Weniger invasive Technik für nicht-stabilisierte Unterkieferfraktur in Mausmodellen

Zusammenfassung

Dieses Protokoll stellt eine umfassende und effiziente Methode zur Analyse der Unterkieferknochenreparatur dar. Wir beschreiben eine reproduzierbare Technik für die nicht-stabilisierte Unterkieferfraktur im Mausmodell, die es ermöglicht, den Prozess der endochondralen Knochenreparatur mit minimaler Gewebeschädigung und Knochenverlust zu analysieren.

Zusammenfassung

Bei Mäusen können nicht-stabilisierte Frakturen an Unterkieferstellen vorgenommen werden, so dass die Knochenreparatur mit Hilfe eines endochondralen Ossifikationsmodus analysiert werden kann. Um diesen Prozess in vivo so genau wie möglich abzubilden, ist ein standardisiertes Protokoll erforderlich, um übermäßigen Knochenverlust und Weichteilschäden zu vermeiden, insbesondere an der Unterkieferstelle, einer anatomischen Stelle, die durch minimalen Zugang gekennzeichnet ist. Unseres Wissens beschreiben wir zum ersten Mal ein weniger invasives Protokoll der nicht-stabilisierten Unterkieferfraktur bei Mäusen. Erwachsene Mäuse werden mit Isofluran anästhesiert und erhalten eine präoperative Dosis von Buprenorphin durch subkutane Injektion. Es wird ein submandibulärer Zugang durchgeführt, bei dem ein Hautschnitt entlang des unteren Randes des Unterkiefers vorgenommen wird. Der Kaumuskel ist in einer subperiostalen Ebene entlang des Ramus mandibularis mit einem Periostlift angehoben. Eine vertikale und vollständige Fraktur des Ramus wird von der basilären Grenze bis zur koronoiden Kerbe (zwischen Kondylen- und Coronoidfortsätzen) unter Verwendung eines piezoelektrischen Knochenchirurgiegeräts unter Kochsalzlösung, Serumspülung am Basilarand und einer Schere durchgeführt, um die Fraktur des Unterkieferastes zu vervollständigen. Der Hautzugang wird durch Seidennähte verschlossen. Dieses detaillierte Verfahren für nicht stabilisierte Unterkieferfrakturen bietet ein effizientes Verfahren, das einen minimalen Knochenverlust und eine Schädigung des Weichgewebes ermöglicht. Diese Technik gewährleistet erfolgreiche und konsistente Ergebnisse, um den Prozess der endochondralen Knochenreparatur in Mausmodellen genau widerzuspiegeln.

Einleitung

Die Knochenreparatur impliziert sowohl membranöse als auch endochondrale Ossifikationsprozesse, abhängig von der Fraktur oder der Osteotomie-Stabilisierung. Die Knochenreparatur nach stabilisierten Knochenosteotomien oder Frakturen beruht auf einer membranösen Ossifikation, während sich nicht stabilisierte Frakturen oder schlecht stabilisierte Osteotomien nach einem Modus der endochondralen Ossifikation^{verfestigen 1}. Die membranöse Knochenreparatur ist gekennzeichnet durch die Knochenbildung durch direkte Differenzierung von mesenchymalen Zellen in Osteoblasten, während die endochondrale Knochenreparatur die Bi....

Protokoll

Dieses Protokoll folgt den Tierhaltungsrichtlinien des Imagine Institute und wurde von Ethikkommissionen und dem französischen Ministerium validiert (APAFIS 26995).

1. Tiere

1. Bestimmen Sie die Anzahl der Tiere pro Gruppe. Wir empfehlen 12 Tiere pro Gruppe. Bestimmen Sie das Geschlecht und das Alter von Mäusen. Dieses Protokoll ist für 6 Wochen alte C57BL/6J-Mäuse (männlich oder weiblich) angepasst.
2. Geben Sie den Tieren, mindestens 1 Woche vor dem Eingriff, Nahrungsergänzungsmittelgel zur Akklimatisierung.

2. Chirurgischer Eingrif....

Ergebnisse

Was die chirurgischen Eingriffe in vivo betrifft, so ist für die optimale Durchführung dieses Verfahrens der nicht-stabilisierten Unterkieferfraktur im Mausmodell spezifisches Lernen und Training erforderlich.

Diese Technik für nicht stabilisierte Unterkieferfrakturen ermöglicht die Untersuchung des endochondralen Knochenreparaturprozesses. Nach der Euthanasie wurden Unterkieferproben in 4% Paraformaldehyd entnommen (24 h). Nach vollständiger Ent.......

Diskussion

Die Technik ermöglicht die Realisierung von nicht-stabilisierten Unterkieferfrakturen im Mausmodell innerhalb eines minimalen offenen Zugangs in einer kurzen Eingriffszeit (ca. 10 min oder weniger). Dieses Kurzzeitverfahren begrenzt das Risiko der Morbidität und des Todes von Tieren, insbesondere bei Kleintieren wie Mäusen. Um vergleichbare Ergebnisse bei der Analyse des endochondralen Knochenreparaturprozesses zu erhalten, sollte besonders darauf geachtet werden, die Unterkieferfrakt.......

Materialien

Name	Company	Catalog Number	Comments
Buprenorphine : Buprecare 0.3 mg/kg	Animalcare
Elevator OBWEGESER width 6mm Length 17,5cm	Collin Medical	HA 5905
Forceps : Pad Plate MORIA 11 cm N°5	MORIA	9906
Heating table Bioseblab 55 cm x 33 cm	Bioseblab	707
Needle HOLDER : Micro Halsey Needle Holder - Metal	LABODERM	21,100
Neo Clear	Merck Millipore, Darmstadt, Germany	109843
Ocry Gel Tube 10 g (eye lubricant)	tvm lab	3.70045E+12
Piezotome 2 ASS FINAL	ACTEON	X57402
Piezotome insert Piezocision PZ3	ACTEON	F87574
Scissors micro	MORIA	MC52
Silk sutures PERMA HAND SEIDE  / MERSILK	ETHICON	REF 18501G
Straight scissors	MORIA	4877A
Vetflurane (isoflurane) 250 ml	VIRBAC	VET066 (Centravet)