Geben Sie zunächst 150 Milliliter saubere Fünf-Millimeter-Glasperlen in das saubere Glas und schließen Sie den Deckel. Decken Sie das geschlossene Glas mit genügend Aluminiumfolie ab, um den Deckel mit der Glasverbindung zu verbergen, und autoklavieren Sie es 20 Minuten lang bei 121 Grad Celsius. Wenn die Sämlinge bereit sind, in das Glas auf der sterilen Bank umzufüllen, entferne die Aluminiumfolie und den Deckel des Glases.
Geben Sie 35 Milliliter halbstarkes Murashige- und Skoog-Medium mit einem pH-Wert von 5,7 bis 5,9 in das Glas und rühren Sie die Perlen um, um sie gleichmäßig mit dem Medium zu bedecken. Setze drei bis fünf Sämlinge in das Glas und achte darauf, dass das Wurzelsystem zwischen den Glasperlen platziert wird. Passen Sie die Perlen mit einer sterilen Pinzette oder einem Löffel an, um die Wurzeln zu bedecken und heben Sie die Blätter aus dem Medium.
Befestigen Sie zwei Streifen 1,25 Zentimeter Mikroporenband über die Oberseite des Glases und legen Sie den Deckel vorsichtig darauf. Verschließen Sie den Spalt zwischen Deckel und Glas mit einem 2,5 Zentimeter dicken Mikroporenband, um die Sterilität zu erhalten und gleichzeitig den Luftaustausch zu ermöglichen, und stellen Sie das Glas in eine Wachstumskammer. Wenn die Pflanzen das gewünschte Alter erreicht haben, entferne das Mikroporenband und den Deckel vom Glas.
Aliquotieren Sie 20 Mikroliter Wachstumsmedium auf die LB-Agarplatte für Sterilitätstests. Entfernen Sie mit einer volumetrischen 25-Milliliter-Pipette so viel Nährmedium wie möglich, ohne die Wurzeln zu beschädigen. Füge 50 Milliliter Auffangmedium entlang der Glaswand hinzu, um ein Benetzen der Blätter zu verhindern.
Verschließen Sie das Glas mit einem Deckel und inkubieren Sie es zwei Stunden lang unter sterilen Bedingungen. Nach der Inkubation die gewünschte Menge des Sammelmediums in Röhrchen entnehmen. Messen Sie das Gewicht der Wurzel und des Sprosses der Pflanze in einem Glas, um die Wurzelausscheidungen nach Pflanzengewicht zu normalisieren.
Die Pflanzen von Arabidopsis thaliana sahen in zwei verschiedenen Labors gesund aus. Das Glasgefäßsystem erwies sich als anpassungsfähig für verschiedene Pflanzenarten und Entwicklungsstadien. Weizen hatte die höchsten Rutschengewichte, gefolgt von Sorghum und Tomaten.
Sorghum hatte die höchsten Wurzelgewichte, gefolgt von Weizen und Medicago truncatula. Die Inokulation von Arabidopsis thaliana mit kommensalen Bakterien veränderte den Phänotyp der Pflanze nicht, und die inokulierten Bakterien blieben mindestens 12 Tage im System mit einem leichten Anstieg der koloniebildenden Einheiten.
