Klemmen Sie zunächst den 3 x 8 Zoll großen Schlauch direkt vor den Aortenanschluss, um den Perfusatfluss zu stoppen. Positionieren Sie das präparierte Schweineherz mit der hinteren Wand in Richtung des Bedieners und winkeln Sie die Organkammer um etwa 20 Grad. Platzieren Sie dann die Aortenkanüle in einem 90-Grad-Winkel vom Aortenanschluss und lösen Sie den Aortenzugang langsam.
Entlüften Sie die Aortenkanüle, indem Sie das Perfusat allmählich hineinfließen lassen. Verringern Sie nun langsam den Winkel der Aortenkanüle, bis sie mit dem Aortenport ausgerichtet ist, und verbinden Sie sie dann vollständig mit dem Aortenzugang. Sobald die Verbindung vollständig verbunden ist, massieren Sie das Herz sanft intermittierend, um Dehnungen durch linksventrikuläre Füllung zu vermeiden.
Entlüften Sie den linken Ventrikel während dieser Zeit durch den offenen linken Vorhof. Starten Sie die Datenerfassung und initiieren Sie den Adenosin-Tropf mit 333 Mikrolitern pro Minute. Verbinden Sie dann die Stimulationsdrähte mit der Stimulationsbox und stellen Sie sie auf 60 Schläge pro Minute für die Backup-Stimulation ein.
Wenn Flimmern vorhanden ist, defibrillieren Sie das Herz mit 30 JUULs-Paddeln. Sobald ein organisierter Rhythmus vorhanden ist, brechen Sie die manuelle Entlüftung ab und platzieren Sie EKG-Elektroden mit Hakennadeln direkt auf dem Herzen. Verbinden Sie die rechtwinklige Kanüle mit dem Vorhofport der Organkammer.
Nach dem Anschließen klemmen Sie die Kanüle ein und lösen Sie die Hoffman-Klemme in der Leitung zwischen dem Oxygenator und dem Ladebehälter, um Flüssigkeit in den Ladebehälter zu lassen. Füllen Sie dann den Ladebehälter, bis der Druck 15 bis 20 Millimeter Quecksilbersäule erreicht. Erhöhen Sie die Pumpenleistung, um sowohl den Aorten- als auch den Vorhofdruck aufrechtzuerhalten.
Führen Sie dann die Hälfte der rechtwinkligen Metallspitze in den linken Vorhof ein, wobei die Spitze zum Anhang zeigt, um die Kompetenz der Mitralklappe zu fördern. Führen Sie den Drucksensor in den linken Ventrikel ein, um den linksventrikulären Druck aufzuzeichnen. Lösen Sie danach die Klemme an der Kanüle, damit sich der linke Vorhof füllen kann.
Nach dem Entlüften verwenden Sie die zuvor platzierten Nähte und Tourniquet-Schlingen, um die Öffnung des linken Vorhofs vollständig zu schließen. Passen Sie die Kanüle und die Schlingen nach Bedarf an, um das Austreten von Flüssigkeit zu minimieren. Nachdem Sie die Kanüle im linken Vorhof gesichert haben, klemmen Sie die Leitung vom Oxygenator zum Windkesselbeutel, um die retrograde Perfusion in die Aorta vollständig zu stoppen.
Bewegen Sie abschließend den Adenosintropfen von der Leitung, die zum Windkesselbeutel führt, auf die Leitung zwischen dem Ladebehälter und dem Vorhofanschluss. Der Gefäßwiderstand, die Sauerstoffaufnahmerate, die Laktatakkumulation, der Glukoseverbrauch und die Kaliumakkumulation zeigten während der Perfusionsperiode keinen statistischen Unterschied. Ebenso wurde kein Unterschied in der Gewichtszunahme der Transplantate festgestellt.
Die Herzfrequenz fehlgeschlagener Transplantate nahm jedoch nach zwei Stunden Belastung stetig ab, wobei der Bereich unter der Kurve bis drei Stunden nach der Perfusion keinen statistisch signifikanten Unterschied zeigte. Darüber hinaus deuteten belastungsabhängige Metriken auf einen Verlust der Herzfunktion bereits 30 Minuten nach Beginn der Ladezeit hin, wobei das Maß für die Kontraktilität die erste Metrik war, die auf einen Funktionsverlust hindeutete. Wie die Herzfrequenz sank auch der linksventrikuläre Pulsdruck nach zwei Stunden geladener Perfusion stetig ab, wobei statistisch signifikante Unterschiede zwischen Transplantaten, Pulsdruck und Entspannung nach 1,5 Stunden Perfusion beobachtet wurden.
