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Dieses neuartige Protokoll beinhaltet die Quantifizierung des kardiovaskulären Verkalkungsverlaufs aus seriellen Mikro-Positronen-Emissions-Tomographie (PET)/Mikro-Computertomographie (CT)-Bildern bei kleinen Versuchstieren.
Die Mikro-Positronen-Emissions-Tomographie (PET) und die Mikro-Computertomographie (CT) sind leistungsfähige und ideale Forschungsinstrumente, um das Fortschreiten der kardiovaskulären Verkalkung zu verfolgen. Aufgrund ihrer nicht-invasiven Natur können kleine Forschungstiere zu mehreren Zeitpunkten abgebildet werden. Die Herausforderung liegt in der genauen Quantifizierung der kardiovaskulären Verkalkung. Hier stellen wir ein Protokoll zur Verfügung, das Bilder aus den späteren Krankheitsstadien als Vorlage verwendet, um das Fortschreiten der kardiovaskulären Verkalkung in Längsschnittstudien genau zu quantifizieren. Das Protokoll umfasst 1) die Ausrichtung des Brustbereichs in mehreren Bildern desselben Tieres während einer Längsschnittstudie als ersten Schritt, 2) die Definition einer Region of Interest (ROI) innerhalb des Herzens und der Aorta an der Stelle größerer Kalziumablagerungen, die in späteren Bildern sichtbar werden, und 3) die gleichzeitige Segmentierung und Quantifizierung von Kalziumablagerungen über alle Bilder, die während der Längsschnittstudie aufgenommen wurden. Diese optimierte Methode verbessert die Genauigkeit der Bildanalyse bei der Verfolgung des Fortschreitens der kardiovaskulären Verkalkung, indem sie die Präzision der ROI-Definition verbessert und die Variabilität reduziert, die mit früheren Techniken verbunden ist, die einzelne Scans unabhängig voneinander analysieren.
Herz-Kreislauf-Erkrankungen sind eine der weltweit führenden Ursachen für Morbidität und Mortalität und erfordern eine gründliche Untersuchung, um ihre Mechanismen aufzudecken und wirksame präventive und therapeutische Strategien zu entwickeln. Die Verkalkung der Koronararterien (CAC) wird von Experten auf diesem Gebiet weithin als prädiktiver Faktor für Herz-Kreislauf-Erkrankungen anerkannt, der das Risiko einer kardiovaskulären Mortalität signifikant erhöht 1,2,3,4,5. Mik....
Die repräsentativen Bilder zeigen eine weibliche Apolipoprotein-E-defiziente (Apoe-/-) Maus. Die Versuchsprotokolle wurden vom Institutional Animal Care and Use Committee der University of California, Los Angeles, überprüft und genehmigt.
1. Scannen von Tieren
Analysemethoden
Dieser Abschnitt veranschaulicht die erfolgreiche Auslastung durch repräsentative Ergebnisse. Hier zeigen wir das kombinierte microPET/microCT-Bild einer einzelnen Maus, die im Alter von 15 und 18 Monaten gescannt wurde, nachdem sie im Alter von 12 bis 14 Monaten einer westlichen Diät (21 % Fett, 0,2 % Cholesterin) unterzogen wurde. Gemäß den Protokollabschnitten 2-8 zur Quantifizierung der Verkalkung maßen vier unabhängige Forscher getrennt vone.......
Dieses neuartige Protokoll ist ein verbesserter Ansatz zur Quantifizierung der kardiovaskulären Verkalkung. Aufgrund des nicht-invasiven Charakters der Bildgebung können longitudinale microCT-Bilder aufgenommen werden, um das Fortschreiten der kardiovaskulären Verkalkung bei Kleintieren zu verfolgen. Obwohl microCT-Bilder allein das Fortschreiten des Kalziumgehalts zeigen können, können microPET-Bilder, sofern verfügbar, zusätzliche Informationen liefern, insbesondere die verbesse.......
Die Autoren haben keine Interessenkonflikte anzugeben.
Wir danken allen Mitgliedern des UCLA Crump Preclinical Imaging Technology Center für ihre Hilfe bei der Datenerfassung und -verarbeitung sowie bei der Wartung von Geräten und Infrastruktur. Wir danken Jeffrey Collins für seine Hilfe beim Betrieb des Zyklotrons und der 18F-NaF-Synthese. Wir danken der UCLA Statistical Consulting Group für ihre Hilfe bei der statistischen Analyse. Diese Arbeit wird unterstützt durch den NIH Cancer Center Support Grant (2 P30 CA016042-44 bis MT) und die National Institutes of Health, Heart, Lung, and Blood Institute (HL137647 und HL151391 bis YT und LLD). Der GNEXT PET/CT-Scanner wurde durch ....
Name | Company | Catalog Number | Comments |
0.5 cc Sterile Insulin Syringes | Exel International | #26028 | Used for IV injection of 18F-NaF PET Tracer |
18F-NaF PET Tracer | CNSI Cyclotron | ||
Biorender | Biorender | Used for figure 1 | |
Female Apoe-/- mouse | Jackson Laboratories | #002052 | B6.129P2-Apoetm1Unc/J |
GNEXT PET/CT | Sofie Biosciences, Dulles, Virginia | ||
Isoflurane | Piramal Critical Care | Used as anesthesia for mouse imaging | |
ORS Dragonfly | Comet Technologies Canada Inc. | ||
SPSS Statistics | IBM | ||
Western diet for mice | Envigo | #TD88139 | 21% fat, 0.2% cholesterol |
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