&#x8865;&#x54C1; Ser 473 &#x78F7;&#x9178;&#x5316; Akt&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x6FC0;&#x6D3B; NF &#x6D3B;&#x5316;&#x901A;&#x8DEF;&#x4E0E; mTOR E4ORF1 &#x90E8;&#x5206;&#x8865;&#x5145;&#x4E86;&#x4F69;&#x5947;&#x7684;&#x751F;&#x5B58;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;E4ORF1(+) ECs &#x5EFA;&#x7ACB;&#x4F9D;&#x8D56; Akt &#x7684;&#x6301;&#x4E45;&#x8840;&#x7BA1;&#x5229;&#x57FA;&#x4E0D;&#x4EC5;&#x6269;&#x5927;&#x5E72;&#x548C;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8BAF;&#x95EE;&#x4E2D;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x5B98;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x4E0E;&#x80BF;&#x7624;&#x65B0;&#x8840;&#x7BA1;&#x7684;&#x751F;&#x6210;&#x8840;&#x7BA1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x7531;&#x817A;&#x75C5;&#x6BD2; E4ORF1 &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x548C;&#x6301;&#x4E45;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x5229;&#x57FA;&#x7684;&#x4E00;&#x4EE3;&#x3002;

Vascular cells contribute to organogenesis and tumorigenesis by producing unknown factors. Primary endothelial cells (PECs) provide an instructive platform for identifying factors that support stem cell and tumor homeostasis. However, long-term maintenance of PECs requires stimulation with cytokines and serum, resulting in loss of their angiogenic properties. To circumvent this hurdle, we have discovered that the adenoviral E4ORF1 gene product maintains long-term survival and facilitates organ-specific purification of PECs, while preserving their vascular repertoire for months, in serum/cytokine-free cultures. Lentiviral introduction of E4ORF1 into human PECs (E4ORF1(+) ECs) increased the long-term survival of these cells in serum/cytokine-free conditions, while preserving their in vivo angiogenic potential for tubulogenesis and sprouting. Although E4ORF1, in the absence of mitogenic signals, does not induce proliferation of ECs, stimulation with VEGF-A and/or FGF-2 induced expansion of E4ORF1(+) ECs in a contact-inhibited manner. Indeed, VEGF-A-induced phospho MAPK activation of E4ORF1(+) ECs is comparable with that of naive PECs, suggesting that the VEGF receptors remain functional upon E4ORF1 introduction. E4ORF1(+) ECs inoculated in implanted Matrigel plugs formed functional, patent, humanized microvessels that connected to the murine circulation. E4ORF1(+) ECs also incorporated into neo-vessels of human tumor xenotransplants and supported serum/cytokine-free expansion of leukemic and embryonal carcinoma cells. E4ORF1 augments survival of PECs in part by maintaining FGF-2/FGF-R1 signaling and through tonic Ser-473 phosphorylation of Akt, thereby activating the mTOR and NF-kappaB pathways. Therefore, E4ORF1(+) ECs establish an Akt-dependent durable vascular niche not only for expanding stem and tumor cells but also for interrogating the roles of vascular cells in regulating organ-specific vascularization and tumor neo-angiogenesis.

Generation of a functional and durable vascular niche by the adenoviral E4ORF1 gene.

Les cellules vasculaires contribuent &agrave; l&#39;organogen&egrave;se et tumorigen&egrave;se en produisant des facteurs inconnus. Les cellules endoth&eacute;liales primaires (PECs) constituent une plate-forme instructive pour identifier les facteurs qui favorisent l&#39;hom&eacute;ostasie de la tumeur et de cellules souches. Maintenance &agrave; long terme des PECs exige toutefois une stimulation avec les cytokines et le s&eacute;rum, entra&icirc;nant la perte de leurs propri&eacute;t&eacute;s angiog&eacute;niques. Pour contourner cet obstacle, nous avons d&eacute;couvert que le produit du g&egrave;ne ad&eacute;noviral E4ORF1 maintient la survie &agrave; long terme et facilite la purification de certains organes de PECs, tout en pr&eacute;servant leur r&eacute;pertoire vasculaire pendant des mois, dans les cultures sans s&eacute;rum/cytokine. Introduction des g&egrave;nes de E4ORF1 dans humain PECs (E4ORF1(+) ECs) a augment&eacute; la survie &agrave; long terme de ces cellules dans des conditions de milieu sans s&eacute;rum/cytokine, tout en pr&eacute;servant leur angiog&eacute;niques in vivo potentiels pour tubulogen&egrave;se et de germination. Bien que E4ORF1, en l&#39;absence de signaux mitog&egrave;nes, n&#39;induit pas la prolif&eacute;ration d&#39;ECs, stimulation avec le VEGF-A et/ou FGF-2 induite par l&#39;expansion d&#39;ECs E4ORF1(+) d&#39;une mani&egrave;re inhib&eacute;es par contact. En effet, l&#39;activation de MAPK phospho induite par le VEGF-A de E4ORF1(+) ECs est comparable &agrave; celle des PECs na&iuml;f, ce qui sugg&egrave;re que les r&eacute;cepteurs du VEGF restent fonctionnels d&egrave;s l&#39;introduction de l&#39;E4ORF1. E4ORF1(+) ECs inocul&eacute;s dans implant&eacute;s Matrigel bouchons form&eacute;s fonctionnelles, brevets, humanis&eacute;s microvaisseaux connect&eacute;s &agrave; la circulation murine. E4ORF1(+) ECs a &eacute;galement incorpor&eacute; de n&eacute;o-vaisseaux de x&eacute;nogreffes tumorales humaines et appuy&eacute; l&#39;expansion sans s&eacute;rum/cytokines des cellules leuc&eacute;miques et embryonnaire. E4ORF1 augmente la survie des PECs en partie en maintenant le FGF-2/FGF-R1 de signalisation et par le biais de phosphorylation Ser-473 tonique d&#39;Akt, activant ainsi la mTOR et voies de NF-kappaB. Par cons&eacute;quent, ECs E4ORF1(+) &eacute;tablissent un cr&eacute;neau durable vasculaire Akt-d&eacute;pendante non seulement pour l&#39;expansion des cellules souches et de la tumeur, mais aussi pour interroger les r&ocirc;les des cellules vasculaires dans la r&eacute;gulation de certains organes vascularisation et tumeur n&eacute;o-angiogen&egrave;se.

G&eacute;n&eacute;ration d&#39;un cr&eacute;neau vasculaire fonctionnel et durable par le g&egrave;ne E4ORF1 viraux.

Vaskul&auml;re Zellen tragen zur Organogenese und Tumorentstehung durch die Herstellung von unbekannter Faktoren. Prim&auml;re Endothelzellen (PECs) bieten eine lehrreiche Plattform zur Identifizierung von Faktoren, die Stammzellen und Tumor-Hom&ouml;ostase zu unterst&uuml;tzen. Allerdings erfordert langfristige Wartung von PECs Stimulation mit Zytokinen und Serum, die zum Verlust ihrer Angiogenese-Eigenschaften. Um diese H&uuml;rde zu umgehen, haben wir entdeckt, dass die adenoviral E4ORF1 Genprodukt langfristiges &Uuml;berleben unterh&auml;lt und organspezifischen Reinigung von PECs, unter Beibehaltung der vaskul&auml;re Repertoire monatelang in Serum/Zytokin-freie Kulturen erleichtert. Lentivirale Einf&uuml;hrung von E4ORF1 in menschlichen PECs (E4ORF1(+) ECs) erh&ouml;ht das langfristige &Uuml;berleben dieser Zellen in Serum/Zytokin-freien Bedingungen, unter Wahrung ihrer in-vivo-angiogenen potential f&uuml;r Tubulogenesis und sprie&szlig;en. Obwohl E4ORF1, in Ermangelung von mitogenen Signale, nicht Verbreitung von ECs, Stimulation mit VEGF-A induzieren und/oder FGF-2 Erweiterung des E4ORF1(+) ECs in gewissem Sinne Kontakt-gehemmt induzierte. VEGF-A-induzierte Phospho MAPK Aktivierung des E4ORF1(+) ECs ist vergleichbar mit der naiven PECs, was darauf hindeutet, dass die VEGF-Rezeptoren funktionieren auf E4ORF1 Einf&uuml;hrung weiterhin. E4ORF1(+) ECs verimpft in implantierten Matrigel Stecker gebildet funktionell, patent, humanisierte Microvessels, die mit den murinen Kreislauf verbunden. E4ORF1(+) ECs auch Neo-Gef&auml;&szlig;e des menschlichen Tumor Xenotransplantate einverleibt und Serum/Zytokin-freie Ausbreitung einer leuk&auml;mischen und embryonal Karzinom-Zellen gef&ouml;rdert. E4ORF1 erweitert &Uuml;berleben von PECs teilweise durch die Aufrechterhaltung der FGF-2/FGF-R1 zu signalisieren und durch tonische Ser-473 Phosphorylierung von Akt, dadurch Aktivierung des mTOR und NF-KappaB Wege. Deshalb einrichten E4ORF1(+) ECs eine Akt-abh&auml;ngige haltbare gef&Atilde; &curren; Nische nicht nur f&uuml;r den Ausbau der Stamm- und Tumor-Zellen, sondern auch f&uuml;r die Abfrage der Rollen von vaskul&auml;ren Zellen bei der Regulierung der organspezifischen Vaskularisierung und Tumor Neo-Angiogenese.

Generation eine funktionale und langlebige gef&Atilde; &curren; Nische adenoviral E4ORF1 gen.

Cellule vascolari contribuiscono all&#39;organogenesi e tumorigenesi producendo fattori sconosciuti. Le cellule endoteliali primarie (PECs) forniscono una piattaforma istruttiva per identificare i fattori che supportano le cellule staminali e omeostasi del tumore. Manutenzione a lungo termine di PECs richiede tuttavia, stimolazione con siero, con conseguente perdita delle loro propriet&agrave; angiogeniche e citochine. Per aggirare questo ostacolo, abbiamo scoperto che il prodotto del gene E4ORF1 adenovirale mantiene la sopravvivenza a lungo termine e facilita la purificazione organo-specifiche di PECs, pur conservando il loro repertorio vascolare per mesi, nel siero/citochina-free culture. Introduzione lentivirali di E4ORF1 umano PECs (E4ORF1(+) ECs) aumenta la sopravvivenza a lungo termine di queste cellule in condizioni di cytokine/serum-free, pur conservando la loro angiogenesi in vivo potenziali per tubulogenesis e germinazione. Anche se E4ORF1, in assenza di segnali mitogeni, non indurre proliferazione di ECs, la stimolazione con VEGF-A e/o FGF-2 indotta espansione della ECs E4ORF1(+) in maniera contatto inibito. Infatti, attivazione MAPK fosfo indotta da VEGF-A di E4ORF1(+) ECs &egrave; paragonabile a quello di PECs ingenuo, suggerendo che i recettori VEGF funzionali all&#39;introduzione di E4ORF1. E4ORF1(+) ECs inoculato in impiantato Matrigel spine formate funzionale, brevetto, umanizzato Talengectasia che collegato alla circolazione murina. ECs E4ORF1(+) anche incorporato nel neo-vasi del tumore umano xenotrapianti e supportato siero/citochina-libera espansione delle cellule di carcinoma embrionale e leucemici. E4ORF1 aumenta la sopravvivenza di PECs in parte mantenendo la segnalazione di FGF-2/FGF-R1 e attraverso la fosforilazione di Ser-473 tonico di Akt, attivando quindi il mTOR e percorsi di NF-kappaB. Pertanto, ECs E4ORF1(+) stabilire una nicchia-vascolare durevole del Akt-dipendente non solo per l&#39;espansione di cellule staminali e tumore, ma anche per interrogare i ruoli di cellule vascolari nella regolazione organo-specifiche del tumore e vascolarizzazione neo-angiogenesi.

Generazione di una nicchia funzionale e durevole vascolare dal gene E4ORF1 adenovirale.

&#x8840;&#x7BA1;&#x7D30;&#x80DE;&#x5668;&#x5B98;&#x5F62;&#x6210;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x816B;&#x760D;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x672A;&#x77E5;&#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x3092;&#x751F;&#x7523;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE; (PECs) &#x306F;&#x3001;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x6052;&#x5E38;&#x6027;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x8981;&#x56E0;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x6709;&#x76CA;&#x306A;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x9577;&#x671F;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x30F3;&#x30B9; PECs &#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x7279;&#x6027;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x8840;&#x6E05;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30CF;&#x30FC;&#x30C9;&#x30EB;&#x3092;&#x56DE;&#x907F;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E; E4ORF1 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7523;&#x7269;&#x306F;&#x9577;&#x671F;&#x751F;&#x5B58;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057;&#x3001;&#x30DA;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x81D3;&#x5668;&#x7279;&#x7570;&#x7CBE;&#x88FD;&#x8840;&#x6E05;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x7121;&#x6599;&#x6587;&#x5316;&#x3067;&#x30F6;&#x6708;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x30EC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4EBA;&#x9593; PECs (E4ORF1(+) ECs) E4ORF1 &#x306E;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C1; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5C0E;&#x5165;&#x306E; in vivo &#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F; tubulogenesis &#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3068;&#x767A;&#x82BD;&#x4E2D;&#x8840;&#x6E05;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x7121;&#x6599;&#x6761;&#x4EF6;&#x3067;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9577;&#x671F;&#x751F;&#x5B58;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;E4ORF1&#x3001;ECs &#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x764C;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x3067;&#x306F;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x3001;&#x523A;&#x6FC0;&#x3068; VEGF A &#x304A;&#x3088;&#x3073; FGF 2 E4ORF1(+) ECs &#x306E;&#x62E1;&#x5927;&#x63A5;&#x89E6;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x305F;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x78BA;&#x304B;&#x306B;&#x3001;VEGF &#x8A98;&#x8D77; A &#x30D5;&#x30A9;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A9; MAPK &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316; E4ORF1(+) ECs &#x306E; VEGF &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; E4ORF1 &#x306E;&#x5C0E;&#x5165;&#x6642;&#x306B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7DAD;&#x6301;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3001;&#x4E16;&#x9593;&#x77E5;&#x3089;&#x305A;&#x306E;&#x30DA;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x3068;&#x540C;&#x7B49;&#x3067;&#x3059;&#x3002;E4ORF1(+) ECs &#x3092;&#x63A5;&#x7A2E;&#x3057;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x5FAA;&#x74B0;&#x3092;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x6CE8;&#x5165;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30B2;&#x30EB; &#x30D7;&#x30E9;&#x30B0;&#x5F62;&#x6210;&#x6A5F;&#x80FD;, &#x7279;&#x8A31;, &#x30D2;&#x30C8;&#x5316;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x3067;&#x3002;E4ORF1(+) ECs &#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x816B;&#x760D; xenotransplants &#x306E;&#x30CD;&#x30AA;&#x5BB9;&#x5668;&#x306B;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3001;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x80CE;&#x5150;&#x6027;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7121;&#x8840;&#x6E05;/&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x9032;&#x51FA;&#x3092;&#x652F;&#x63F4;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;E4ORF1 PECs &#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x306F;&#x4E00;&#x90E8; FGF 2/FGF R1 &#x3092;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x7DAD;&#x6301;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30C8;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; Ser 473 &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316; Akt, &#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; mTOR &#x3068; NF-&kappa; b &#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x3092;&#x88DC;&#x5F37;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;E4ORF1(+) ECs&#x3001;Akt &#x4F9D;&#x5B58;&#x578B;&#x8010;&#x4E45;&#x6027;&#x8840;&#x7BA1;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C1;&#x5E79;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x62E1;&#x5927;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x81D3;&#x5668;&#x7279;&#x7570;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x816B;&#x760D;&#x30CD;&#x30AA;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x8840;&#x7BA1;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x5C0B;&#x554F;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E; E4ORF1 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x8010;&#x4E45;&#x6027;&#x8840;&#x7BA1;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C1;&#x306E;&#x4E16;&#x4EE3;&#x3002;

&#xD608;&#xAD00; &#xC138;&#xD3EC; organogenesis&#xC640; tumorigenesis&#xB97C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xB294; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xC694;&#xC778;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAE30;&#xC5EC;. &#xC8FC; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (&#xADFC;&#xC721;) &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xC885;&#xC591; &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC720;&#xC775;&#xD55C; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xADFC;&#xC721;&#xC758; &#xC7A5;&#xAE30;&#xC801;&#xC778; &#xC720;&#xC9C0; &#xAD00;&#xB9AC; cytokines&#xACFC; angiogenic &#xC18D;&#xC131;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xD608; &#xCCAD; &#xC790;&#xADF9;&#xC774; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC7A5;&#xC560;&#xBB3C; &#xD68C;&#xD53C;, &#xC6B0;&#xB9AC; adenoviral E4ORF1 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC81C;&#xD488; &#xC7A5;&#xAE30; &#xC0DD;&#xC874;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xD608; &#xCCAD;/cytokine &#xBB34;&#xB8CC; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0; &#xBA87; &#xB2EC; &#xB3D9;&#xC548; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD608;&#xAD00; &#xB808; &#xD37C; &#xD1A0;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xBA74;&#xC11C; &#xADFC;&#xC721;, &#xC7A5;&#xAE30; &#xBCC4; &#xC815;&#xD654;&#xB97C; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xADFC;&#xC721; (E4ORF1(+) ECs)&#xC5D0; e4orf1&#xC758; lentiviral &#xB3C4;&#xC785; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xBA74;&#xC11C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; angiogenic tubulogenesis&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xBCF4;&#xC874;&#xACFC; &#xB3CB; &#xC544; &#xC138;&#xB7FC;/cytokine &#xBB34;&#xB8CC; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC140;&#xC758; &#xC7A5;&#xAE30; &#xC0DD;&#xC874;. E4ORF1, mitogenic &#xC2E0;&#xD638;&#xAC00; &#xC5C6;&#xC744; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; Ecs&#xC758; &#xD655;&#xC0B0;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; VEGF A &#xD558;&#xAC70;&#xB098; FGF-2 &#xC790;&#xADF9; &#xC811;&#xCD09; &#xC800;&#xD574; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; E4ORF1(+) Ecs&#xC758; &#xD655;&#xC7A5;&#xC744; &#xC720;&#xBC1C;. &#xC2E4;&#xC81C;&#xB85C;, E4ORF1(+) Ecs&#xC758; VEGF &#xC720;&#xB3C4; &#xC778; MAPK &#xD65C;&#xC131;&#xD654; na&iuml; ve &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; VEGF &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; E4ORF1 &#xB3C4;&#xC785;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC791;&#xB3D9; &#xD558;&#xB294; &#xADFC;&#xC721;&#xC758; &#xADF8;&#xAC83;&#xACFC; &#xBE44;&#xAD50; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. E4ORF1(+) ECs &#xC774;&#xC2DD;&#xB41C; Matrigel &#xD50C;&#xB7EC;&#xADF8; &#xD615;&#xC131; &#xAE30;&#xB2A5;, &#xD2B9;&#xD5C8;, humanized microvessels murine &#xC21C;&#xD658; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xC0AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. E4ORF1(+) Ecs&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC885;&#xC591; xenotransplants&#xC758; &#xB124;&#xC624;-&#xD608;&#xAD00;&#xC5D0; &#xD1B5;&#xD569; &#xBC0F; leukemic embryonal &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD608; &#xCCAD;/cytokine &#xBB34;&#xB8CC; &#xD655;&#xC7A5;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. E4ORF1 FGF 2/FGF R1 &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; Mtor&#xC640; NF kappaB &#xACBD;&#xB85C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xB294; Akt&#xC758; &#xD1A0; &#xB2C9; Ser-473 &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xADFC;&#xC721;&#xC758; &#xC0DD;&#xC874;&#xC744; &#xAC15;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, E4ORF1(+) Ecs&#xB294; Akt &#xC885;&#xC18D; &#xD2BC;&#xD2BC;&#xD55C; &#xD608;&#xAD00; &#xD2C8;&#xC0C8; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC904;&#xAE30;&#xC640; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC; &#xD655;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xADDC;&#xC81C; &#xAE30;&#xAD00;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; vascularization &#xBC0F; &#xC885;&#xC591; &#xB124;&#xC624;-&#xC2E0;&#xC0DD; &#xD608;&#xAD00; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC2EC;&#xBB38; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC124;&#xC815;.

Adenoviral E4ORF1 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBC0F; &#xD2BC;&#xD2BC;&#xD55C; &#xD608;&#xAD00; &#xD2C8;&#xC0C8;&#xC758; &#xC138;&#xB300;.

Las c&eacute;lulas vasculares contribuyen a organog&eacute;nesis y tumorigenesis produciendo factores desconocidos. Las c&eacute;lulas endoteliales primarias (PECs) proporcionan una plataforma instructiva para identificar factores que apoyan la c&eacute;lula de v&aacute;stago y homeostasis del tumor. Sin embargo, el mantenimiento a largo plazo de PECs requiere estimulaci&oacute;n con citoquinas y suero, resultando en la p&eacute;rdida de sus propiedades angiog&eacute;nicas. Para sortear este obst&aacute;culo, hemos descubierto que el producto del gene E4ORF1 adenoviral mantiene la supervivencia a largo plazo y facilita la purificaci&oacute;n de &oacute;rgano-espec&iacute;ficas de PECs, conservando su repertorio vascular durante meses, en culturas sin suero/citocinas. Lentivirales introducci&oacute;n de E4ORF1 en humanos PECs (E4ORF1(+) ECs) aument&oacute; la supervivencia a largo plazo de estas c&eacute;lulas en condiciones de libre de suero/citocinas, preservando su angiog&eacute;nica in vivo potencial para tubulogenesis y brotaci&oacute;n. Aunque E4ORF1, en ausencia de se&ntilde;ales mitog&eacute;nicas, no induce la proliferaci&oacute;n de ECs, estimulaci&oacute;n con VEGF-A o FGF-2 inducida por expansi&oacute;n de ECs E4ORF1(+) una manera inhibida por contacto. De hecho, activaci&oacute;n de MAPK inducida por VEGF-A phospho de ECs E4ORF1(+) es comparable con la de PECs ingenuo, lo que sugiere que los receptores contin&uacute;en funcionando sobre la introducci&oacute;n de E4ORF1. ECs E4ORF1(+) inoculan en implantado Matrigel tapones de formado funcional, patentes, humanizado microvasos que conectado a la circulaci&oacute;n murina. E4ORF1(+) ECs tambi&eacute;n incorporaron en neo-vasos de xenotrasplantes tumorales humanas y apoy&oacute; la expansi&oacute;n libre de suero/citocinas de c&eacute;lulas leuc&eacute;micas y embrionarias. E4ORF1 aumenta la supervivencia de PECs en parte por mantener la se&ntilde;alizaci&oacute;n de FGF-2/FGF-R1 y a trav&eacute;s de la fosforilaci&oacute;n de Ser-473 t&oacute;nico de Akt, activando la mTOR y v&iacute;as de NF-kappaB. Por lo tanto, ECs E4ORF1(+) establecen un nicho vascular durable de Akt-dependiente no s&oacute;lo para la expansi&oacute;n de las c&eacute;lulas de v&aacute;stago y tumor, sino tambi&eacute;n para interrogar a las funciones de las c&eacute;lulas vasculares en la regulaci&oacute;n del &oacute;rgano-espec&iacute;ficas vascularizaci&oacute;n y tumor neo-angiog&eacute;nesis.

Generaci&oacute;n de un nicho vascular funcional y durable por el gen E4ORF1 adenoviral.

&#xB178;&#xB825; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; &#xC778;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (hESCs)&#xB97C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; &#xD655;&#xC7A5; &#xBC0F; &#xD608;&#xAD00; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC744; &#xB2EC;&#xC131; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Vasculogenic &#xBC1C;&#xB2EC; &#xACBD;&#xB85C; &#xC815;&#xC758; &#xD558; &#xACE0; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xB97C; &#xAC15;&#xD654;, &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (GFP) (hVPr-GFP) &#xD608;&#xAD00; &#xC57D;&#xC18D;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xB294; &#xC694;&#xC778;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD654;&#xBA74;&#xC744; &#xC6B4;&#xC804; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xAD00;&#xB828; VE cadherin &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; 1 &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC758; &#xD558;&#xB8E8; 7&#xC5D0;&#xC11C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; (TGF) &#xBCA0;&#xD0C0; &#xBCC0;&#xD658;&#xC758; &#xC5F4; &#xBC30; hVPr-GFP(+) &#xC140;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC99D;&#xAC00; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E8;&#xACC4; 2, TGFbeta &#xC800;&#xD574; &#xD655;&#xC0B0; &#xBC0F; &#xADE0;&#xC9C8; &#xC131; monolayers &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; net 36-fold &#xD655;&#xC7A5;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC21C;&#xD654; &#xB41C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD608;&#xAD00; &#xC815;&#xCCB4;&#xC131;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; Id1(high)VEGFR2(high)VE-cadherin(+) Ephrinb2(+)&#xC758; transcriptional &#xD504;&#xB85C;&#xD544; &#xC804;&#xC2DC;. Id1 YFP hESC &#xAE30;&#xC790; &#xB77C;&#xC778;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC0B4;&#xD3B4;&#xBCF8; TGFbeta &#xC800;&#xD574; hESC &#xC720;&#xB798; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; Id1 &#xC2DD; &#xACA9;&#xB824; &#xD558;&#xBA70; Id1 &#xC99D;&#xAC00; &#xD655;&#xC0B0;&#xACFC; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC9C0;&#xC758; &#xBCF4;&#xC874; &#xD544;&#xC694;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC640; &#xADDC;&#xBAA8; &#xC784;&#xC0C1; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; hESC &#xC720;&#xB798; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC7A5;&#xAE30;&#xC801;&#xC778; &#xC720;&#xC9C0; &#xAD00;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD608; &#xCCAD; &#xBB34;&#xB8CC; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD655;&#xC7A5; &#xBC0F; &#xC778;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB798; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; TGFbeta &#xC800;&#xD574; &#xD558; &#xC5EC; &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218; Id1 &#xC885;&#xC18D; &#xC774;&#xB2E4;.

&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x52AA;&#x529B;&#x5206;&#x5316;&#x4E3A;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (hESCs) &#x5E76;&#x672A;&#x5B9E;&#x73B0;&#x6301;&#x7EED;&#x7684;&#x6269;&#x5F20;&#x548C;&#x8840;&#x7BA1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x5B9A;&#x4E49;&#x8840;&#x7BA1;&#x6027;&#x53D1;&#x5C55;&#x8DEF;&#x5F84;&#x5E76;&#x52A0;&#x5F3A;&#x5206;&#x5316;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x9ECF;&#x86CB;&#x767D;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#xFF0C;&#x9A71;&#x52A8;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (GFP) (hVPr-GFP) &#x7B5B;&#x67E5; &#xFF1B; &#x4FC3;&#x8FDB;&#x8840;&#x7BA1;&#x627F;&#x8BFA;&#x7684;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E00;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x5728;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7B2C; 7 &#x5929;&#x8F6C;&#x5316;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; (TGF) &beta; &#x6291;&#x5236;&#x589E;&#x52A0; hVPr-GFP(+) &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684; 10 &#x500D;&#x3002;&#x5728;&#x9636;&#x6BB5; 2&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x7EF4;&#x62A4;&#x7684;&#x6269;&#x6563;&#x548C;&#x7EAF;&#x51C0;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8D28;&#x819C;&#xFF0C;&#x51C0;&#x989D; 36-fold &#x6269;&#x5F20;&#x8840;&#x7BA1;&#x8EAB;&#x4EFD; TGFbeta &#x7684;&#x5C55;&#x51FA;&#x8F6C;&#x5F55; Id1(high)VEGFR2(high)VE-cadherin(+) ephrinB2(+) &#x7684;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528; Id1 YFP hESC &#x8BB0;&#x8005;&#x884C;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A; TGFbeta &#x6291;&#x5236;&#x652F;&#x6491; Id1 hESC &#x6D3E;&#x751F;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C; Id1 &#x662F;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x6269;&#x6563;&#x548C;&#x4FDD;&#x62A4;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x627F;&#x8BFA;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5206;&#x5316;&#x548C;&#x957F;&#x671F;&#x7EF4;&#x62A4; hESC &#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x4E34;&#x5E8A;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x89C4;&#x6A21;&#x63D0;&#x4F9B;&#x65E0;&#x8840;&#x6E05;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

&#x6269;&#x5927;&#x548C;&#x7EF4;&#x6301;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6E90;&#x6027;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7531; TGFbeta &#x6291;&#x5236;&#x662F; Id1 &#x4F9D;&#x8D56;&#x3002;

Previous efforts to differentiate human embryonic stem cells (hESCs) into endothelial cells have not achieved sustained expansion and stability of vascular cells. To define vasculogenic developmental pathways and enhance differentiation, we used an endothelial cell-specific VE-cadherin promoter driving green fluorescent protein (GFP) (hVPr-GFP) to screen for factors that promote vascular commitment. In phase 1 of our method, inhibition of transforming growth factor (TGF)beta at day 7 of differentiation increases hVPr-GFP(+) cells by tenfold. In phase 2, TGFbeta inhibition maintains the proliferation and vascular identity of purified endothelial cells, resulting in a net 36-fold expansion of endothelial cells in homogenous monolayers, which exhibited a transcriptional profile of Id1(high)VEGFR2(high)VE-cadherin(+) ephrinB2(+). Using an Id1-YFP hESC reporter line, we showed that TGFbeta inhibition sustains Id1 expression in hESC-derived endothelial cells and that Id1 is required for increased proliferation and preservation of endothelial cell commitment. Our approach provides a serum-free method for differentiation and long-term maintenance of hESC-derived endothelial cells at a scale relevant to clinical application.

Expansion and maintenance of human embryonic stem cell-derived endothelial cells by TGFbeta inhibition is Id1 dependent.

Efforts ant&eacute;rieurs pour les cellules souches embryonnaires humaines (CSEh) se diff&eacute;rencient en cellules endoth&eacute;liales humaines n&#39;ont pas atteint une expansion soutenue et la stabilit&eacute; des cellules vasculaires. Pour d&eacute;finir des voies de d&eacute;veloppement vasculogenic et am&eacute;liorer la diff&eacute;renciation, nous avons utilis&eacute; un promoteur de VE-cadh&eacute;rine sp&eacute;cifiques des cellules endoth&eacute;lial prot&eacute;ine fluorescente verte (GFP) (hVPr-GFP) pour d&eacute;pister les facteurs qui favorisent l&#39;engagement vasculaire au volant. Dans la phase 1 de notre m&eacute;thode, inhibition de transforming growth factor (TGF) beta au septi&egrave;me jour de diff&eacute;renciation d&eacute;cuple les cellules hVPr-GFP(+) par. Dans la phase 2, TGF inhibition maintient la prolif&eacute;ration et l&#39;identit&eacute; vasculaire des purifi&eacute;e cellules endoth&eacute;liales, entra&icirc;nant une nette 36-fold expansion des cellules endoth&eacute;liales en monocouches homog&egrave;nes, qui pr&eacute;sentait un profil transcriptionnel des Id1(high)VEGFR2(high)VE-cadherin(+) ephrinB2(+). &Agrave; l&#39;aide d&#39;une ligne de journaliste de CSEh Id1-YFP, nous avons montr&eacute; que l&#39;inhibition TGF soutient l&#39;Id1 expression dans les cellules endoth&eacute;liales d&eacute;riv&eacute;es de CSEh et que Id1 est requise pour la prolif&eacute;ration accrue et de la pr&eacute;servation de l&#39;engagement des cellules endoth&eacute;liales. Notre approche fournit une m&eacute;thode sans s&eacute;rum pour la diff&eacute;renciation et de la maintenance &agrave; long terme des CSEh d&eacute;riv&eacute;es des cellules endoth&eacute;liales &agrave; l&#39;&eacute;chelle pertinente pour l&#39;application clinique.

Expansion et l&#39;entretien des cellules embryonnaires humaines d&eacute;riv&eacute;es de cellules souches endoth&eacute;liales par inhibition de TGF est Id1 d&eacute;pendants.

Fr&uuml;here Bem&uuml;hungen, menschlichen embryonalen Stammzellen (Zellkulturen) in Endothelzellen zu unterscheiden haben nicht nachhaltige Expansion und Stabilit&auml;t der vaskul&auml;ren Zellen erreicht. Um Vasculogenic entwicklungsbedingte Bahnen zu definieren und Differenzierung zu verbessern, haben wir eine endotheliale zellspezifische VE-Cadherin Projekttr&auml;ger fahren gr&uuml;nes fluoreszierendes Protein (GFP) (hVPr-GFP) Sie auf die Faktoren, die vaskul&auml;re Engagement f&ouml;rdern verwendet. In der ersten Phase unserer Methode erh&ouml;ht sich hVPr-GFP(+) Zellen durch Hemmung der transforming-Growth-Factor (TGF) Beta bei Tag 7 der Differenzierung verzehnfacht. In Phase 2, TGFbeta Hemmung der Proliferation und vaskul&auml;re Identit&auml;t des gereinigten Endothelzellen, wodurch eine net 36-fold Expansion der Endothelzellen in homogenen Monolayers unterh&auml;lt ausgestellt die transkriptionelle Profil von Id1(high)VEGFR2(high)VE-cadherin(+)-ephrinB2(+). &Uuml;ber eine Id1-YFP hESC-Reporter-Leitung, zeigten wir, dass TGFbeta Hemmung Id1 Ausdruck in Endothelzellen hESC abgeleitete zugezogen und Id1 f&uuml;r die Verbreitung und Erhaltung der endothelial Zelle Engagement erforderlich ist. Unser Ansatz stellt eine serumfreie Methode f&uuml;r Differenzierung und langfristige Erhaltung der hESC-abgeleitet von Endothelzellen im Ma&szlig;stab f&uuml;r klinische Anwendung.

Erweiterung und Wartung von menschlichen embryonalen Stammzellen Cell-derived Endothelzellen durch TGFbeta-Hemmung ist Id1 abh&auml;ngig.

Precedenti tentativi di differenziare cellule staminali embrionali umane (hESC) in cellule endoteliali non hanno raggiunto espansione sostenuta e la stabilit&agrave; delle cellule vascolari. Per definire percorsi di sviluppo vasculogenic e migliorare la differenziazione, abbiamo utilizzato un promotore di VE-caderina specifici delle cellule endotelio guida proteina fluorescente verde (GFP) (hVPr-GFP) a schermo per fattori che promuovono l&#39;impegno vascolare. Nella prima fase del nostro metodo, inibizione della trasformazione di fattore di crescita (TGF) beta al 7 giorno di differenziazione aumenta le cellule hVPr-GFP(+) di dieci volte. Nella fase 2, TGFbeta inibizione mantiene la proliferazione e l&#39;identit&agrave; vascolare delle cellule endoteliali purificate, risultante in un netto 36-fold espansione delle cellule endoteliali in monostrati omogenee, che espone un profilo trascrizionale di Id1(high)VEGFR2(high)VE-cadherin(+) ephrinB2(+). Utilizzando una linea di reporter hESC Id1-YFP, abbiamo dimostrato che l&#39;inibizione TGFbeta sostiene Id1 espressione in cellule endoteliali hESC-derivato e che Id1 &egrave; necessaria per aumentata proliferazione e conservazione dell&#39;impegno delle cellule endoteliali. Il nostro approccio fornisce un metodo privo di siero per la differenziazione e la manutenzione a lungo termine delle cellule endoteliali derivati hESC a scala pertinente all&#39;applicazione clinica.

Ampliamento e manutenzione di cellule embrionali umane derivate da cellule staminali endoteliali tramite inibizione TGFbeta &egrave; Id1 dipendente.

&#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE; &#xFF08;hESCs&#xFF09; &#x5185;&#x76AE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5206;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x52AA;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x62E1;&#x5927;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3092;&#x9054;&#x6210;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;Vasculogenic &#x767A;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (GFP &#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x30B3;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x3092;&#x753B;&#x9762;&#x306B;) (hVPr-GFP) &#x904B;&#x8EE2;&#x3001;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x7279;&#x7570; VE &#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x672C;&#x624B;&#x6CD5;&#x306E;&#x7B2C; 1 &#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x5316;&#x306F; 7 &#x65E5;&#x76EE;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50; (TGF) &#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7248;&#x306E;&#x5909;&#x63DB;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306B;&#x3088;&#x308B; hVPr-GFP(+) &#x7D30;&#x80DE;&#x306F; 10 &#x500D;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D5;&#x30A7;&#x30FC;&#x30BA; 2&#x3001;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30C7;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C6;&#x30A3;&#x5747;&#x8CEA;&#x306A;&#x5358;&#x5206;&#x5B50;&#x819C;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D14; 36-fold &#x62E1;&#x5927;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x7CBE;&#x88FD;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301; tgf &beta; &#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB; Id1(high)VEGFR2(high)VE-cadherin(+) ephrinB2(+) &#x306E;&#x5C55;&#x793A;&#x3002;&#x300C;Id1 YFP hESC &#x8A18;&#x8005;&#x56DE;&#x7DDA;&#x3092;&#x4F7F;&#x3063;&#x3066;&#x3001;tgf &beta; &#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6291;&#x5236;&#x304C; Id1 &#x5F0F;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x60AA;&#x540D;&#x9AD8;&#x304F;&#x7531;&#x6765;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057;&#x3001;&#x3001;Id1 &#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B3;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x4FDD;&#x5B58;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x5206;&#x5316;&#x3068;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x4FDD;&#x5B88;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x60AA;&#x540D;&#x9AD8;&#x304F;&#x7531;&#x6765;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x81E8;&#x5E8A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x8840;&#x6E05;&#x7121;&#x6599;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x62E1;&#x5F35;&#x3068;&#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x308B; tgf &beta; &#x963B;&#x5BB3;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x30F3;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;Id1 &#x4F9D;&#x5B58;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

Los esfuerzos anteriores para las c&eacute;lulas madre embrionarias humanas (hESCs) se diferencian en c&eacute;lulas endoteliales humanas no han logrado expansi&oacute;n sostenido y la estabilidad de las c&eacute;lulas vasculares. Para definir las v&iacute;as del desarrollo vasculog&eacute;nica y aumentar la diferenciaci&oacute;n, utilizamos un promotor de VE-cadherina espec&iacute;ficas de la c&eacute;lula endotelial conducir la prote&iacute;na fluorescente verde (GFP) (hVPr-GFP) para detectar factores que promueven el compromiso vascular. En la fase 1 de nuestro m&eacute;todo, inhibici&oacute;n de transformar el factor de crecimiento (TGF) beta en el d&iacute;a 7 de diferenciaci&oacute;n aumenta las c&eacute;lulas hVPr-GFP(+) por diez veces. En la fase 2, TGFbeta inhibici&oacute;n mantiene la proliferaci&oacute;n e identidad vascular de las c&eacute;lulas endoteliales purificadas, resultando en una red 36-fold expansi&oacute;n de c&eacute;lulas endoteliales en monocapas homog&eacute;neas, que exhibi&oacute; un perfil transcripcional de Id1(high)VEGFR2(high)VE-cadherin(+) ephrinB2(+). Usando una l&iacute;nea de reportero de hESC Id1-YFP, demostramos que la inhibici&oacute;n de TGFbeta sostiene Id1 expresi&oacute;n en c&eacute;lulas derivadas de c&eacute;lulas endoteliales y que Id1 es necesaria para el aumento de la proliferaci&oacute;n y preservaci&oacute;n de compromiso de la c&eacute;lula endotelial. Nuestro enfoque proporciona un m&eacute;todo libre de suero para la diferenciaci&oacute;n y mantenimiento a largo plazo de las c&eacute;lulas endoteliales derivados de c&eacute;lulas a una escala pertinente para la aplicaci&oacute;n cl&iacute;nica.

Expansi&oacute;n y mantenimiento de c&eacute;lulas endoteliales derivadas de c&eacute;lulas madre embrionarias humanas por la inhibici&oacute;n de TGFbeta es Id1 dependiente.

&#x9AA8;&#x9AD3;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (ECs) &#x662F;&#x9020;&#x8840;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x91CD;&#x7EC4;&#x975E;&#x5E38;&#x91CD;&#x8981;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5728;&#x957F;&#x671F;&#x7684;&#x9020;&#x8840;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (LT-&#x661F;) &#x7684;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x662F;&#x672A;&#x77E5;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5236;&#x5B9A;&#x4E86;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x8868;&#x660E;&#x6B27;&#x5171;&#x4F53;&#x6D3E;&#x751F; angiocrine &#x589E;&#x957F;&#x56E0;&#x7D20;&#x652F;&#x6301;&#x4F53;&#x5916;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x80B2;&#x7684;&#x6B63;&#x5B97; LT &#x661F;&#x3002;&#x5728;&#x8840;&#x6E05;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x5168;&#x5C42;&#xFF0C;ECs&#xFF0C;&#x900F;&#x8FC7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F4;&#x63A5;&#x63A5;&#x89E6;&#xFF0C;&#x523A;&#x6FC0;&#x589E;&#x91CF;&#x6269;&#x5F20;&#x7684;&#x91CD;&#x65B0;&#x586B;&#x5145; CD34(-)Flt3(-)cKit(+)Lineage(-)Sca1(+) LT &#x661F;&#xFF0C;&#x4FDD;&#x7559;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x6240;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x548C;&#x4E32;&#x884C;&#x79FB;&#x690D;&#x5316;&#x9A8C;&#x3002;&#x51F9;&#x69FD;&#x914D;&#x4F53; ECs Angiocrine &#x8868;&#x8FBE;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x6269;&#x6563;&#x5E76;&#x963B;&#x6B62;&#x6765;&#x81EA;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; Notch1/Notch2 &#x7F3A;&#xFF0C;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684; LT-&#x661F;&#x7528;&#x5C3D;&#x3002;&#x5728;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x69FD;&#x53E3;&#x8BB0;&#x8005; &#xFF08;TNR&#x3002;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;) &#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x518D;&#x751F; TNR&#x3002;Gfp(+) LT &#x661F;&#x6B63;&#x5F26; ECs &#x7EC6;&#x80DE;&#x63A5;&#x89E6;&#x4E2D;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x3002;Angiocrine&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x704C;&#x6CE8;&#x7684;&#x5E72;&#x6270;&#xFF0C;&#x79D2;&#x529F;&#x80FD;&#x53D7;&#x635F; TNR &#x7684;&#x80B2;&#x3002;Gfp(+) LT-&#x661F;&#x3002; ECs &#x5EFA;&#x7ACB;&#x4E34;&#x5E8A;&#x89C4;&#x6A21;&#x6269;&#x5927; LT &#x661F;&#x548C;&#x8702;&#x7A9D;&#x7684;&#x5E73;&#x53F0;&#x6765;&#x6807;&#x8BC6;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027; trophogens &#x542F;&#x53D1;&#x6027;&#x8840;&#x7BA1;&#x5229;&#x57FA;&#x3002;

&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x548C;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x69FD;&#x53E3;&#x7684;&#x9020;&#x8840;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x80B2;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;

Bone marrow endothelial cells (ECs) are essential for reconstitution of hematopoiesis, but their role in self-renewal of long-term hematopoietic stem cells (LT-HSCs) is unknown. We have developed angiogenic models to demonstrate that EC-derived angiocrine growth factors support in vitro self-renewal and in vivo repopulation of authentic LT-HSCs. In serum/cytokine-free cocultures, ECs, through direct cellular contact, stimulated incremental expansion of repopulating CD34(-)Flt3(-)cKit(+)Lineage(-)Sca1(+) LT-HSCs, which retained their self-renewal ability, as determined by single-cell and serial transplantation assays. Angiocrine expression of Notch ligands by ECs promoted proliferation and prevented exhaustion of LT-HSCs derived from wild-type, but not Notch1/Notch2-deficient, mice. In transgenic notch-reporter (TNR.Gfp) mice, regenerating TNR.Gfp(+) LT-HSCs were detected in cellular contact with sinusoidal ECs. Interference with angiocrine, but not perfusion, function of SECs impaired repopulation of TNR.Gfp(+) LT-HSCs. ECs establish an instructive vascular niche for clinical-scale expansion of LT-HSCs and a cellular platform to identify stem cell-active trophogens.

Endothelial cells are essential for the self-renewal and repopulation of Notch-dependent hematopoietic stem cells.

Les cellules endoth&eacute;liales de la moelle osseuse (ECs) sont essentiels pour la reconstitution de l&#39;h&eacute;matopo&iuml;&egrave;se, mais leur r&ocirc;le dans l&#39;auto-renouvellement d&#39;&agrave; long terme des cellules souches h&eacute;matopo&iuml;&eacute;tiques (CSH-LT) est inconnu. Nous avons d&eacute;velopp&eacute; des mod&egrave;les angiog&eacute;niques pour d&eacute;montrer que les facteurs de croissance d&eacute;riv&eacute;s EC angiocrine prend en charge in vitro repeuplement autorenouvellement et in vivo de la LT-CSH authentique. Dans le milieu sans s&eacute;rum/cytokine cocultures, ECs, par contact direct de cellulaire, stimul&eacute;e par augmentation incr&eacute;mentielle de repeuplement CD34(-)Flt3(-)cKit(+)Lineage(-)Sca1(+) LT-CSH, qui ont conserv&eacute; leur capacit&eacute; d&#39;autorenouvellement, tel que d&eacute;termin&eacute; par des essais de transplantation de cellule unique et en s&eacute;rie. Angiocrine expression de ligands Notch ECS favoris&eacute; la prolif&eacute;ration et emp&ecirc;ch&eacute; l&#39;&eacute;puisement du LT-CSH provenant de souris de type sauvage, mais pas Notch1/Notch2-deficient. Dans transg&eacute;nique cran-reporter (TNR.Souris GFP), r&eacute;g&eacute;n&eacute;rant TNR.GFP(+) LT-CSH ont &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute;s en contact cellulaire avec ECs sinuso&iuml;dales. Interf&eacute;rence avec l&#39;angiocrine, mais pas de perfusion, fonction des SECs avec facult&eacute;s affaiblies repopulation des TNR.GFP(+) LT-ECs autorenouveler. &eacute;tablissent un cr&eacute;neau vasculaire instructif pour l&#39;expansion des cliniques &agrave; l&#39;&eacute;chelle du LT-CSH et une plateforme cellulaire pour identifier les cellules souches actives trophogens.

Les cellules endoth&eacute;liales sont essentiels pour l&#39;autorenouvellement et le repeuplement du cran-d&eacute;pendante des cellules souches h&eacute;matopo&iuml;&eacute;tiques.

Knochenmark Endothelzellen (ECs) sind wesentliche Neubildung der Blutbildung, aber ihre Rolle in der Selbsterneuerung von langfristigen hematopoietic Stammzellen (LT-HSCs) ist unbekannt. Wir entwickelten Angiogenese-Modelle, die zeigen, dass die EG-abgeleitete Angiocrine Wachstumsfaktoren in-vitro-Selbsterneuerung und in-vivo Neuauff&uuml;llung des authentischen LT-HSCs unterst&uuml;tzen. In/Cytokine serumfreie Kokulturen befl&uuml;gelt ECs, durch zellul&auml;re Directo, inkrementelle Erweiterung des repopulating CD34(-)Flt3(-)cKit(+)Lineage(-)Sca1(+) LT-HSCs, die ihre Selbsterneuerung F&auml;higkeit, festgelegt durch einzellige und serielle Transplantation Proben aufbewahrt. Angiocrine Expression von Notch-Liganden von ECs Verbreitung gef&ouml;rdert und verhindert Ersch&ouml;pfung der LT-HSCs von Wild-Typ, aber nicht Notch1/Notch2-defizienten, M&auml;usen abgeleitet. In transgenen Kerbe-Reporter (TNR.GFP) M&auml;use, regenerierende TNR.GFP(+) LT-HSCs wurden bei zellul&auml;ren Kontakt mit sinusf&ouml;rmigen ECs festgestellt. Interferenzen mit Angiocrine, aber nicht &uuml;bergie&szlig;en, beeintr&auml;chtigte Funktion der SECs Neuauff&uuml;llung des TNR.GFP(+) LT-HSCs. ECs schaffen eine lehrreiche vaskul&auml;re Nische f&uuml;r klinische operierenden Ausbau der LT-HSCs und eine zellul&auml;re Plattform Stammzell-aktive Trophogens zu identifizieren.

Endothelzellen sind essentiell f&uuml;r die Selbsterneuerung und Auff&uuml;llen des Notch-abh&auml;ngige hematopoietic Stammzellen.

Le cellule endoteliali del midollo osseo (ECs) sono essenziali per la ricostituzione dell&#39;emopoiesi, ma il loro ruolo nell&#39;auto-rinnovamento di cellule staminali a lungo termine (LT-HSCs) &egrave; sconosciuta. Abbiamo sviluppato modelli angiogenic per dimostrare che i fattori di crescita derivati da CE angiocrine supporto ripopolamento di auto-rinnovamento e in vivo in vitro di autentica LT-HSCs. Nel siero/citochina-free cocultures, ECs, attraverso il contatto diretto cellulare, stimolato espansione incrementale di ripopolamento CD34(-)Flt3(-)cKit(+)Lineage(-)Sca1(+) LT-HSCs, che hanno mantenuto la loro capacit&agrave; di auto-rinnovamento, come determinato da dosaggi di trapianto a cella singola e seriale. Angiocrine espressione di ligandi tacca da ECs promosso proliferazione e impedito l&#39;esaurimento dei derivati da topi wild-type, ma non Notch1/Notch2-carenti, LT-HSCs. Transgenici tacca-reporter (TNR.Topi GFP), rigenerante TNR.GFP(+) LT-HSCs sono stati rilevati in contatto cellulare con ECs sinusoidale. Interferenza con angiocrine, ma non perfusione, funzione di SECs con problemi di ripopolamento del TNR.GFP(+) LT-HSCs. ECs stabilire una nicchia vascolare istruttiva per espansione clinico-scala di HSCs LT e una piattaforma cellulare per identificare cellule staminali-attivo trophogens.

Le cellule endoteliali sono essenziali per l&#39;auto-rinnovamento e il ripopolamento di cellule staminali ematopoietiche tacca-dipendente.

&#x9AA8;&#x9AC4;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE; (Ec) &#x304C;&#x9020;&#x8840;&#x3001;&#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x9020;&#x8840;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE; (LT HSCs) &#x306E;&#x81EA;&#x5DF1;&#x8907;&#x88FD;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x6027;&#x8840;&#x7BA1;&#x5206;&#x6CCC; EC &#x7531;&#x6765;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092; in vitro &#x3067;&#x306E;&#x81EA;&#x5DF1;&#x8907;&#x88FD;&#x3068; in vivo &#x518D;&#x672C;&#x683C;&#x7684;&#x306A; LT HSCs &#x306E;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7121;&#x8840;&#x6E05;/&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x8907;&#x5408;&#x306F;&#x3001;ECs&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x306E;&#x63A5;&#x89E6;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066; CD34(-)Flt3(-)cKit(+)Lineage(-)Sca1(+) LT&#x3001;HSCs &#x4F1A;&#x793E;-&#x5358;&#x4E00;&#x30BB;&#x30EB;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B7;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x306E;&#x79FB;&#x690D;&#x8A66;&#x91D1;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x81EA;&#x5DF1;&#x518D;&#x751F;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x306E;&#x518D;&#x4F5C;&#x6210;&#x306E;&#x5897;&#x5206;&#x306E;&#x62E1;&#x5F35;&#x523A;&#x6FC0;&#x3002;ECs &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30CE;&#x30C3;&#x30C1;&#x914D;&#x4F4D;&#x5B50;&#x306E;&#x6027;&#x8840;&#x7BA1;&#x5206;&#x6CCC;&#x767A;&#x73FE;&#x5897;&#x6B96;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x304C;&#x306A;&#x3044; Notch1/Notch2-&#x6B20;&#x4E4F;&#x306B;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x5F97; LT HSCs &#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x3002;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30CE;&#x30C3;&#x30C1;-&#x8A18;&#x8005; &#xFF08;TNR&#x3002;Gfp) &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3001;TNR &#x3092;&#x518D;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Gfp(+) LT HSCs &#x6B63;&#x5F26;&#x6CE2; ECs &#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x89E6;&#x304C;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5E72;&#x6E09;&#x6027;&#x8840;&#x7BA1;&#x5206;&#x6CCC;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x704C;&#x6D41;&#x3092;&#x79D2;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x518D; TNR &#x306E;&#x969C;&#x5BB3;&#x3002;Gfp(+) LT-HSCs&#x3002; ECs &#x81E8;&#x5E8A;&#x898F;&#x6A21;&#x62E1;&#x5927; LT HSCs &#x3068;&#x643A;&#x5E2F;&#x96FB;&#x8A71;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; trophogens &#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306F;&#x6709;&#x76CA;&#x306A;&#x8840;&#x7BA1;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C1;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x81EA;&#x5DF1;&#x8907;&#x88FD;&#x3068;&#x518D;&#x4F5C;&#x6210;&#x30CE;&#x30C3;&#x30C1;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x9020;&#x8840;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xACE8; &#xC218; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (ECs) &#xC870;&#xC758; &#xC7AC;&#xAD6C;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC7A5;&#xAE30; &#xC870; &#xD608; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (HSCs LT)&#xC758; &#xC790;&#xAE30; &#xAC31;&#xC2E0;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC740; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294;. Angiocrine EC &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xBCF8;&#xACA9;&#xC801;&#xC778; LT HSCs &#xCCB4; &#xC678; &#xC790;&#xAE30; &#xAC31;&#xC2E0;&#xACFC; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xCC44;&#xC6B0;&#xAE30;&#xB97C; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xC785;&#xC99D; angiogenic &#xBAA8;&#xB378; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD608; &#xCCAD;/cytokine &#xBB34;&#xB8CC; cocultures, ECs, &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCD09;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; CD34(-)Flt3(-)cKit(+)Lineage(-)Sca1(+) LT-HSCs, &#xB2E8;&#xC77C; &#xC140; &#xBC0F; &#xC9C1;&#xB82C; &#xC774;&#xC2DD; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xB41C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC790;&#xAE30; &#xAC31;&#xC2E0; &#xB2A5;&#xB825; &#xC720;&#xC9C0;&#xB97C; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xCC44;&#xC6B0;&#xAE30;&#xC758; &#xC99D;&#xBD84; &#xD655;&#xC7A5; &#xC790;&#xADF9;. ECs, &#xB178;&#xCE58; ligands&#xC758; Angiocrine &#xC2DD; &#xD655;&#xC0B0;&#xC744; &#xCD94;&#xC9C4; &#xD558; &#xACE0; LT HSCs &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; Notch1/Notch2-&#xACB0;&#xD54D;, &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C;&#xC758; &#xC18C;&#xBAA8;&#xB97C; &#xB9C9;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB178;&#xCE58; &#xAE30;&#xC790; (TNR.Gfp) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;, TNR&#xC744; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xC0DD;&#xC131; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.Gfp(+) LT HSCs &#xC815;&#xD604;&#xD30C; Ecs&#xC640; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC811;&#xCD09;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Angiocrine, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; &#xAD00;&#xB958;&#xC640; &#xAC04;&#xC12D;, &#xCD08;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC7A5;&#xC560;&#xAC00; repopulation TNR&#xC758;.Gfp(+) LT-HSCs. ECs &#xC124;&#xC815; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xC131; trophogens LT HSCs &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC758; &#xC784;&#xC0C1; &#xADDC;&#xBAA8; &#xD655;&#xC7A5;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xAD50;&#xC721;&#xC801; &#xD608;&#xAD00; &#xD2C8;&#xC0C8;.

&#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xC790;&#xAE30; &#xAC31;&#xC2E0; &#xBC0F; &#xB178;&#xCE58; &#xC885;&#xC18D; &#xC870; &#xD608; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; repopulation &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Las c&eacute;lulas endoteliales de la m&eacute;dula &oacute;sea (ECs) son esenciales para la reconstituci&oacute;n de la hematopoyesis, pero su papel en la renovaci&oacute;n de las c&eacute;lulas madre hematopoy&eacute;ticas a largo plazo (LT-HSCs) es desconocido. Hemos desarrollado modelos angiog&eacute;nicos para demostrar que factores de crecimiento derivados de CE angiocrine apoyo in vitro repoblaci&oacute;n de auto renovaci&oacute;n y en vivo de aut&eacute;nticas LT-HSCs. En cocultures libre de suero/citocinas, ECs, a trav&eacute;s de contacto celular directo, estimulan expansi&oacute;n incremental de repoblaci&oacute;n CD34(-)Flt3(-)cKit(+)Lineage(-)Sca1(+) LT-HSCs, que conservan su capacidad de auto renovaci&oacute;n, seg&uacute;n lo determinado por an&aacute;lisis de trasplante unicelulares y serial. Angiocrine expresi&oacute;n de ligandos de muesca por ECs promueve la proliferaci&oacute;n y evitar agotamiento de LT-HSCs derivado de ratones de tipo salvaje, pero no Notch1/Notch2-deficiente. En transg&eacute;nico muesca-periodista (TNR.Ratones de GFP), regeneraci&oacute;n TNR.GFP(+) LT-HSCs fueron detectadas en contacto celular con ECs sinusoidales. Interferencia con angiocrine, pero no de perfusi&oacute;n, funci&oacute;n de segundos deteriorada repoblaci&oacute;n de TNR.GFP(+) LT-HSCs. ECs establecen un nicho vascular instructivo para la expansi&oacute;n de la escala cl&iacute;nica de LT-HSCs y una plataforma celular para identificar c&eacute;lulas madre activa trophogens.

Las c&eacute;lulas endoteliales son esenciales para la auto renovaci&oacute;n y repoblaci&oacute;n de las c&eacute;lulas madre hematopoy&eacute;ticas muesca-dependiente.

&#x57FA;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x304C;&#x4E0D;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x591A;&#x52D5;&#x6027;&#x306E; mTORC1&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x6210;&#x9577;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x306B; &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7CBE;&#x539F;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE; &#xFF08;Spc&#xFF09; &#x3092;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x7CFB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x306E; mTORC1 mTORC1 &#x304B;&#x3089;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C1;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x3092;&#x4F1D;&#x9054;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3078;&#x306E;&#x5426;&#x5B9A;&#x7684;&#x306A;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C9;&#x30D0;&#x30C3;&#x30AF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x7DAD;&#x6301;&#x3092;&#x640D;&#x306A;&#x3046;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;Plzf&#x3001;SPC &#x306E;&#x7DAD;&#x6301;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B; Spc &#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x308B;&#x3001;mTORC1 &#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7570;&#x5E38; mTORC1 &#x6D3B;&#x6027;&#x5316; Plzf(-/-) spc SPC &#x81EA;&#x5DF1;&#x66F4;&#x65B0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066; GDNF &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x8CA0;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C9;&#x30D0;&#x30C3;&#x30AF;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50; GDNF &#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Plzf mTORC1 &#x963B;&#x5BB3;&#x5264; Redd1 &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; mTORC1 &#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306B;&#x53CD;&#x5BFE;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F; mTORC1 Plzf &#x6A5F;&#x80FD;&#x7DAD;&#x6301;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x62B5;&#x6297;&#x5668;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7CBE;&#x539F;&#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3001;GDNF &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; mTORC1 &#x304B;&#x3089;&#x8CA0;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C9;&#x30D0;&#x30C3;&#x30AF; SPC &#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3068;&#x81EA;&#x5DF1;&#x8907;&#x88FD;&#x306E;&#x30D0;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x3068;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Plzf mTORC1 &#x306B;&#x53CD;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x81EA;&#x5DF1;&#x8907;&#x88FD;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

MTORC1, &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5;&#xC758; &#xD575;&#xC2EC; &#xC911;&#xC7AC;&#xC790;&#xC758; &#xACFC;&#xB2E4; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC740; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC18C;&#xBAA8;&#xAC00; &#xB048;&#xB2E4;. Spermatogonial &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; (&#xAD6D;&#xACFC;)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xADF8; mTORC1 &#xC190;&#xC0C1; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xC9C0; &#xAD00;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; transduce &#xC2E0;&#xD638; &#xD2C8;&#xC0C8; &#xD30C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; Mtorc1&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xD53C;&#xB4DC;&#xBC31;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCC3E;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xB294; Plzf, SPC &#xC720;&#xC9C0; &#xAD00;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; &#xBD80;&#xC871; &#xAD6D;&#xACFC;, mTORC1 &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xAC15;&#xD654; &#xD588;&#xB2E4;. Plzf(-/-) &#xAD6D;&#xACFC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD0C8; &#xC120; mTORC1 &#xD65C;&#xC131;&#xD654; GDNF GDNF &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xD53C;&#xB4DC;&#xBC31;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; SPC &#xC790;&#xCCB4; &#xAC31;&#xC2E0;, &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD55C;&#xB2E4;. Plzf Redd1 mTORC1 &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558; &#xC5EC; mTORC1 &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xBC18;&#xB300; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC; spermatogonial &#xD480;&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xAD00;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC800;&#xD56D;&#xAE30;&#xB85C; mTORC1 Plzf &#xAE30;&#xB2A5; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD30C;&#xC545; &#xD558; &#xACE0;&#xAC00; &#xBA74; Mtorc1&#xC5D0;&#xC11C; GDNF &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xD53C;&#xB4DC;&#xBC31; &#xC790;&#xAE30; &#xAC31;&#xC2E0; SPC &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xADE0;&#xD615; &#xBAA8;&#xB378; &#xC81C;&#xC548;.

Plzf mTORC1 &#xBC18;&#xB300; &#xC5EC; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC2DC; &#xC870;&#xB294; &#xC790;&#xAE30; &#xAC31;&#xC2E0;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Hiperactividad de mTORC1, un mediador clave de crecimiento de la c&eacute;lula, conduce al agotamiento de la c&eacute;lula de v&aacute;stago, aunque mal se definen los mecanismos subyacentes. Usando las c&eacute;lulas espermatogonias progenitoras (CCP) como un modelo de sistema, mostramos que mtorc1 deteriora el mantenimiento de c&eacute;lulas madre por una contrarreacci&oacute;n de mTORC1 a receptores necesaria para transducir se&ntilde;ales derivadas de nicho. Nos encontrar SPCs falta Plzf, un factor de transcripci&oacute;n esencial para el mantenimiento de la SPC, han mejorado la actividad mTORC1. Activaci&oacute;n aberrante mTORC1 en Plzf(-/-) CCP inhibe su respuesta al GDNF, un factor de crecimiento cr&iacute;tico para SPC auto-renovaci&oacute;n, trav&eacute;s de retroalimentaci&oacute;n negativa en el nivel de los receptores GDNF. PLZF se opone a la actividad de mTORC1 mediante la inducci&oacute;n de la expresi&oacute;n del inhibidor de la mTORC1 Redd1. As&iacute;, identificamos la interacci&oacute;n funcional de mTORC1-Plzf como un re&oacute;stato cr&iacute;tico para el mantenimiento de la piscina de las espermatogonias y proponer un modelo por el que la retroalimentaci&oacute;n negativa de mTORC1 al receptor de GDNF equilibra crecimiento SPC con autorenovaci&oacute;n.

PLZF regula del germline progenitor auto-renovaci&oacute;n por oponerse a mTORC1.

&#x591A;&#x52A8;&#x7684; mTORC1&#xFF0C;&#x5173;&#x952E;&#x8C03;&#x89E3;&#x4EBA;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8017;&#x5C3D;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x5DEE;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x57FA;&#x672C;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x7CBE;&#x539F;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE; (SPCs) &#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x79CD;&#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5; mTORC1 mTORC1 &#x4E0E;&#x6362;&#x80FD;&#x5668;&#x5229;&#x57FA;&#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x7ED3;&#x5408;&#x7684;&#x8D1F;&#x9762;&#x53CD;&#x9988;&#x7684;&#x635F;&#x5BB3;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EF4;&#x6301;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; SPCs &#x7F3A;&#x4E4F; Plzf&#xFF0C;SPC &#x7EF4;&#x62A4;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x52A0;&#x5F3A;&#x4E86; mTORC1 &#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x5728; Plzf(-/-) SPCs &#x5F02;&#x5E38; mTORC1 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x6291;&#x5236;&#x53CA;&#x5176;&#x5BF9; GDNF&#xFF0C;SPC &#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E00;&#x7EA7;&#x7684; GDNF &#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x8D1F;&#x9762;&#x53CD;&#x9988;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x54CD;&#x5E94;&#x3002;Plzf &#x8BF1;&#x5BFC; Redd1 mTORC1 &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x8868;&#x8FBE;&#x53CD;&#x5BF9; mTORC1 &#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A; mTORC1 Plzf &#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x4E92;&#x52A8;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x7EF4;&#x62A4;&#x5173;&#x952E;&#x963B;&#x5668;&#x7CBE;&#x539F;&#x6C60;&#x7684;&#x5E76;&#x5EFA;&#x8BAE; mTORC1 GDNF &#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x8D1F;&#x9762;&#x53CD;&#x9988;&#x5373;&#x4F59;&#x989D; SPC &#x589E;&#x957F;&#x4E0E;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;

Plzf &#x7531;&#x53CD;&#x5BF9; mTORC1 &#x8C03;&#x8282;&#x751F;&#x6B96;&#x7956;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x3002;

Hyperactivity of mTORC1, a key mediator of cell growth, leads to stem cell depletion, although the underlying mechanisms are poorly defined. Using spermatogonial progenitor cells (SPCs) as a model system, we show that mTORC1 impairs stem cell maintenance by a negative feedback from mTORC1 to receptors required to transduce niche-derived signals. We find that SPCs lacking Plzf, a transcription factor essential for SPC maintenance, have enhanced mTORC1 activity. Aberrant mTORC1 activation in Plzf(-/-) SPCs inhibits their response to GDNF, a growth factor critical for SPC self-renewal, via negative feedback at the level of the GDNF receptor. Plzf opposes mTORC1 activity by inducing expression of the mTORC1 inhibitor Redd1. Thus, we identify the mTORC1-Plzf functional interaction as a critical rheostat for maintenance of the spermatogonial pool and propose a model whereby negative feedback from mTORC1 to the GDNF receptor balances SPC growth with self-renewal.

Plzf regulates germline progenitor self-renewal by opposing mTORC1.

Hyperactivit&eacute; des mTORC1, un m&eacute;diateur cl&eacute; de la croissance cellulaire, m&egrave;ne &agrave; la d&eacute;pl&eacute;tion des cellules souches, bien que les m&eacute;canismes sous-jacents sont mal d&eacute;finis. &Agrave; l&#39;aide de cellules souches spermatogoniales (CCP) comme syst&egrave;me mod&egrave;le, nous montrons que mTORC1 alt&egrave;re la maintenance des cellules souches par une r&eacute;troaction n&eacute;gative de mTORC1 aux r&eacute;cepteurs n&eacute;cessaires pour transmettre les signaux d&eacute;riv&eacute;s de niche. Nous trouver que CCP manque Plzf, un facteur de transcription essentiel pour l&#39;entretien de la CPS, ont am&eacute;lior&eacute; l&#39;activit&eacute; mTORC1. Activation de mTORC1 aberrants dans Plzf(-/-) CMN inhibe leur r&eacute;ponse &agrave; GDNF, un facteur de croissance essentiel pour SPC autorenouvellement, par l&#39;interm&eacute;diaire de r&eacute;troaction n&eacute;gative au niveau du r&eacute;cepteur GDNF. Plzf s&#39;oppose &agrave; l&#39;activit&eacute; mTORC1 en induisant l&#39;expression de l&#39;inhibiteur de mTORC1 Redd1. Donc, nous identifions l&#39;interaction fonctionnelle de mTORC1-Plzf comme un rh&eacute;ostat critique pour l&#39;entretien de la piscine de spermatogonies et proposer un mod&egrave;le selon lequel la r&eacute;troaction n&eacute;gative de mTORC1 au r&eacute;cepteur GDNF soldes croissance SPC avec l&#39;auto-renouvellement.

Plzf r&eacute;gule germline prog&eacute;nitrices autorenouvellement en s&#39;opposant au mTORC1.

Hyperaktivit&auml;t der mTORC1, ein wichtiger Vermittler von Zellwachstum, f&uuml;hrt zu Stammzellen Ersch&ouml;pfung, obwohl die zugrunde liegenden Mechanismen schlecht definiert sind. Anhand Spermatogonien Vorl&auml;uferzellen (SPCs) als Modellsystem zeigen wir, dass diese mTORC1 Stammzell-Wartung durch ein negatives Feedback von mTORC1 an Rezeptoren ben&ouml;tigt, um die Nische abgeleitete Signale zur&uuml;ckwirken beeintr&auml;chtigt. Wir finden, die ESZ fehlt Plzf, einen Transkriptionsfaktor f&uuml;r SPC-Wartung, mTORC1 Aktivit&auml;t verbessert haben. Aberrant mTORC1 Aktivierung in Plzf(-/-) F&ouml;rderzentren hemmt ihre Reaktion auf GDNF, als Wachstumsfaktor f&uuml;r SPC Selbsterneuerung, &uuml;ber negatives Feedback auf der Ebene des Rezeptors GDNF entscheidend. Plzf gegen mTORC1 Aktivit&auml;t durch Ausdruck der mTORC1-Inhibitor Redd1 induzieren. So wir identifizieren die mTORC1-Plzf funktionelle Interaktion als eine kritische Rheostat f&uuml;r die Wartung der Spermatogonien Pool und schlagen ein Modell, wobei Negative R&uuml;ckkopplung von mTORC1 an den Rezeptor GDNF SPC Wachstum mit Selbsterneuerung gleicht.

Plzf regelt Germline Stammvater Selbsterneuerung abzielende mTORC1.

Iperattivit&agrave; di mTORC1, un mediatore chiave della crescita cellulare, porta alla deplezione delle cellule staminali, anche se i meccanismi sottostanti sono mal definiti. Utilizzando cellule progenitrici spermatogoni (SPCs) come sistema di modello, mostriamo che mTORC1 altera la manutenzione della cellula formativa di un feedback negativo da mTORC1 ai recettori necessari per trasdurre segnali derivati di nicchia. Noi che trovare SPCs manca Plzf, un fattore di trascrizione essenziale per la manutenzione SPC, sono migliorati mTORC1 attivit&agrave;. MTORC1 aberrante attivazione in Plzf(-/-) SPCs inibisce la loro risposta a GDNF, un fattore di crescita fondamentale per SPC self-renewal, tramite feedback negativo a livello del recettore GDNF. Plzf oppone mTORC1 attivit&agrave; inducendo espressione dell&#39;inibitore mTORC1 Redd1. Cos&igrave;, individuiamo l&#39;interazione funzionale mTORC1-Plzf come un reostato critico per la manutenzione della piscina spermatogoni e proporre un modello per cui feedback negativo da mTORC1 al recettore GDNF saldi crescita SPC con auto-rinnovamento.

Plzf regola germinale progenitrice self-renewal opponendosi mTORC1.

&#x751F;&#x6B96;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#xFF1A; &#x4F53;&#x5916;&#x7CBE;&#x5B50;&#x6210;&#x719F;&#x3002;

Reproductive biology: In vitro sperm maturation.

Biologie de la reproduction : la maturation des spermatozo&iuml;des In vitro.

Reproduktionsbiologie: In-vitro Spermien Reifung.

Biologia riproduttiva: maturazione In vitro degli spermatozoi.

&#x751F;&#x6B96;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;: In vitro &#x7CBE;&#x5B50;&#x6210;&#x719F;&#x3002;

&#xC0DD;&#xC2DD; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;: &#xCCB4; &#xC678; &#xC815;&#xC790; &#xC131;&#xC219;.

Biolog&iacute;a de la reproducci&oacute;n: maduraci&oacute;n In vitro de esperma.

&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50; Sox2 &#x4FDD;&#x6301;&#x65E9;&#x671F;&#x80DA;&#x80CE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x591A;&#x6F5C;&#x80FD;&#xFF0C;&#x5E76;&#x89C4;&#x5B9A;&#x5728;&#x80CE;&#x513F;&#x53D1;&#x80B2;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;Sox2 &#x662F;&#x5426;&#x7EE7;&#x7EED;&#x6210;&#x4EBA;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x4ECD;&#x7136;&#x662F;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x672A;&#x77E5;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x5C55;&#x793A; Sox2 &#x6807;&#x5FD7;&#x7740;&#x6210;&#x4EBA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51E0;&#x79CD;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x53CA;&#x5176;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E0D;&#x4EE5;&#x524D;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x80C3;&#x3001; &#x5BAB;&#x9888;&#x3001; &#x809B;&#x95E8;&#x3001; &#x777E;&#x4E38;&#x3001; &#x955C;&#x5934;&#x548C;&#x591A;&#x4E2A;&#x817A;&#x4F53;&#x3002;&#x9057;&#x4F20;&#x8C31;&#x7CFB;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x548C;&#x79FB;&#x690D;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x660E; Sox2 &#x8868;&#x793A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0D;&#x65AD;&#x7ED9;&#x6210;&#x719F;&#x8BB0;&#x5F55;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x548C;&#x5206;&#x5316;&#x6F5C;&#x80FD;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C7B;&#x578B;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5185;&#x7684;&#x4E0A;&#x5347;&#x3002;&#x6309;&#x7167;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;Sox2(+) &#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E2D;&#x7684;&#x6D88;&#x878D;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7A33;&#x6001;&#x548C;&#x81F4;&#x547D;&#x6027;&#x7684;&#x7834;&#x574F;&#x3002;&#x53D1;&#x5C55;&#x547D;&#x8FD0;&#x6620;&#x5C04;&#x663E;&#x793A; Sox2(+) &#x6210;&#x4EBA;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6765;&#x81EA;&#x80CE;&#x513F; Sox2(+) &#x7EC4;&#x7EC7;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x786E;&#x5B9A; Sox2 &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x4E2D;&#x65E0;&#x6570;&#x7684;&#x6210;&#x4EBA;&#x80DA;&#x548C;&#x5916;&#x80DA;&#x5C42;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F66;&#x53A2;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x6B63;&#x5E38;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x518D;&#x751F;&#x548C;&#x751F;&#x5B58;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;

Sox2(+) &#x6210;&#x4EBA;&#x5E72;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x518D;&#x751F;&#x548C;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x751F;&#x5B58;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;

The transcription factor Sox2 maintains the pluripotency of early embryonic cells and regulates the formation of several epithelia during fetal development. Whether Sox2 continues to play a role in adult tissues remains largely unknown. We show here that Sox2 marks adult cells in several epithelial tissues where its expression has not previously been characterized, including the stomach, cervix, anus, testes, lens, and multiple glands. Genetic lineage tracing and transplantation experiments demonstrate that Sox2-expressing cells continuously give rise to mature cell types within these tissues, documenting their self-renewal and differentiation potentials. Consistent with these findings, ablation of Sox2(+) cells in mice results in a disruption of epithelial tissue homeostasis and lethality. Developmental fate mapping reveals that Sox2(+) adult stem cells originate from fetal Sox2(+) tissue progenitors. Thus, our results identify Sox2 expression in numerous adult endodermal and ectodermal stem cell compartments, which are critical for normal tissue regeneration and survival.

Sox2(+) adult stem and progenitor cells are important for tissue regeneration and survival of mice.

Le facteur de transcription Sox2 maintient la pluripotence des premi&#xE8;res cellules embryonnaires et r&#xE9;gule la formation de l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium pendant le d&#xE9;veloppement f&#x153;tal de plusieurs. Que Sox2 continue de jouer un r&#xF4;le dans les tissus adultes reste largement inconnu. Nous montrons ici que Sox2 marque cellules adultes dans plusieurs tissus &#xE9;pith&#xE9;liaux o&#xF9; son expression n&#x26;#39;a pas encore &#xE9;t&#xE9; caract&#xE9;ris&#xE9;s, y compris l&#x26;#39;estomac, du col ut&#xE9;rin, l&#x26;#39;anus, des testicules, la lentille, et les glandes multiples. G&#xE9;n&#xE9;tiques lign&#xE9;e des exp&#xE9;riences de tra&#xE7;age et de la transplantation d&#xE9;montrer que Sox2 cellules exprimant en permanence donner lieu &#xE0; des types de cellules matures au sein de ces tissus, de documenter leur auto-renouvellement et de diff&#xE9;renciation potentiels. Conform&#xE9;ment &#xE0; ces conclusions, l&#x26;#39;ablation de la Sox2 (+) des cellules dans les r&#xE9;sultats des souris dans une perturbation de l&#x26;#39;hom&#xE9;ostasie du tissu &#xE9;pith&#xE9;lial et la l&#xE9;talit&#xE9;. Cartographie sort de d&#xE9;veloppement r&#xE9;v&#xE8;le que SOX2 (+) des cellules souches adultes proviennent de prog&#xE9;niteurs SOX2 tissus f&#x153;taux (+). Ainsi, nos r&#xE9;sultats mettent en &#xE9;vidence l&#x26;#39;expression Sox2 chez l&#x26;#39;adulte de nombreux compartiments et endodermique ectodermiques de cellules souches, qui sont essentiels pour la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration des tissus normaux et la survie.

Sox2 (+) des adultes cellules souches et prog&#xE9;nitrices sont importants pour la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration tissulaire et la survie des souris

Der Transkriptionsfaktor Sox2 unterh&auml;lt die Pluripotenz der fr&uuml;hen embryonalen Zellen und reguliert die Bildung von mehreren Epithelien w&auml;hrend der fetalen Entwicklung. Ob Sox2 weiterhin eine Rolle im Gewebe Erwachsener ist weitgehend unbekannt. Wir zeigen hier, dass Sox2 adulten Zellen in mehrere epitheliale Gewebe markiert wo seinen Ausdruck nicht zuvor, einschlie&szlig;lich Magen, Geb&auml;rmutterhals, Anus, Hoden, Objektiv und mehrere Dr&uuml;sen charakterisiert worden ist. Genetische Abstammung Ablaufverfolgung und Transplantation Experimente zeigen, dass Sox2 Ausdr&uuml;cken Zellen ununterbrochen Anlass zu Zelltypen in diesen Geweben, dokumentieren ihre Selbsterneuerung und Differenzierung Potentiale &auml;ltere geben. Im Einklang mit diesen Erkenntnissen, f&uuml;hrt eine St&ouml;rung der Hom&ouml;ostase Epithelgewebe und Letalit&auml;t Ablation von Sox2(+) Zellen in M&auml;usen. Entwicklungsbiologie Schicksal Zuordnung zeigt, dass die fetale Sox2(+) Gewebe Vorfahre Sox2(+) adulter Stammzellen stammen. So identifizieren unsere Ergebnisse Sox2 Ausdruck in zahlreichen adulte Stammzelle von endodermalen und ektodermale F&auml;cher, die f&uuml;r normale Geweberegeneration und &Uuml;berleben von entscheidender Bedeutung sind.

Sox2(+) adulter Stammzellen und Vorl&auml;uferzellen Zellen sind wichtig f&uuml;r die Regeneration der Gewebe und &Uuml;berleben der M&auml;use.

Il fattore di trascrizione Sox2 mantiene la pluripotenza delle cellule dell&#39;embrione precoce e regola la formazione di diversi epiteli durante lo sviluppo fetale. Se Sox2 continua a svolgere un ruolo nei tessuti adulti rimane in gran parte sconosciuto. Mostriamo qui che Sox2 segna le cellule adulte in diversi tessuti epiteliali dove sua espressione &egrave; non precedentemente stata caratterizzata, tra cui lo stomaco, della cervice, ano, testicoli, lente e ghiandole multiple. Lignaggio genetico analisi ed trapianto esperimenti dimostrano che le cellule che esprimono Sox2 continuamente danno luogo a maturare i tipi di cella all&#39;interno di questi tessuti, documentando le loro potenzialit&agrave; di auto-rinnovamento e differenziazione. Coerentemente con questi risultati, l&#39;ablazione delle cellule Sox2(+) in topi provoca una perturbazione dell&#39;omeostasi del tessuto epiteliale e letalit&agrave;. Mappatura Developmental destino rivela che le cellule staminali adulte Sox2(+) provengono da progenitori di tessuto fetale Sox2(+). Cos&igrave;, i nostri risultati identificano Sox2 espressione in numerosi scomparti di cellule staminali adulte endodermico ed ectodermica, che sono fondamentali per la sopravvivenza e la rigenerazione del tessuto normale.

Le cellule staminali e progenitrici adulte SOX2(+) sono importanti per la rigenerazione dei tessuti e la sopravvivenza dei topi.

&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;Sox2&#x306F;&#x521D;&#x671F;&#x80DA;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057;&#x3001;&#x80CE;&#x5150;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x4E2D;&#x306B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x4E0A;&#x76AE;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x6210;&#x4F53;&#x7D44;&#x7E54;&#x3067;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x7D9A;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x306F;&#x4F9D;&#x7136;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x80C3;&#x3001;&#x5B50;&#x5BAE;&#x9838;&#x90E8;&#x3001;&#x809B;&#x9580;&#x3001;&#x7CBE;&#x5DE3;&#x3001;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x817A;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x305D;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D44;&#x7E54;&#x3067;&#x6210;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AF;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x3053;&#x3053;&#x306B;&#x793A;&#x3059;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x7CFB;&#x7D71;&#x306E;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B9;&#x3068;&#x79FB;&#x690D;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Sox2&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306B;&#x81EA;&#x5DF1;&#x8907;&#x88FD;&#x3068;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x96FB;&#x4F4D;&#x3092;&#x8A18;&#x9332;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x5185;&#x3067;&#x6210;&#x719F;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x3092;&#x751F;&#x3058;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x6052;&#x5E38;&#x6027;&#x3068;&#x81F4;&#x6B7B;&#x6027;&#x306E;&#x7834;&#x58CA;&#x3067;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3067;Sox2&#x306E;&#xFF08;+&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A2;&#x30D6;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x767A;&#x9054;&#x904B;&#x547D;&#x306E;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D4;&#x30F3;&#x30B0;&#x304C;Sox2&#x306E;&#xFF08;+&#xFF09;&#x6210;&#x4F53;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x80CE;&#x5150;&#x306E;Sox2&#x306E;&#xFF08;+&#xFF09;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x7531;&#x6765;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x6B63;&#x5E38;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x3068;&#x751F;&#x5B58;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x3068;&#x5916;&#x80DA;&#x8449;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Sox2&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Sox2&#x306E;&#xFF08;+&#xFF09;&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x7D44;&#x7E54;&#x518D;&#x200B;&#x200B;&#x751F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x306B;&#x3068;&#x3063;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;

&#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778; Sox2 &#xCD08;&#xAE30; &#xBC30;&#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; pluripotency &#xC720;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xD0DC;&#xC544;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Sox2 &#xC131;&#xC778; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xACC4;&#xC18D; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C0;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC5EC;&#xAE30; Sox2 &#xC5B4;&#xB514; &#xADF8; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xC9C0; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xC704;&#xC7A5;, &#xC790; &#xAD81; &#xACBD;&#xBD80;, &#xD56D;&#xBB38;, &#xACE0;&#xD658;, &#xB80C;&#xC988;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBD84; &#xBE44; &#xB4F1; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC131;&#xC778; &#xC140; &#xD45C;&#xC2DC; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804; &#xACC4;&#xBCF4; &#xCD94;&#xC801; &#xBC0F; &#xC774;&#xC2DD; &#xC2E4;&#xD5D8; Sox2 &#xD45C;&#xD604; &#xC140; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xC2B9; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC790;&#xCCB4; &#xAC31;&#xC2E0;&#xACFC; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825; &#xBB38;&#xC11C;&#xD654; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC870;&#xC9C1; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615; &#xC131;&#xC219; &#xD558; &#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58;, &#xC808;&#xC81C; &#xC950;&#xC5D0; Sox2(+) &#xC140;&#xC758; &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC870;&#xC9C1; &#xBC0F; &#xCE58; &#xC0AC; &#xC728;&#xC758; &#xC911;&#xB2E8; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC6B4;&#xBA85; &#xB9E4;&#xD551; Sox2(+) &#xC131;&#xC778; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xD0DC;&#xC544; Sox2(+) &#xC870;&#xC9C1; progenitors&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xC791;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC815;&#xC0C1; &#xC870;&#xC9C1; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xC874;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC218;&#xB9CE;&#xC740; &#xC131;&#xC778; endodermal&#xACFC; ectodermal &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xAD6C;&#xD68D;&#xC5D0; Sox2 &#xC2DD;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Sox2(+) &#xC131;&#xC778; &#xC904;&#xAE30;&#xC640; &#xC870;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xC870;&#xC9C1; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xC950;&#xC758; &#xC0DD;&#xC874;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;.

El factor de transcripci&#xF3;n Sox2 mantiene la pluripotencialidad de las c&#xE9;lulas embrionarias tempranas y regula la formaci&#xF3;n de los epitelios de varios durante el desarrollo fetal. Si Sox2 sigue desempe&#xF1;ando un papel en los tejidos adultos sigue siendo desconocida. Mostramos aqu&#xED; que Sox2 marca las c&#xE9;lulas adultas en varios tejidos epiteliales, donde su expresi&#xF3;n no ha sido previamente caracterizados, incluyendo el est&#xF3;mago, cuello uterino, el ano, los test&#xED;culos, el cristalino y varias gl&#xE1;ndulas. Linaje gen&#xE9;tico experimentos de rastreo y el trasplante de demostrar que Sox2-las c&#xE9;lulas que expresan de forma continua da lugar a tipos de c&#xE9;lulas maduras en estos tejidos, la documentaci&#xF3;n de su auto-renovaci&#xF3;n y diferenciaci&#xF3;n de los potenciales. De acuerdo con estos hallazgos, la ablaci&#xF3;n de Sox2 (+) las c&#xE9;lulas en ratones resulta en una alteraci&#xF3;n de la homeostasis del tejido epitelial y la letalidad. Asignaci&#xF3;n de destino de desarrollo revela que Sox2 (+) las c&#xE9;lulas madre adultas se originan en los tejidos fetales progenitores Sox2 (+). Por lo tanto, nuestros resultados identifican la expresi&#xF3;n de Sox2 en el adulto y los compartimientos numerosos endod&#xE9;rmico ectod&#xE9;rmica de c&#xE9;lulas madre, que son fundamentales para la regeneraci&#xF3;n de tejido normal y la supervivencia.

Marco Seandel

Department of Surgery

Weill Cornell Medical College

Serial Enrichment of Spermatogonial Stem and Progenitor Cells (SSCs) in Culture for Derivation of Long-term Adult Mouse SSC Lines

Marco Seandel

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Surgery

Weill Cornell Medical College

Serial Enrichment of Spermatogonial Stem and Progenitor Cells (SSCs) in Culture for Derivation of Long-term Adult Mouse SSC Lines

Department of Surgery