Simultaneous Pre- and Post-synaptic Electrophysiological Recording from <em>Xenopus</em> Nerve-muscle Co-cultures

Much information about the coupling of  presynaptic ionic currents with the release of neurotransmitter has been obtained  from invertebrate preparations, ...

David Geffen School of Medicine at UCLA

1.&#x5168;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7535;&#x6D41;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5174;&#x594B;&#x6027;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178; L-&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x9178; &#xFF08;&#x5473;&#x7CBE;&#x3001; &#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#xFF09;&#x3001; L-&#x5929;&#x95E8;&#x51AC;&#x6C28;&#x9178; (Asp) &#x548C;&#x53CA;&#x5176;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7269; N-&#x7532;&#x57FA;-D-&#x5929;&#x51AC;&#x6C28;&#x9178; (NMDA) &#x7EA2;&#x85FB;&#x6C28;&#x9178; (KA) quisqualic &#x9178; (QA) &#x548C; alpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic &#x9178; (AMPA) &#x5F55;&#x5F97;&#x4ECE;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9176;&#x91D1;&#x9C7C;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x8131;&#x79BB;&#x548C;&#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#x6210;&#x957F;&#x3002;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x4ECE; 2 &#x5230; 72 h.2 &#x591A;&#x6570;&#x63A2;&#x6D4B;&#x6574;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x7684;&#x7535;&#x6D41;&#x662F;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x7684;&#x9633;&#x79BB;&#x5B50; (Na +) &#x9634;&#x79BB;&#x5B50; (Cl-)&#x3002;&#x5F53;&#x7518;&#x6C28;&#x9178; microM 1 coapplied &#x6BCF;&#x4E2A;&#x88AB;&#x5F3A;&#x5316; Glu&#x3001; NMDA &#x548C; Asp &#x7684;&#x54CD;&#x5E94;&#x3002;&#x80DE;&#x5916; Mg2 + &#x5B8C;&#x5168;&#x963B;&#x6B62;&#x5BF9; NMDA &#x52A0;&#x7518;&#x6C28;&#x9178;&#x5728;&#x4E3E;&#x884C;&#x8D1F;&#x7535;&#x4F4D;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5F53;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x88AB;&#x66F4;&#x53BB;&#x6781;&#x5316;&#x65F6;&#x611F;&#x5230;&#x5BBD;&#x6170;&#x7684;&#x662F;&#x5757;&#x3002;3.&#x5242;&#x91CF;-&#x53CD;&#x5E94;&#x6D4B;&#x91CF;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;&#x8C37;&#x6C28;&#x9178;&#x7518;&#x6C28;&#x9178; microM 1 &#x7C7B;&#x4F3C;&#x7269;&#x548C;&#x96F6;&#x80DE;&#x5916; Mg2 + &#xFF1B; &#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#x7B49;&#x7EA7;&#x79E9;&#x5E8F;QA &#x5927;&#x4E8E; AMPA &#x5927;&#x4E8E; NMDA &#x5927;&#x4E8E; KA&#x3002;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E0D;&#x662F;&#x56DE;&#x5E94;&#x5EFA;&#x4E1A; (L-2-aminophosphonobutyric acid)&#x3002;4.&#x72AC;&#x5C3F;&#x55B9;&#x5549;&#x9178; (Ky) &#x5236;&#x4F5C; 1 microM &#x7518;&#x6C28;&#x9178; NMDA &#x54CD;&#x5E94;&#x7684; 40 microM Ki &#x4E0E;&#x7ADE;&#x4E89;&#x6027;&#x5757;&#x3002;KA&#x3001; &#x95EE;&#x7B54;&#x548C; AMPA &#x56DE;&#x5E94;&#x90FD;&#x6781;&#x5177;&#x7ADE;&#x4E89;&#x529B;&#x88AB;&#x5C01;&#x9501; Ky &#x4E0E; Kis 72&#x3001; 148&#x3001; &#x548C; 656 microM&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x3002;QA &#x548C; AMPA &#x7ADE;&#x4E89;&#x529B;&#x5206;&#x522B;&#x963B;&#x6B62; KA &#x968F;&#x4EE5; Kis 114 microM &#x548C; 1 &#x6BEB;&#x7C73;&#x7684;&#x56DE;&#x5E94;&#x3002;NMDA &#x5355;&#x4E00;&#x6E20;&#x9053; 27-30 pS mainstate &#x8FB9;&#x5761;&#x7535;&#x5BFC;&#x548C;&#x4E24;&#x4E2A; subconductance &#x7EA7;&#x522B;&#x7684; 5 &#x548C; 24 pS &#x5F53;&#x65F6;&#x5728;&#x5BF9;&#x79F0; Na + 13 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6;&#x3002;5.&#x5168;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x5230; QA &#x548C; AMPA &#x9AD8;&#x5EA6;&#x76F8;&#x5173;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E; QA &#x548C; AMPA &#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x540C;&#x4E00;&#x53D7;&#x4F53;&#x6216;&#x53D7;&#x4F53; &#xFF1B; &#x7C7B;&#x800C; QA &#x548C; KA &#x7684;&#x56DE;&#x5E94;&#x4E0D;&#x597D;&#x76F8;&#x5173;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#xFF0C;&#x81F3;&#x5C11;&#x90E8;&#x5206;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5355;&#x72EC;&#x53D7;&#x4F53;&#x4EBA;&#x53E3;&#x3002;

&#x5BF9;&#x91D1;&#x9C7C;&#x4ECE;&#x5B64;&#x7ACB;&#x7684;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5174;&#x594B;&#x6027;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x53D7;&#x4F53;&#x3002;

1. Whole-cell currents activated by the excitatory amino acids L-glutamic acid (glutamate, Glu), L-aspartic acid (Asp), and their analogues N-methyl-D-aspartate (NMDA), kainic acid (KA), quisqualic acid (QA), and alpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic acid (AMPA) were recorded from ganglion cells enzymatically dissociated from goldfish retina and grown in culture. All agonists induced detectable whole-cell responses in the majority of cells cultured from 2 to 72 h. 2. Currents activated by each of the agonists were selective for cations (Na+) over anions (Cl-). The responses to Glu, NMDA, and Asp were each potentiated when 1 microM glycine was coapplied. Extracellular Mg2+ blocked completely the response to NMDA plus glycine in cells held at negative potentials, but the block was relieved when cells were more depolarized. 3. Dose-response measurements revealed a rank order of sensitivity to the Glu analogues in the presence of 1 microM glycine and zero extracellular Mg2+; QA greater than AMPA greater than NMDA greater than KA. Cells were not responsive to APB (L-2-aminophosphonobutyric acid). 4. Kynurenic acid (Ky) produced a noncompetitive block of the NMDA response in the presence of 1 microM glycine with a Ki of 40 microM. Responses to KA, QA, and AMPA were blocked competitively by Ky with Kis of 72, 148, and 656 microM, respectively. QA and AMPA competitively blocked the response to KA with Kis of 114 microM and 1 mM, respectively. NMDA single channels had a mainstate slope conductance of 27-30 pS and two subconductance levels of 5 and 24 pS at 13 degrees C in symmetrical Na+. 5. Whole-cell responses to QA and AMPA were highly correlated, suggesting that QA and AMPA activated the same receptor or class of receptors; whereas, responses to QA and KA were not well correlated, suggesting that these agonists at least in part activated separate receptor populations.

Excitatory amino acid receptors on isolated retinal ganglion cells from the goldfish.

1. Cellules enti&egrave;res courants activ&eacute;s par l&#39;acide des acides amin&eacute;s excitateurs L-glutamique ou le glutamate (Glu), l&#39;acide L-aspartique (Asp) et leurs analogues N-m&eacute;thyl-D-aspartate (NMDA), l&#39;acide ka&iuml;nique (KA), acide quisqualique (QA), et acide alpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic (AMPA) ont &eacute;t&eacute; enregistr&eacute;s dans les cellules ganglionnaires enzymatiquement dissoci&eacute;e de la r&eacute;tine de poissons rouges et en culture. Tous les agonistes induits par les r&eacute;ponses de germes entiers d&eacute;tectables dans la majorit&eacute; des cellules cultiv&eacute;es de 2 &agrave; 72 h. 2. Courants activ&eacute;es par chacun des agonistes d&eacute;passaient s&eacute;lectives des cations (Na +) les anions (Cl-). Les r&eacute;ponses &agrave; la Glu, NMDA et Asp chacun sont potentialis&eacute;es lorsque 1 microM glycine a &eacute;t&eacute; coapplied. Mg2 + extracellulaire bloque compl&egrave;tement la r&eacute;ponse au NMDA plus glycine dans les cellules qui s&#39;est tenue &agrave; potentiels n&eacute;gatifs, mais le bloc a &eacute;t&eacute; soulag&eacute; lorsque les cellules &eacute;taient plus d&eacute;polaris&eacute;s. 3. La dose-r&eacute;ponse a r&eacute;v&eacute;l&eacute; un ordre de grandeur de sensibilit&eacute; pour les analogues de la Glu en pr&eacute;sence de 1 microM glycine et z&eacute;ro Mg2 + extracellulaire ; Sup&eacute;rieure &agrave; la LPCA sup&eacute;rieure &agrave; NMDA sup&eacute;rieure &agrave; KA QA. Les cellules ne r&eacute;pondaient pas &agrave; l&#39;APB (acide L-2-aminophosphonobutyric). 4. L&#39;acide kynur&eacute;nique (Ky) produit un bloc non comp&eacute;titif de la r&eacute;ponse NMDA en pr&eacute;sence de 1 microM glycine avec un Ki de 40 microM. R&eacute;ponses &agrave; KA, QA et AMPA &eacute;taient bloqu&eacute;es comp&eacute;titifs par Ky avec Kis de 72, 148 et microM 656, respectivement. QA et AMPA competitivement bloqua la r&eacute;ponse &agrave; KA avec Kis de 114 microM et 1 mM, respectivement. Canaux NMDA avait une conductance mainstate de 27-30 ch et deux niveaux de sous-conductance du pS 5 et 24 &agrave; 13 degr&eacute;s C sym&eacute;trique de Na +. 5. Cellule enti&egrave;re r&eacute;ponses &agrave; QA et AMPA sont fortement corr&eacute;l&eacute;es, sugg&eacute;rant que QA et AMPA activ&eacute; le m&ecirc;me r&eacute;cepteur ou une classe de r&eacute;cepteurs ; consid&eacute;rant que, en r&eacute;ponses &agrave; QA et KA n&#39;&eacute;taient pas bien corr&eacute;l&eacute;s, ce qui sugg&egrave;re que ces agonistes activ&eacute; au moins en partie des populations de r&eacute;cepteurs distincts.

Acide amin&eacute; excitateur r&eacute;cepteurs sur les cellules ganglionnaires r&eacute;tiniennes isol&eacute;s du poisson rouge.

1. Ganze Zellen str&ouml;men durch die S&auml;ure der exzitatorischen Aminos&auml;uren L-Glutamins&auml;ure (Glutamat, Glu), aktiviert, L-Asparagins&auml;ure (Asp) und deren Analoga N-Methyl-D-Aspartat (NMDA), Kainic S&auml;ure (KA), Quisqualic S&auml;ure (QS), und alpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic S&auml;ure (AMPA) wurden aufgenommen von Ganglienzellen enzymatisch dissoziiert von Goldfisch Retina und in Kultur angebaut. Alle Agonisten induzierten nachweisbare ganz-Zell-Antworten in den meisten Zellen kultiviert von 2 bis 72 h. 2. Str&ouml;me, die durch jede der Agonisten aktiviert waren &uuml;ber Anionen (CL-) selektiv f&uuml;r kationen (Na +). Die Reaktionen auf Glu, NMDA und Asp wurden jeweils potenzierte, wenn 1 MicroM Glycin coapplied war. Extrazellul&auml;re Mg2 + blockiert vollst&auml;ndig die Antwort NMDA Plus Glycin in Zellen, die negative Potentiale ausgetragen, aber der Block war erleichtert, als die Zellen mehr ersch&uuml;tterten waren. 3. Dosis-Wirkungs-Messungen ergeben eine Rangfolge der Empfindlichkeit der Glu-Analoga in Anwesenheit von 1 MicroM Glycin und NULL extrazellul&auml;re Mg2 +; QA AMPA NMDA KA gr&ouml;&szlig;er gr&ouml;&szlig;er gr&ouml;&szlig;er. Zellen waren nicht empf&auml;nglich f&uuml;r APB (L-2-Aminophosphonobutyric-S&auml;ure). 4. Kynurenic S&auml;ure (Ky) produziert einen au&szlig;er Konkurrenz Block der NMDA-Antwort in der Gegenwart 1 MicroM Glycin mit einem Ki von 40 MicroM. Antworten zu KA, QA und AMPA wurden konkurrierend von Ky mit Kis 72, 148 und 656 MicroM, bzw. blockiert. QA und AMPA blockiert konkurrierend die Reaktion auf KA mit Kis 114 MicroM und 1 mM, bzw.. NMDA einzelne Kan&auml;le hatte eine Mainstate Steigung Leitwert von 27-30 pS und zwei Subconductance-Level 5 und 24 PS bei 13 Grad C in symmetrische Na +. 5. Ganz-Zell-Antworten zu QA und AMPA waren hoch korreliert; darauf hindeutet, dass QA und AMPA die gleichen Rezeptor oder Klasse Rezeptoren aktiviert, in der Erw&auml;gung, dass Antworten zu QA und KA nicht gut korreliert wurden, darauf hindeutet, dass diese Agonisten zumindest teilweise separate Rezeptor Populationen aktiviert.

Exzitatorischen Aminos&auml;ure-Rezeptoren in isolierten retinalen Ganglienzellen aus der Goldfisch.

1. Cellule intere correnti attivato dall&#39;acido eccitatorio aminoacidi L-glutammico (glutammato, Glu), acido L-Aspartico (Asp) e loro analoghi N-metil-D-aspartato (NMDA), acido kainico (KA), acido quisqualic (QA), e l&#39;acido alpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic (AMPA) sono state registrate dalle cellule gangliari enzimaticamente dissociato dalla retina goldfish e cresciuto nella cultura. Tutti gli agonisti indussero risposte di cellule intere rilevabili nella maggior parte delle cellule in coltura da 2 a 72 h. 2. Correnti attivate da ciascun gli agonisti sono stati selettive per cationi (Na +) sopra gli anioni (Cl-). Le risposte di Glu, NMDA e Asp erano ciascuno potenziate quando fu coapplied 1 microM glicina. Extracellular Mg2 + bloccato completamente la risposta di NMDA plus glicina in cellule tenuta a potenziali negativi, ma il blocco &egrave; stato sollevato quando le cellule sono state pi&ugrave; depolarized. 3. Le misure dose-risposta hanno rivelato un ordine di rango della sensibilit&agrave; per il Glu analoghi in presenza di 1 microM glicina e zero extracellular Mg2 +; QA maggiore maggiore maggiore di KA NMDA AMPA. Le cellule non erano sensibili ai APB (acido L-2-aminophosphonobutyric). 4. Kynurenic acido (Ky) ha prodotto un blocco non competitivo della risposta NMDA in presenza di 1 microM glicina con un Ki di 40 microM. Risposte a KA, QA e AMPA sono state bloccate competitivamente da Ky con Kis 72, 148 e 656 microM, rispettivamente. QA e AMPA competitivamente bloccato la risposta di KA con Kis di 114 microM e 1 mM, rispettivamente. Singoli canali NMDA avevano una conduttanza di pendenza mainstate di 27-30 pS e due livelli subconductance di pS 5 e 24 a 13 gradi C in simmetrica Na +. 5. Cellule intere responses to QA e AMPA erano altamente correlati, suggerendo che QA e AMPA attivato il recettore stesso o una classe di recettori; considerando che responses to QA e KA non erano ben correlato, suggerendo che questi agonisti attivato almeno in parte delle popolazioni del recettore separato.

Aminoacido eccitatorio recettori sulle cellule gangliari retiniche isolato da pesci rossi.

1. &#x5168;&#x4F53;&#x30BB;&#x30EB;&#x96FB;&#x6D41;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8208;&#x596E;&#x6027;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178; L-&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x9178; (&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x3001;Glu) l-&#x30A2;&#x30B9;&#x30D1;&#x30E9;&#x30AE;&#x30F3;&#x9178; (Asp)&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x305D;&#x306E;&#x985E;&#x7E01;&#x4F53; N-&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;-D-&#x30A2;&#x30B9;&#x30D1;&#x30E9;&#x30AE;&#x30F3;&#x9178; (NMDA)&#x3001;&#x30AB;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x9178; (KA) &#x30AD;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EB;&#x9178; (QA)&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5316;&#x3001;alpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic &#x9178; (AMPA) &#x9175;&#x7D20;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x91D1;&#x9B5A;&#x7DB2;&#x819C;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x89E3;&#x96E2;&#x3057;&#x3001;&#x683D;&#x57F9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x8A18;&#x9332;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x691C;&#x51FA;&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54; 72 h 2 &#x304B;&#x3089; 2 &#x3092;&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x3067;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5404;&#x3001;&#x4F5C;&#x52D5;&#x85AC;&#x304C;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x96FB;&#x6D41;&#x3067;&#x9670;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3; (Cl-) &#x306E;&#x967D;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3; (Na +) &#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;1 MicroM &#x30B0;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x304C; coapplied &#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3068; Glu&#x3001;NMDA&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; Asp &#x306E;&#x30EC;&#x30B9;&#x30DD;&#x30F3;&#x30B9;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x5897;&#x5F37;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916; mg 2 + &#x5B8C;&#x5168;&#x306B; NMDA &#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x8CA0;&#x306E;&#x96FB;&#x4F4D;&#x3067;&#x306E;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x304C;&#x30BB;&#x30EB;&#x3088;&#x308A;&#x504F;&#x5149;&#x89E3;&#x6D88;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x306F;&#x30DB;&#x30C3;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;3. &#x7528;&#x91CF;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x985E;&#x7E01;&#x4F53; 1 microM &#x30B0;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x3001;&#x30BC;&#x30ED;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916; mg 2 + &#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x306E;&#x9806;&#x4F4D;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;QA AMPA NMDA KA &#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x3088;&#x308A;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x3088;&#x308A;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F; APB &#xFF08;L-2-aminophosphonobutyric &#x9178;&#xFF09; &#x53CD;&#x5FDC;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;4. &#x30AD;&#x30CC;&#x30EC;&#x30F3;&#x9178; &#xFF08;&#x30B1;&#x30F3;&#x30BF;&#x30C3;&#x30AD;&#x30FC;&#x5DDE;&#xFF09; NMDA &#x5FDC;&#x7B54; 1 microM &#x30B0;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x306E;&#x975E;&#x7AF6;&#x5408;&#x7684;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF; 40 microM &#x306E;&#x6C23;&#x3092;&#x751F;&#x7523;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5FDC;&#x7B54; KA&#x3001;QA&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; AMPA &#x306B;&#x7AF6;&#x4E89;&#x529B;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x30B1;&#x30F3;&#x30BF;&#x30C3;&#x30AD;&#x30FC; 72, 148, 656 microM &#x306E; Kis &#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7AF6;&#x4E89;&#x529B;&#x306E;&#x3042;&#x308B; QA &#x53CA;&#x3073; AMPA KA 114 &#x306E; microM &#x3068; 1 mM &#x306E; Kis &#x3068;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3002;&#x5358;&#x4E00; nmda 27 30 pS &#x306E; mainstate &#x659C;&#x9762;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30F3;&#x30B9;&#x3068; 2 &#x3064;&#x306E; subconductance &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB; 5 &#x3068; 24 &#x306E; pS &#x306E;&#x5BFE;&#x79F0; Na + 13 &#x2103; &#x3067;&#x3044;&#x305F;&#x3002;5 QA &#x3068; AMPA &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x3001;&#x540C;&#x3058;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x5168;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B; QA &#x3068; AMPA &#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;QA &#x3068; KA &#x306E;&#x30EC;&#x30B9;&#x30DD;&#x30F3;&#x30B9;&#x3082;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x5225;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x96C6;&#x56E3;&#x3067;&#x306F;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x91D1;&#x9B5A;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7DB2;&#x819C;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8208;&#x596E;&#x6027;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3002;

1. L aspartic &#xC0B0; (Asp), &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; analogues N-&#xBA54; &#xD2F8;-D-aspartate (NMDA) kainic &#xC0B0; (&#xCE74;), quisqualic &#xC0B0; (&#xD488;&#xC9C8; &#xBCF4;&#xC99D;) &#xC804;&#xCCB4; &#xC140; &#xC804;&#xB958; &#xD765;&#xBD84; &#xC131;&#xC758; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; L-&#xAE00;&#xB8E8;&#xD0C0;&#xBBFC; &#xC0B0; (glutamate, Glu)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; alpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic &#xC0B0; (AMPA) enzymatically &#xAE08;&#xBD95;&#xC5B4; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD574;&#xB9AC;&#xC640; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC790;&#xB780; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xB85D; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB4E0; agonists 72 &#xD5E4; 2 2&#xC5D0;&#xC11C; &#xACBD;&#xC791; &#xD558;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xC804;&#xCCB4; &#xC140; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xC720;&#xBC1C;. &#xC804;&#xB958;&#xB294; agonists&#xC758; &#xAC01;&#xAC01;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC74C;&#xC774;&#xC628; (Cl-) &#xC774;&#xC0C1; &#xC591;&#xC774;&#xC628; (Na +)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC120;&#xD0DD; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB54C; 1 microM &#xAE00;&#xB9AC;&#xC2E0; coapplied&#xB294; potentiated &#xAC01; Glu, NMDA, &#xBC0F; Asp &#xC751;&#xB2F5; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; Mg2 + &#xCC28;&#xB2E8; &#xC644;&#xC804;&#xD788; NMDA &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC1C;&#xCD5C; &#xD558;&#xB294; &#xC140;&#xC758; &#xAE00;&#xB9AC;&#xC2E0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5; &#xBE14;&#xB85D; &#xC140;&#xC740; depolarized &#xB354; &#xB54C; &#xC548;&#xC2EC; &#xD588;&#xB2E4;. 3. &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xC751;&#xB2F5; &#xCE21;&#xC815; &#xAC10;&#xB3C4; Glu analogues 1 microM &#xAE00;&#xB9AC;&#xC2E0;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xBC0F; &#xC81C;&#xB85C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; Mg2 +;&#xB97C; &#xC21C;&#xC704; &#xC21C;&#xC11C; &#xACF5;&#xAC1C; QA AMPA NMDA &#xCE74; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD070;. &#xC140; &#xC218; &#xBC30; (L-2-aminophosphonobutyric &#xC0B0;)&#xC5D0; &#xBC18;&#xC751; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. 4. Kynurenic &#xC0B0; (&#xCF04;&#xD130;&#xD0A4;) 1 microM &#xAE00;&#xB9AC;&#xC2E0; &#xC874;&#xC7AC; NMDA &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xD68C;&#xC7A5; &#xBE14;&#xB85D; 40 microM &#xAE30; &#xC0DD;&#xC0B0;. &#xC751;&#xB2F5; &#xCE74;, &#xD488;&#xC9C8; &#xBCF4;&#xC99D;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; AMPA &#xCC28;&#xB2E8; &#xB41C; &#xACBD;&#xC7C1;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; 72, 148, 656 Microm&#xC758; Kis&#xC640; &#xCF04;&#xD130;&#xD0A4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC01;&#xAC01;. QA&#xC640; AMPA Kis 114 Microm&#xACFC; 1 m M&#xC758;&#xC640; &#xCE74;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; &#xAC01;&#xAC01; &#xCC28;&#xB2E8; &#xACBD;&#xC7C1;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;. NMDA &#xB2E8;&#xC77C; &#xCC44;&#xB110;&#xC5D0; &#xB300;&#xCE6D; Na + 13 &#xC12D;&#xC528; 27-30 Ps&#xC758; mainstate &#xC2AC;&#xB85C;&#xD504; &#xC804;&#xB3C4;&#xB3C4; &#xBC0F; 5&#xC640; 24 Ps&#xC758; &#xB450; subconductance &#xC218;&#xC900; &#xD588;&#xB2E4;. 5. &#xC804;&#xCCB4; &#xC140; &#xC751;&#xB2F5; QA &#xBC0F; AMPA &#xB192;&#xAC8C; &#xC0C1;&#xAD00; &#xD588;&#xB2E4; QA &#xBC0F; AMPA &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;;&#xC758; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; &#xB610;&#xB294; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC81C;&#xC548; &#xBC18;&#xBA74; QA&#xC640; &#xCE74;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2F5;&#xBCC0;&#xC740; &#xC798; &#xC0C1;&#xAD00; &#xD558;&#xC9C0; &#xD588;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; agonists &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; &#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0; &#xBCC4;&#xB3C4; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC778;&#xAD6C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;.

&#xAE08;&#xBD95;&#xC5B4;&#xC758; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC808; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xD765;&#xBD84; &#xC131;&#xC758; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;.

1. Celulares corrientes activan por el &aacute;cido de los amino&aacute;cidos excitatorios L-glut&aacute;mico (glutamato, Glu), &aacute;cido L-asp&aacute;rtico (Asp) y sus an&aacute;logos N-metil-D-aspartato (NMDA), &aacute;cido ka&iacute;nico (KA), &aacute;cido quisqualic (QA), y &aacute;cido alfa-amino-3-hidroxi-5-metil-4 (AMPA) fueron registrados de c&eacute;lulas ganglionares enzim&aacute;ticamente disociado de la retina de peces de colores y crecido en la cultura. Todos los agonistas indujeron respuestas de c&eacute;lulas completas detectables en la mayor&iacute;a de las c&eacute;lulas cultivadas de 2 a 72 h. 2. Las corrientes activadas por cada uno de los agonistas fueron selectivas de cationes (Na +) sobre aniones (Cl-). Las respuestas a Asp, Glu y NMDA fueron cada uno potenciadas cuando fue coapplied 1 microM glicina. Mg2 + extracelular bloqueado completamente la respuesta a NMDA adem&aacute;s de glicina en c&eacute;lulas en potenciales negativos, pero el bloque fue relevado cuando las c&eacute;lulas se depolarized m&aacute;s. 3. Respuesta a la dosis medidas revelaron una orden de la sensibilidad a los an&aacute;logos de la Glu en presencia de 1 microM glicina y cero Mg2 + extracelular; Control de calidad superior de AMPA superior a NMDA mayor KA. Las c&eacute;lulas no fueron sensibles a la APB (&aacute;cido L-2-aminophosphonobutyric). 4. Quinur&eacute;nico &aacute;cido (Ky) produce un bloque no competitivo de la respuesta NMDA en presencia de 1 microM glicina con un Ki de 40 microM. Las respuestas a KA, QA y AMPA fueron bloqueadas competitivo por Ky con Kis de 72, 148 y 656 microM, respectivamente. QA y AMPA bloquean competitivamente la respuesta a KA con Kis de 114 microM y 1 mM, respectivamente. Solos canales NMDA ten&iacute;an una conductancia de la cuesta de mainstate de 27-30 pS y dos niveles de subconductance de 5 y 24 pS a 13 grados C en sim&eacute;trica Na +. 5. C&eacute;lulas completas respuestas a QA y AMPA fueron altamente correlacionadas, sugiriendo que QA y AMPA activaci&oacute;n el mismo receptor o clase de receptores; mientras que, las respuestas a QA y KA no se correlacionaron bien, lo que sugiere que estos agonistas activaci&oacute;n por lo menos en parte las poblaciones separadas del receptor.

Receptores de amino&aacute;cidos excitatorios en las c&eacute;lulas ganglionares de la retina aislado de los peces de colores.

&#x5B64;&#x7ACB;&#x7684;&#x8111;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECE;&#x7A3B;&#x7530;&#x690E;&#x5B9E; stagnalis &#x5C38;&#x4F53;&#x5185;&#x90E8;&#x704C;&#x6D41;&#x548C;&#x7535;&#x538B;&#x94B3;&#x3002;Ca2 + &#x5F53;&#x524D;&#x7684;&#x4E25;&#x91CD;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x76D1;&#x6D4B;&#x540C;&#x65F6;&#x704C;&#x6CE8;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x3002;&#x5F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x704C;&#x6D17;&#x6DB2;&#x662F; unenriched &#xFF08;&#x53EA;&#x5305;&#x542B;&#x65E0;&#x673A;&#x79BB;&#x5B50;&#x3001; 100 &#x6BEB;&#x7C73;&#x590D;&#x548C; 5 &#x6BEB;&#x7C73; EGTA)&#xFF0C;Ca2 + &#x7535;&#x6D41;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x51B2;&#x8680;&#x3001; &#x964D;&#x81F3;&#x5176;&#x6700;&#x5927;&#x503C;&#x7684;&#x4E00;&#x534A;&#x4EF7;&#x503C;&#x7EA6; 30-40 &#x5206;&#x949F;&#x4ECE;&#x4E00;&#x5F00;&#x59CB;&#x7684;&#x704C;&#x6CE8;&#x3002;&#x505C;&#x6B62;&#x704C;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x7684;&#x6D41;&#x91CF;&#x589E;&#x52A0;&#x5230;&#x8D85;&#x8FC7; 50 &#x5206;&#x949F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E00;&#x534A;&#x65F6;&#x95F4;&#x3002;&#x7535;&#x6D41;&#x7535;&#x538B;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x53EA;&#x662F;&#x7565;&#x6709;&#x66F4;&#x6539;&#x671F;&#x95F4;&#x6D17;&#x51FA;&#x3002;&#x589E;&#x52A0;&#x4E86; 2 &#x6BEB;&#x7C73; ATP &#x548C; 1 &#x6BEB;&#x7C73;-Mg2 + &#x5BF9;&#x5185;&#x90E8;&#x7684;&#x704C;&#x6D17;&#x6DB2;&#x963B;&#x6B62;&#xFF0C;&#x751A;&#x81F3;&#x626D;&#x8F6C;&#xFF0C;Ca2 + &#x7535;&#x6D41;&#x51B2;&#x5237;&#x3002;&#x4E09;&#x78F7;&#x9178;&#x817A;&#x82F7;&#x548C; Mg2 + &#x662F;&#x9700;&#x8981;&#x6781;&#x5927;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x7535;&#x6D41;&#x635F;&#x5931;&#x4F5C;&#x4E3A; ATP &#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x53D1;&#x751F;&#x548C; Mg2 + &#x662F;&#x5173;&#x8054;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x7535;&#x5BB9;&#x51CF;&#x5C11;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x7531;&#x4E8E;&#x819C;&#x9001;&#x5165;&#x5438;&#x7BA1;&#x3002;Ca2 + &#x5F53;&#x524D;&#x7684;&#x706D;&#x6D3B;&#x7387;&#x5728;&#x4F7F;&#x7528; unenriched &#x7684;&#x5185;&#x90E8;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#xFF0C;&#x704C;&#x6CE8;&#x671F;&#x95F4;&#x589E;&#x52A0;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0B;&#x964D;&#x5230;&#x521D;&#x59CB;&#x503C;&#x65F6; ATP &#x548C; Mg2 + &#x6DFB;&#x52A0;&#x5230;&#x5185;&#x90E8;&#x704C;&#x6D17;&#x6DB2;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185; Mg2 + &#x6709;&#x5FC5;&#x8981;&#x9632;&#x6B62;&#x51B2;&#x5237;&#xFF0C;&#x6C34;&#x5E73;&#x9AD8;&#x4E8E; 1 &#x6BEB;&#x7C73;&#x4E86;&#x963B;&#x585E;&#x5F71;&#x54CD; Ca2 + &#x5F53;&#x524D;&#x3002;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x73AF;&#x78F7;&#x9178;&#x817A;&#x82F7;&#x4F9D;&#x8D56;&#x86CB;&#x767D;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x67D0;&#x4E9B;&#x56E0;&#x7D20; &#xFF08;&#x5185;&#x90E8;&#xFF1A; &#x5FAA;&#x73AF; AMP&#xFF0C;&#x8336;&#x78B1;&#x548C;&#x73AF;&#x78F7;&#x9178;&#x817A;&#x82F7;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176;&#x7684;&#x50AC;&#x5316;&#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D; &#xFF1B; &#x5916;&#x90E8;&#xFF1A; &#x9170;&#x73AF;&#x78F7;&#x9178;&#x817A;&#x82F7;&#x3001; 8-&#x6EB4;&#x73AF;&#x78F7;&#x9178;&#x817A;&#x82F7;&#x548C;&#x773C;&#x538B;&#x5347;&#x9AD8;) &#x704C; ATP &#x548C; Mg2 + &#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5E76;&#x4E0D;&#x5F71;&#x54CD; Ca2 + &#x5F53;&#x524D;&#x7684;&#x4E25;&#x91CD;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3002;&#x5916;&#x90E8;&#x5E94;&#x7528;&#x7684;&#x8336;&#x78B1;&#x963B;&#x6B62; Ca2 + &#x7535;&#x6D41;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x8FD9;&#x4E09;&#x78F7;&#x9178;&#x817A;&#x82F7;&#x548C; Mg2 + &#x91C7;&#x53D6;&#x884C;&#x52A8;&#x9632;&#x6B62; Ca2 + &#x7535;&#x6D41;&#x51B2;&#x5237;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x589E;&#x5F3A;&#x4F4E; Ca2 + &#x6D53;&#x5EA6;&#x5185;&#x8868;&#x9762;&#x9644;&#x8FD1;&#x7684;&#x8D28;&#x819C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x8FD9;&#x5C06;&#x963B;&#x6B62; Ca2 + &#x5F53;&#x524D;&#x7531;&#x80DE;&#x5185; Ca2 + &#x7684;&#x53EF;&#x9006;&#x5757;&#x548C;&#x5F53;&#x524D;&#x7531;&#x4E8E;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x80DE;&#x5185; Ca2 + &#x7684;&#x4E0D;&#x53EF;&#x633D;&#x56DE;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x3002;

Stagnalis &#x7A3B;&#x7530;&#x690E;&#x5B9E;&#x87BA;&#x7684;&#x704C;&#x6CE8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x9499;&#x7535;&#x6D41;&#x7EF4;&#x6301;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;

Isolated nerve cell bodies from Lymnaea stagnalis were internally perfused and voltage-clamped. The magnitude of the Ca2+ current was monitored while perfusing with various intracellular solutions. When the intracellular perfusate was unenriched (containing only inorganic ions, 100 mM-HEPES and 5 mM-EGTA), the Ca2+ current was found to 'wash out', falling to half of its maximum value approximately 30-40 min from the beginning of perfusion. Stopping the flow of the perfusing solution increased this half-time to more than 50 min. The current-voltage relationship changed only slightly during wash-out. The addition of 2 mM-ATP and 1 mM-Mg2+ to the internal perfusate prevented, and even reversed, wash-out of the Ca2+ current. Both ATP and Mg2+ were necessary for maximal effect. Such current loss as occurred in the presence of ATP and Mg2+ was associated with a decrease in the capacitance of the cell and probably resulted from membrane being pulled into the pipette. The rate of inactivation of the Ca2+ current increased during perfusion with an unenriched internal solution, but decreased to initial values when ATP and Mg2+ were added to the internal perfusate. Although intracellular Mg2+ was necessary for the prevention of wash-out, levels higher than 1 mM had a blocking effect on the Ca2+ current. Certain factors that promote cyclic AMP-dependent protein phosphorylation (internal: cyclic AMP, theophylline and catalytic subunit of cyclic AMP-dependent protein kinase; external: dibutyryl cyclic AMP, 8-bromo cyclic AMP and forskolin) had no effect on the magnitude of the Ca2+ current in cells perfused with ATP and Mg2+. Externally applied theophylline blocked the Ca2+ current. The mechanism through which ATP and Mg2+ act to prevent wash-out of the Ca2+ current may be to enhance the ability of the cell to lower the Ca2+ concentration near the inner surface of the plasma membrane. This would prevent both the reversible block of Ca2+ current by intracellular Ca2+ and an irreversible loss of current due to high levels of intracellular Ca2+.

Intracellular factors for the maintenance of calcium currents in perfused neurones from the snail, Lymnaea stagnalis.

Corps de cellules nerveuses isol&eacute;es de Lymnaea stagnalis &eacute;taient int&eacute;rieurement perfus&eacute; et voltage clamp. L&#39;amplitude du courant Ca2 + a &eacute;t&eacute; suivie en perfusant avec diff&eacute;rentes solutions intracellulaires. Quand le perfusat intracellulaire &eacute;tait non enrichi (contenant seulement des ions inorganiques, 100 mM-HEPES et 5 mM-EGTA), le courant Ca2 + a &eacute;t&eacute; trouv&eacute; pour &laquo; laver &raquo;, tombant &agrave; la moiti&eacute; de son maximum valeur environ 30-40 min depuis le d&eacute;but de la perfusion. Arr&ecirc;ter l&#39;&eacute;coulement de la solution de perfusion augmente cette mi-temps &agrave; plus de 50 min. La relation courant-tension seulement l&eacute;g&egrave;rement chang&eacute; au cours de wash-out. L&#39;addition de 2 mM-ATP et 1 mM-Mg2 + au perfusat interne interdit et m&ecirc;me invers&eacute;, wash-out du courant Ca2 +. Les ATP et Mg2 + sont n&eacute;cessaires pour un effet maximal. Ces pertes courantes comme a eu lieu en pr&eacute;sence d&#39;ATP et Mg2 + a &eacute;t&eacute; associ&eacute;e &agrave; une diminution de la capacit&eacute; de la cellule et r&eacute;sulte probablement de la membrane &eacute;tant retir&eacute;e dans la pipette. Le taux d&#39;inactivation du Ca2 + actuelle a augment&eacute; au cours de la perfusion d&#39;une solution interne non enrichie, mais a diminu&eacute; aux valeurs initiales lorsque ATP et Mg2 + ont &eacute;t&eacute; ajout&eacute;s au perfusat interne. Bien que Mg2 + intracellulaire a &eacute;t&eacute; n&eacute;cessaire pour la pr&eacute;vention de wash-out, niveaux sup&eacute;rieurs &agrave; 1 mM avaient un effet de blocage sur le courant Ca2 +. Certains facteurs qui favorisent la phosphorylation des prot&eacute;ines d&eacute;pendante de l&#39;AMP cyclique (interne: AMP cyclique, la th&eacute;ophylline et la sous-unit&eacute; catalytique de la prot&eacute;ine kinase d&eacute;pendante de l&#39;AMP cyclique ; externe : dibutyryl AMP cyclique, 8-bromo AMP cyclique et la forskoline) n&#39;avait aucun effet sur l&#39;ampleur de la courant Ca2 + dans les cellules perfus&eacute;s avec l&#39;ATP et Mg2 +. Th&eacute;ophylline application externe bloqu&eacute; le courant Ca2 +. Le m&eacute;canisme par lequel ATP et Mg2 + agissent afin d&#39;emp&ecirc;cher de wash-out du courant Ca2 + peut &ecirc;tre d&#39;am&eacute;liorer la capacit&eacute; de la cellule d&#39;abaisser la concentration de Ca2 + pr&egrave;s de la surface interne de la membrane plasmique. Cela permettrait d&#39;&eacute;viter aussi bien le bloc r&eacute;versible de courant Ca2 + par le Ca2 + intracellulaire et une perte irr&eacute;versible de courant en raison des niveaux &eacute;lev&eacute;s de Ca2 + intracellulaire.

Facteurs intracellulaires pour le maintien des courants de calcium dans les neurones de l&#39;escargot, Lymnaea stagnalis perfus&eacute;s.

Isolierte Nerv Zelle K&ouml;rper von Spitzschlammschnecke waren intern durchblutete und Spannung eingeklemmt. Das Ausma&szlig; der aktuellen Ca2 + wurde &uuml;berwacht, w&auml;hrend perfusing mit verschiedenen intrazellul&auml;ren L&ouml;sungen. Als das intrazellul&auml;re Perfusat ausgestalteter (mit nur anorganische Ionen, 100 mM-HEPES und 5 mM-EGTA), der Ca2 +-Strom wurde festgestellt, dass &#39;waschen&#39;, auf die H&auml;lfte seiner maximalen Wert auf etwa 30-40 min vom Anfang der Perfusion. Anhalten der Str&ouml;mung der perfusing L&ouml;sung erh&ouml;ht diese Halbzeit um mehr als 50 min. Die Strom-Spannungs-Beziehung nur leicht ver&auml;ndert w&auml;hrend Wash-Out. Die Zugabe von 2 mM-ATP und 1 mM-Mg2 +, das interne Perfusat verhindert, und sogar stornierte, Waschen von der Ca2 +-Strom. ATP und Mg2 + waren notwendig f&uuml;r maximale Wirkung. Solche aktuellen Verlustpotential aufgetreten in Anwesenheit von ATP und Mg2 + war verbunden mit einem R&uuml;ckgang der Kapazit&auml;t der Zelle und wahrscheinlich resultiert aus der Membran in die Pipette gezogen. Die Rate der Inaktivierung des Ca2 + aktuelle w&auml;hrend der Perfusion mit einer ausgestalteten interne L&ouml;sung erh&ouml;ht, sondern vermindert sich auf die Anfangswerte ATP und Mg2 + die interne Perfusat hinzugef&uuml;gt wurden. Obwohl intrazellul&auml;ren Mg2 + der Verh&uuml;tung des Wash-Out war, hatte die Ebenen h&ouml;her als 1 mM eine blockierende Wirkung auf die Ca2 + aktuelle. Bestimmte Faktoren, die F&ouml;rderung von zyklischem AMP-abh&auml;ngige Proteinphosphorylierung (interne: zyklische AMP, Theophyllin und katalytische Untereinheit von zyklischem AMP-abh&auml;ngigen Proteinkinase; extern: Dibutyryl zyklischem AMP, 8-Bromo zyklischem AMP und Forskolin) hatte keine Auswirkungen auf das Ausma&szlig; des Ca2 + aktuelle in Zellen perfused mit ATP und Mg2 +. &Auml;u&szlig;erlich angewandte Theophyllin blockiert den Ca2 +-Strom. Der Mechanismus, durch den ATP und Mg2 + handeln, um die W&auml;sche von der Ca2 +-Strom zu verhindern, m&ouml;glicherweise die F&auml;higkeit der Zelle, die Ca2 + Konzentration nahe der inneren Oberfl&auml;che der Plasmamembran zu senken. Dies w&uuml;rde die reversible Block von Ca2 + aktuelle von intrazellul&auml;ren Ca2 + und ein unwiederbringlicher Verlust an aktuellen durch den hohen Grad der intrazellul&auml;ren Ca2 + verhindern.

Intrazellul&auml;re Faktoren f&uuml;r die Wartung von Kalzium Str&ouml;me im durchblutete Neuronen aus der Schnecke, Spitzschlammschnecke.

Corpi delle cellule nervose isolate da Lymnaea stagnalis erano internamente perfusi e tensione di serraggio. La grandezza della corrente Ca2 + &egrave; stata monitorata durante la perfusione con varie soluzioni intracellulari. Quando il perfusato intracellulare &egrave; stato attrezzato (contenente solo ioni inorganici, 100 mM-HEPES e 5 mM-EGTA), la corrente di Ca2 + &egrave; stata trovata per &#39;lavare&#39;, che cade a met&agrave; del suo massimo valore circa 30-40 min dall&#39;inizio della perfusione. Arrestare il flusso della soluzione perfusing aumentato questo tempo a pi&ugrave; di 50 min. La relazione corrente-tensione solo leggermente modificato durante il wash-out. L&#39;aggiunta di 2 mM-ATP e 1 mM-Mg2 + per il perfusato interno impediva e persino invertito, wash-out di corrente Ca2 +. ATP e Mg2 + sono stati necessari per effetto massimo. Tale perdita di corrente come si &egrave; verificato in presenza di ATP e Mg2 + &egrave; stato associato con una diminuzione della capacit&agrave; della cella e probabilmente &egrave; derivato dalla membrana viene tirato nella pipetta. Il tasso di inattivazione di Ca2 + corrente aumentato durante la perfusione con una soluzione interna attrezzata, ma ridotta a valori iniziali quando ATP e Mg2 + sono stati aggiunti il perfusato interno. Sebbene Mg2 + intracellulare &egrave; stato necessario per la prevenzione di wash-out, livelli superiori a 1 mM avevano un effetto di blocco sul Ca2 + corrente. Alcuni fattori che promuovono la fosforilazione della proteina AMP ciclico-dipendente (interno: AMP ciclico, teofillina e subunit&agrave; catalitica di AMP ciclico-dependent protein kinase; esterno: dibutyryl AMP ciclico, 8-bromo AMP ciclico e forskolina) ha avuto alcun effetto sulla grandezza del Ca2 + corrente nelle cellule perfusi con ATP e Mg2 +. Teofillina esternamente applicata bloccato la corrente di Ca2 +. Il meccanismo attraverso il quale ATP e Mg2 + agire per prevenire wash-out di corrente Ca2 + pu&ograve; essere per migliorare la capacit&agrave; della cellula di abbassare il Ca2 + concentrazione vicino alla superficie interna della membrana del plasma. Ci&ograve; impedirebbe sia il blocco reversibile di Ca2 + corrente di Ca2 + intracellulare e una perdita irreversibile di corrente a causa di livelli elevati di Ca2 + intracellulare.

Fattori intracellulari per la manutenzione delle correnti del calcio in neuroni perfusi dalla lumaca, Lymnaea stagnalis.

&#x5206;&#x96E2;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x4F53;&#x30E8;&#x30FC;&#x30ED;&#x30C3;&#x30D1;&#x30E2;&#x30CE;&#x30A2;&#x30E9;&#x30AC;&#x30A4;&#x304B;&#x3089;&#x5185;&#x90E8;&#x704C;&#x6D41;&#x3068;&#x96FB;&#x5727;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Ca 2 + &#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x306F;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092; perfusing &#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x30E2;&#x30CB;&#x30BF;&#x30FC;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x5B50;&#x304C;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D; (&#x7121;&#x6A5F;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x3001;100 mM &#x8ABF;&#x6574;&#x3068; 5 mM-egta &#x51E6;&#x7406;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x8457;&#x3057;&#x304F;&#x306E;&#x307F;&#x3092;&#x542B;&#x3080;) ca 2 + &#x96FB;&#x6D41; &#39;&#x3092;&#x6D17;&#x6D44;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F; &#39; &#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6700;&#x5927;&#x5024;&#x306E;&#x534A;&#x5206;&#x306B;&#x843D;&#x4E0B;&#x5024;&#x3092;&#x704C;&#x6D41;&#x306E;&#x5148;&#x982D;&#x304B;&#x3089;&#x7D04; 30-40 &#x5206;&#x3002;Perfusing &#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x6D41;&#x308C;&#x3092;&#x505C;&#x6B62;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x306E;&#x534A;&#x5206;&#x306E;&#x6642;&#x9593; 50 &#x5206;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x96FB;&#x6D41;-&#x96FB;&#x5727;&#x7279;&#x6027;&#x306F;&#x5C11;&#x3057;&#x3057;&#x304B;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x6D17;&#x6D44;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x4E2D;&#x3002;2 MM ATP &#x3068; 1 &#x30DF;&#x30EA;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;-mg 2 + &#x5185;&#x90E8;&#x5B50;&#x9632;&#x6B62;&#x3068;&#x3082;&#x9006;&#x3001;ca 2 + &#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x6D17;&#x6D44;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;ATP &#x3068; mg 2 + &#x6700;&#x5927;&#x52B9;&#x679C;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3068;&#x3057;&#x3066; ATP &#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x3001;mg 2 + &#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x5BB9;&#x91CF;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x30D4;&#x30DA;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x5F15;&#x3063;&#x5F35;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x819C;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3002;Ca 2 + &#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x7387;&#x306F;&#x3001;&#x8840;&#x6D41;&#x3001;unenriched &#x306E;&#x5185;&#x90E8;&#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x4E2D;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x304C; ATP &#x3068; mg 2 + &#x306B;&#x5185;&#x90E8;&#x306E;&#x5B50;&#x304C;&#x8FFD;&#x52A0;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x5024;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185; mg 2 + &#x6D17;&#x6D44;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x306E;&#x9632;&#x6B62;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;1 mM &#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x9AD8;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3001;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306B;&#x306F; ca 2 + &#x96FB;&#x6D41;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF; AMP &#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x8981;&#x56E0; &#xFF08;&#x5185;&#x90E8;&#xFF1A; cyclic AMP&#x3001;&#x30C6;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF; AMP &#x4F9D;&#x5B58;&#x578B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x89E6;&#x5A92;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;; &#x5916;&#x90E8;: &#x30B8;&#x30D6;&#x30C1;&#x30EA;&#x30EB;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A8;&#x30FC; &#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF; AMP&#x3001;8-&#x30D6;&#x30ED;&#x30E2; &#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF; AMP &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#xFF09; ATP &#x3068; mg 2 + &#x3092;&#x704C;&#x6D41;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185; ca 2 + &#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x5F71;&#x97FF;&#x306F;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5916;&#x90E8;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30C6;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EA;&#x30F3; ca 2 + &#x96FB;&#x6D41;&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;ATP &#x3068; mg 2 + ca 2 + &#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x6D17;&#x6D44;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x884C;&#x52D5;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306F; ca 2 + &#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x5185;&#x5074;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x8FD1;&#x3044;&#x539F;&#x5F62;&#x8CEA;&#x819C;&#x306E;&#x4E0B;&#x306B;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x4E0D;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x306A;&#x640D;&#x5931;&#x306F;&#x9AD8;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185; ca 2 + &#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x73FE;&#x5728;&#x3001;&#x5143;&#x306B;&#x623B;&#x305B;&#x308B;&#x72B6;&#x614B;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF; ca 2 + &#x96FB;&#x6D41;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185; ca 2 + &#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x3067;&#x3057;&#x3087;&#x3046;&#x3002;

&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x8981;&#x56E0;&#x30E8;&#x30FC;&#x30ED;&#x30C3;&#x30D1;&#x30E2;&#x30CE;&#x30A2;&#x30E9;&#x30AC;&#x30A4;&#x306E;&#x30AB;&#x30BF;&#x30C4;&#x30E0;&#x30EA;&#x304B;&#x3089;&#x704C;&#x6D41;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3002;

Lymnaea stagnalis&#xC5D0;&#xC11C; &#xC808;&#xC5F0; &#xB41C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xAD00; &#xB0B4;&#xBD80;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; perfused &#xBC0F; &#xC804;&#xC555; &#xACE0;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. Ca2 + &#xC804;&#xB958;&#xC758; &#xD06C;&#xAE30;&#xB294; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC73C;&#xB85C; perfusing &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; perfusate&#xB294; &#xB18D;&#xCD95; (&#xBB34;&#xAE30; &#xC774;&#xC628;, 100 mM HEPES &#xBC0F; 5 mM EGTA&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568;), Ca2 + &#xD604;&#xC7AC; &#39; &#xC53B;&#xC5B4; &#39; &#xBC1C;&#xACAC;, &#xAD00;&#xB958;&#xC758; &#xC2DC;&#xC791; &#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0;&#xC11C; 30-40 &#xBD84; &#xC57D; &#xAC12; &#xCD5C;&#xB300;&#xC758; &#xC808;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xB5A8;&#xC5B4;&#xC9C0;&#xACE0;. 50 &#xBD84; &#xC774;&#xC0C1; &#xD558;&#xD504; &#xD0C0;&#xC784;&#xC774; &#xC99D;&#xAC00; perfusing &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC758; &#xD750;&#xB984;&#xC744; &#xC911;&#xC9C0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC804;&#xB958;-&#xC804;&#xC555; &#xAD00;&#xACC4; &#xBCC0;&#xACBD;&#xB9CC; &#xC57D;&#xAC04; &#xC6CC;&#xC2DC; &#xC544;&#xC6C3; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;. 2 M m-ATP&#xC640; 1mm&#xC758; &#xCD94;&#xAC00;-Mg2 +&#xC744; &#xB9C9; &#xC558;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC2EC;&#xC9C0;&#xC5B4; &#xBC18;&#xC804;, Ca2 + &#xC804;&#xB958;&#xC758; &#xC6CC;&#xC2DC; &#xC544;&#xC6C3; &#xB0B4;&#xBD80; perfusate. ATP&#xC640; Mg2 + &#xCD5C;&#xB300; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC694; &#xD588;&#xB2E4;. ATP&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB85C; &#xD604;&#xC7AC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC190;&#xC2E4; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xACFC; Mg2 +&#xB294; &#xC140;&#xC758; &#xCEE4;&#xD328;&#xC2DC;&#xD134;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC18C;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xACE0; &#xC544;&#xB9C8; &#xACB0;&#xACFC; &#xD53C; &#xD3AB;&#xC5D0; &#xB04C;&#xB824;&#xAC00;&#xACE0; &#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C;. Ca2 + &#xD604;&#xC7AC; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC18D;&#xB3C4; unenriched &#xB0B4;&#xBD80; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xACFC; &#xAD00;&#xB958; &#xB3D9;&#xC548; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; ATP&#xC640; Mg2 + &#xB0B4;&#xBD80; perfusate&#xC5D0; &#xCD94;&#xAC00; &#xB41C; &#xACBD;&#xC6B0; &#xCD08;&#xAE30; &#xAC12;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC10;&#xC18C;. &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Mg2 + &#xC6CC;&#xC2DC; &#xC544;&#xC6C3;&#xC758; &#xC608;&#xBC29;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;, 1 m m &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; Ca2 + &#xD604;&#xC7AC; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC21C;&#xD658; &#xC570;&#xD504; &#xC885;&#xC18D; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xB294; &#xD2B9;&#xC815; &#xC694;&#xC18C; (&#xB0B4;&#xBD80;: theophylline &#xBC0F; &#xCD09;&#xB9E4; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xC21C;&#xD658; &#xC570;&#xD504; &#xC885;&#xC18D; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544;&#xC758; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC801; AMP; &#xC678;&#xBD80;: dibutyryl &#xC21C;&#xD658; &#xC570;&#xD504;, 8-&#xBE0C;&#xB85C; &#xBAA8; &#xC21C;&#xD658; &#xC570;&#xD504; &#xBC0F; forskolin) ATP&#xC640; Mg2 +&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xB07C;&#xC5B9;&#xB294;&#xB2E4; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; Ca2 + &#xD604;&#xC7AC; &#xD06C;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC544;&#xBB34;&#xB7F0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xC9C0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC678;&#xBD80;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xAC00; &#xB418; theophylline Ca2 + &#xC804;&#xB958;&#xB97C; &#xCC28;&#xB2E8;. ATP&#xC640; Mg2 +&#xB294; Ca2 + &#xC804;&#xB958;&#xC758; &#xC6CC;&#xC2DC; &#xC544;&#xC6C3; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC73C;&#xB824;&#xBA74; &#xD589;&#xB3D9; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC6D0;&#xD615;&#xC9C8; &#xB9C9;&#xC758; Ca2 + &#xB18D;&#xB3C4; &#xB0B4;&#xBD80; &#xD45C;&#xBA74; &#xADFC;&#xCC98; &#xB0AE;&#xC740; &#xC140;&#xC758; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xAC83;&#xC740; Ca2 +&#xC758; &#xD604;&#xC7AC; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca2 +&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC00;&#xC5ED; &#xBE14;&#xB85D; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca2 +&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xD574; &#xD604;&#xC7AC; &#xB3CC;&#xC774;&#xD0AC; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xCE7C;&#xC298; &#xC804;&#xB958;&#xC5D0; &#xB2EC;&#xD33D;&#xC774;, Lymnaea stagnalis&#xC5D0;&#xC11C; perfused &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC694;&#xC778;.

Cuerpos neurona aislada de Lymnaea stagnalis fueron internamente perfundidos y tensi&oacute;n fijada. La magnitud de la corriente de Ca2 + supervisaron mientras inunda con varias soluciones intracelulares. Cuando la soluci&oacute;n intracelular era no acondicionada (contiene solamente los iones inorg&aacute;nicos, 100 mM-HEPES y 5 mM-EGTA), encontraron a la corriente de Ca2 + para &#39;lavar&#39;, cayendo a la mitad de su m&aacute;ximo valor aproximadamente 30-40 minutos desde el comienzo de la perfusi&oacute;n. Detener el flujo de la soluci&oacute;n de perfusi&oacute;n hab&iacute;a aumentado este medio tiempo a m&aacute;s de 50 minutos. La relaci&oacute;n de corriente / tensi&oacute;n cambi&oacute; ligeramente durante el lavado. La adici&oacute;n de 2 mM-ATP y 1 mM-Mg2 + a la soluci&oacute;n interna prevenida e incluso invertida, derrubio de la corriente de Ca2 +. ATP y Mg2 + eran necesarias para el efecto m&aacute;ximo. P&eacute;rdida tan actual como ocurri&oacute; en presencia de ATP y Mg2 + fue asociada a una disminuci&oacute;n en la capacidad de la c&eacute;lula y probablemente result&oacute; de membrana succionada dentro de la pipeta. La tasa de inactivaci&oacute;n del Ca2 + actual aument&oacute; durante la perfusi&oacute;n con una soluci&oacute;n interna no acondicionada, pero disminuy&oacute; a valores iniciales cuando se agregaron a la soluci&oacute;n interna ATP y Mg2 +. Aunque intracelular Mg2 + era necesaria para la prevenci&oacute;n de lavado, niveles superiores a 1 mM ten&iacute;an un efecto de bloqueo en el Ca2 + actual. Algunos factores que promueven la fosforilaci&oacute;n de la prote&iacute;na dependiente de AMP c&iacute;clico (interno: AMP c&iacute;clico, teofilina y la subunidad catal&iacute;tica de la prote&iacute;na quinasa dependiente de AMP c&iacute;clico; externa: cyclophosphate AMP c&iacute;clico, 8-bromo AMP c&iacute;clico y forskoline) no tuvo efecto sobre la magnitud de la Ca2 + actual en c&eacute;lulas inundadas con ATP y Mg2 +. Aplicado externamente teofilina bloquea la corriente de Ca2 +. El mecanismo a trav&eacute;s del cual ATP y Mg2 + act&uacute;an para prevenir el derrubio de la corriente de Ca2 + puede ser mejorar la capacidad de la c&eacute;lula para bajar el Ca2 + concentraci&oacute;n cerca de la superficie interna de la membrana plasm&aacute;tica. Esto impedir&iacute;a el bloque reversible de Ca2 + actual por Ca2 + intracelular tanto una p&eacute;rdida irreversible de la corriente debido a altos niveles de Ca2 + intracelular.

Factores intracelulares para el mantenimiento de las corrientes de calcio en neuronas inundadas del caracol, Lymnaea stagnalis.

&#x5B64;&#x7ACB;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECE;&#x7A3B;&#x7530;&#x690E;&#x5B9E; stagnalis &#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x5185;&#x90E8;&#x704C;&#x6CE8;&#x53CA;&#x819C;&#x7247;&#x94B3;&#x6280;&#x672F;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5207;&#x9664;&#x7ECF;&#x5E38;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7535;&#x538B;&#x72EC;&#x7ACB; Ba2 +-27 pS &#x5728;&#x8D1F;&#x7535;&#x4F4D; (50 &#x6BEB;&#x7C73;) Ba2 + &#x5761;&#x7535;&#x5BFC;&#x900F;&#x6C34;&#x901A;&#x9053;&#x3002;&#x6B64;&#x901A;&#x9053;&#x4E0D;&#x662F;&#x5BF9;&#x5065;&#x5EB7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E0E;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x7535;&#x538B;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x9499;&#x901A;&#x9053;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x662F;&#x5B64;&#x7ACB;&#x7684;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x4E2D;&#x4E0D;&#x8010;&#x70ED;&#x3002;&#x901A;&#x9053;&#x5185;&#x5916;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x4E2D;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x662F;&#x53D7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x4E09;&#x78F7;&#x9178;&#x817A;&#x82F7;&#x3001; Ca2 + 1 &#x6BEB;&#x7C73;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x6216;&#x8425;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176;&#x7684;&#x50AC;&#x5316;&#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#xFF0C;&#x4F46;&#x53EF;&#x9006; millimolar &#x80DE;&#x5185; Ca2 + &#x6216; Ba2 + &#x88AB;&#x963B;&#x6B62;&#x3002;&#x901A;&#x9053;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7531;&#x4EFB;&#x4E00;&#x5185;&#x90E8;&#x704C;&#x6CE8;&#x9AD8; Ca2 + &#x6216;&#x957F;&#x671F;&#x7684;&#x5185;&#x90E8;&#x704C;&#x6CE8;&#x4F4E; Ca2 + &#x89E3;&#x4E0D;&#x542B; ATP &#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5728;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E0A;&#x7684;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6E20;&#x9053;&#x53EF;&#x80FD;&#x643A;&#x5E26;&#x5916;&#x6765; Ca2 + &#x5F53;&#x524D;&#x5BFC;&#x81F4;&#x589E;&#x52A0;&#x4E86;&#x84C4;&#x70ED;&#x5F0F;&#x4E2D;&#x80DE;&#x5185; Ca + &#x65F6;&#x8717;&#x725B;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x704C;&#x9AD8; Ca2 + &#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x3002;&#x9AD8;&#x5185;&#x90E8; Ca2 +&#xFF0C;&#x6216;&#x957F;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x5185;&#x90E8;&#x704C;&#x6CE8;&#x4E0E; ATP &#x514D;&#x8D39;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#xFF0C;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x589E;&#x52A0;&#x4F11;&#x606F; (-50 mV) &#x5168;&#x7EC6;&#x80DE; Ba2 + &#x7535;&#x5BFC;&#x3002;&#x6B64;&#x7535;&#x5BFC;&#x7387;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5173;&#x95ED;&#x7684;&#x80DE;&#x5185;&#x704C;&#x6D17;&#x6DB2;&#x56DE;&#x5230;&#x4F4E; Ca2 + &#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x5305;&#x542B; ATP &#x548C; Mg2 +&#x3002;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x9891;&#x9053;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x6709;&#x5BF9;&#x9762;&#x7684;&#x80DE;&#x5185;&#x6761;&#x4EF6;&#x5BF9;&#x7535;&#x538B;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x9499;&#x901A;&#x9053;&#x7684;&#x4F9D;&#x8D56;&#x3002;

&#x7535;&#x538B;&#x72EC;&#x7ACB;&#x94A1;&#x900F;&#x6C34;&#x901A;&#x9053;&#x7531;&#x5185;&#x90E8;&#x704C;&#x6CE8;&#x6216;&#x4FEE;&#x8865;&#x5207;&#x9664;&#x7A3B;&#x7530;&#x690E;&#x5B9E;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;

Isolated nerve cells from Lymnaea stagnalis were studied using the internal-perfusion and patch-clamp techniques. Patch excision frequently activated a voltage-independent Ba2+-permeable channel with a slope conductance of 27 pS at negative potentials (50 mM Ba2+). This channel is not seen in patches on healthy cells and, unlike the voltage-dependent Ca channel, is not labile in isolated patches. The activity of the channel in inside-out patches is unaffected by intracellular ATP, Ca2+ below 1 mM or the catalytic subunit of cAMP-dependent protein kinase but is reversibly blocked by millimolar intracellular Ca2+ or Ba2+. The channel can be activated in on-cell patches by either internal perfusion with high Ca2+ or the long-term internal perfusion of low Ca2+ solutions not containing ATP. These channels may carry the inward Ca2+ current which causes a regenerative increase in intracellular Ca+ when snail neurons are perfused with high Ca2+ solutions. High internal Ca2+, or long periods of internal perfusion with ATP-free solutions, induces an increase in a resting (-50 mV) whole-cell Ba2+ conductance. This conductance can be turned off by returning the intracellular perfusate to a low Ca2+ solution containing ATP and Mg2+. The activity of this channel appears to have an opposite dependence on intracellular conditions to that of the voltage-dependent Ca channel.

Voltage-independent barium-permeable channel activated in Lymnaea neurons by internal perfusion or patch excision.

Les cellules nerveuses isol&eacute;es de Lymnaea stagnalis ont &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;s en utilisant les techniques de perfusion interne et patch clamp. L&#39;excision patch activ&eacute; fr&eacute;quemment une tension ind&eacute;pendante Ba2 +-canal perm&eacute;able avec une conductance de 27 pS aux potentiels n&eacute;gatifs (Ba2 + 50 mM). Ce canal n&#39;est pas vu dans les patchs sur les cellules saines et, &agrave; la diff&eacute;rence du canal Ca voltage-d&eacute;pendants, n&#39;est pas labile dans des zones isol&eacute;es. L&#39;activit&eacute; du canal en patches inside-out n&#39;est pas affect&eacute;e par l&#39;ATP intracellulaire, Ca2 +, moins de 1 mM ou la sous-unit&eacute; catalytique de la prot&eacute;ine kinase cAMP-d&eacute;pendante, mais est r&eacute;versible bloqu&eacute;e par le Ca2 + intracellulaire millimolaires ou Ba2 +. Le canal peut &ecirc;tre activ&eacute; dans le cellule patches par chaque perfusion interne avec haut Ca2 + ou la perfusion interne &agrave; long terme de faibles Ca2 + solutions ne contenant ne pas d&#39;ATP. Ces canaux peut-&ecirc;tre transporter le courant Ca2 + entrant qui provoque une augmentation de la r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration Ca + intracellulaire des neurones d&#39;escargot sont perfus&eacute;s avec des solutions de Ca2 + haute. Haute interne Ca2 +, ou longues p&eacute;riodes de perfusion interne avec les solutions sans ATP, induit une augmentation un repos (-50 mV) conductance Ba2 + cellule enti&egrave;re. Cette conductance peut &ecirc;tre d&eacute;sactiv&eacute;e en retournant le perfusat intracellulaire &agrave; une faible Ca2 + solution contenant ATP et Mg2 +. L&#39;activit&eacute; de ce canal semble avoir une d&eacute;pendance inverse des conditions intracellulaires &agrave; celles du canal Ca voltage-d&eacute;pendants.

Tension ind&eacute;pendante canal perm&eacute;able au baryum activ&eacute; dans les neurones Lymnaea par excision de perfusion ou patch interne.

Isolierte Nervenzellen aus Spitzschlammschnecke wurden mit den internen-Perfusion und Patch-Clamp-Verfahren untersucht. Patch Exzision h&auml;ufig aktiviert ein Spannung-unabh&auml;ngige Ba2 +-durchl&auml;ssigen Kanal mit einer Steigung Leitwert von 27 pS bei negative Potentiale (50 mM Ba2 +). Dieser Kanal ist nicht aktiv in den Patches auf gesunde Zellen und im Gegensatz zu den Spannung-abh&auml;ngigen Ca-Kanal, nicht zersetzliche isoliert Patches. Die Aktivit&auml;t des Kanals Inside-Out-Patches ist unbeeinflusst von intrazellul&auml;ren ATP, Ca2 + unter 1 mM oder die katalytische Untereinheit der Lager-abh&auml;ngige Proteinkinase aber wird durch millimolar intrazellul&auml;ren Ca2 + oder Ba2 + reversibel blockiert. Der Kanal kann auf Zelle Patches von entweder interne Perfusion mit hoher Ca2 + oder die langfristige interne Perfusion der niedrigen Ca2 + L&ouml;sungen nicht mit ATP aktiviert werden. Diese Kan&auml;le k&ouml;nnen die nach innen Ca2 + aktuelle durchf&uuml;hren, die bewirkt eine regenerative Erh&ouml;hung der intrazellul&auml;ren Ca +, wenn Schnecke Neuronen mit hoher Ca2 + L&ouml;sungen perfused sind. Hohe interne Ca2 + oder l&auml;ngere interne Perfusion mit ATP-freie L&ouml;sungen, induziert eine Zunahme eine ruhelosigkeit (-50 mV) ganze-Zelle Ba2 + Leitwert. Dieser Leitwert abschaltbar durch R&uuml;ckgabe das intrazellul&auml;ren Perfusat zu einem niedrigen Ca2 +-L&ouml;sung mit ATP und Mg2 +. Die Aktivit&auml;t dieses Kanals scheint eine entgegengesetzte Abh&auml;ngigkeit von intrazellul&auml;ren Bedingungen dazu von der Spannung-abh&auml;ngigen Ca-Kanal haben.

Spannung-unabh&auml;ngige Barium-durchl&auml;ssigen Kanal durch interne Perfusion oder Patch Exzision in Lymnaea Neuronen aktiviert.

Cellule nervose isolate da Lymnaea stagnalis sono state studiate usando le tecniche di perfusione interna e patch-clamp. Patch escissione frequentemente attivato un indipendente dalla tensione di Ba2 +-canale permeabili con una conduttanza di pendenza 27 PS a potenziali negativi (50 mM Ba2 +). Questo canale non &egrave; visto in chiazze sulle cellule sane e, a differenza del canale Ca voltaggio-dipendenti, non &egrave; labile in zone isolate. L&#39;attivit&agrave; del canale in inside out patch &egrave; influenzato da ATP intracellulare, Ca2 + di sotto di 1 mM o la subunit&agrave; catalitica della chinasi di proteina accampamento-dipendente ma &egrave; bloccato reversibilmente da Ca2 + intracellulare millimolare o Ba2 +. Il canale pu&ograve; essere attivato in patch sulla cella o perfusione interna con alta Ca2 + o la perfusione interna a lungo termine del basse Ca2 + soluzioni non contenenti ATP. Questi canali possono trasportare il perfezionamento attivo Ca2 + corrente che determina un aumento rigenerativo intracellulare Ca + quando i neuroni di lumaca sono perfusi con alti Ca2 + soluzioni. Alta interna Ca2 +, o lunghi periodi di perfusione interna con soluzioni senza ATP, induce un aumento in un riposo (-50 mV) conduttanza Ba2 + cellule intere. Questa conduttanza pu&ograve; essere spento restituendo il perfusato intracellulare di un basso Ca2 + soluzione contenente ATP e Mg2 +. L&#39;attivit&agrave; di questo canale sembra avere un opposto dipendenza dalle condizioni intracellulari a quella del canale voltaggio-dipendenti Ca.

Indipendente dalla tensione di bario-permeabile canale attivato in Lymnaea neuroni da interno escissione di perfusione o patch.

&#x30E8;&#x30FC;&#x30ED;&#x30C3;&#x30D1;&#x30E2;&#x30CE;&#x30A2;&#x30E9;&#x30AC;&#x30A4;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x90E8;&#x704C;&#x6D41;&#x3068;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1; &#x30FB; &#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x5207;&#x9664;&#x304C;&#x983B;&#x7E41;&#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x96FB;&#x5727;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x3044; ba 2 +-27 pS &#x8CA0;&#x96FB;&#x4F4D; &#xFF08;50 mM ba 2 +&#xFF09; &#x3067;&#x306E;&#x659C;&#x9762;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30F3;&#x30B9;&#x3068;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306F;&#x5065;&#x5EB7;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x3067;&#x306F;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3001;&#x96FB;&#x4F4D;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x3001;&#x5B64;&#x7ACB;&#x306B;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C9; &#x30A2;&#x30A6;&#x30C8; &#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x5185;&#x306E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185; ATP&#x3001;ca 2 + 1 mM &#x4EE5;&#x4E0B;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x305F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x89E6;&#x5A92;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x306B;&#x7528;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185; ca 2 + &#x307E;&#x305F;&#x306F; ba 2 + &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x5185;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306B;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x5185;&#x90E8;&#x306E;&#x8840;&#x6D41;&#x3092;&#x9AD8; ca 2 + &#x3084; ATP &#x3092;&#x542B;&#x307E;&#x306A;&#x3044;&#x4F4E; ca 2 + &#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x5185;&#x90E8;&#x704C;&#x6D41;&#x3067;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x5185;&#x90E8; ca 2 &#x30AB;&#x30BF;&#x30C4;&#x30E0;&#x30EA; &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x9AD8; ca 2 + &#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x704C;&#x6D41;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x6642;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x5897;&#x52A0;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185; Ca + &#x3067;&#x767A;&#x751F; + &#x73FE;&#x5728;&#x904B;&#x3076;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9AD8;&#x5185;&#x90E8; ca 2 +&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5185;&#x90E8;&#x704C;&#x6D41; ATP &#x30D5;&#x30EA;&#x30FC; &#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068;&#x306E;&#x9577;&#x3044;&#x671F;&#x9593;&#x3001;&#x5B89;&#x9759;&#x6642;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B; (-50 mV) &#x5168;&#x4F53;&#x30BB;&#x30EB; ba 2 + &#x30B3;&#x30F3;&#x30C0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30F3;&#x30B9;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4F1D;&#x5C0E;&#x306F;&#x3001;&#x4F4E; ca 2 + &#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x542B;&#x3080; ATP&#x3001;mg 2 + &#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x5B50;&#x3092;&#x8FD4;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30AA;&#x30D5;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306F;&#x3001;&#x96FB;&#x4F4D;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x6761;&#x4EF6;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x53CD;&#x5BFE;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30E8;&#x30FC;&#x30ED;&#x30C3;&#x30D1;&#x30E2;&#x30CE;&#x30A2;&#x30E9;&#x30AC;&#x30A4;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x5185;&#x90E8;&#x704C;&#x6D41;&#x3084;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x306E;&#x5207;&#x9664;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x96FB;&#x5727;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3002;

Lymnaea stagnalis&#xC5D0;&#xC11C; &#xC808;&#xC5F0; &#xB41C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xB0B4;&#xBD80; &#xAD00;&#xB958; &#xBC0F; &#xD328;&#xCE58; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xACF5;&#xBD80; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC790;&#xC8FC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD328;&#xCE58; &#xC808;&#xB2E8; &#xC804;&#xC555;&#xC5D0; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; Ba2 +-&#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825; (50mm Ba2 +)&#xC5D0;&#xC11C; 27 Ps&#xC758; &#xC2AC;&#xB85C;&#xD504; &#xC804;&#xB3C4;&#xB3C4;&#xC640; &#xD22C;&#xACFC;&#xC131; &#xCC44;&#xB110;. &#xC774; &#xCC44;&#xB110;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC74;&#xAC15; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xD328;&#xCE58; &#xB098;&#xD0C0;&#xB098;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xC804;&#xC555; &#xC885;&#xC18D; Ca &#xCC44;&#xB110; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xC815;&#xD55C; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xD328;&#xCE58;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294;. &#xB0B4;&#xBD80;-&#xC544;&#xC6C3; &#xD328;&#xCE58;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC44;&#xB110; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; ATP, Ca2 + 1 m m &#xC544;&#xB798; &#xB610;&#xB294; &#xCEA0;&#xD504; &#xC885;&#xC18D; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544;&#xC758; &#xCD09;&#xB9E4; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC5ED; millimolar &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca2 + &#xB610;&#xB294; Ba2 +&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCC28;&#xB2E8; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCC44;&#xB110; &#xC911; &#xB0B4;&#xBD80; &#xAD00;&#xB958; &#xB192;&#xC740; Ca2 + &#xB610;&#xB294; ATP&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xB0AE;&#xC740; Ca2 + &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC758; &#xB0B4;&#xBD80; &#xC7A5;&#xAE30; &#xAD00;&#xB958;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC140;&#xC5D0; &#xD328;&#xCE58;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xCC44;&#xB110;&#xC740; &#xC548;&#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; Ca2 + &#xD604;&#xC7AC; &#xB2EC;&#xD33D;&#xC774; &#xC2E0;&#xACBD; &#xB192;&#xC740; Ca2 + &#xC194;&#xB8E8;&#xC158; &#xB07C;&#xC5B9;&#xB294;&#xB2E4;&#xB294; &#xB54C;&#xC5D0; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca + &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC99D;&#xAC00; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0A4;&#xB294; &#xC6D0;&#xC778;&#xC774; &#xB418;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB192;&#xC740; &#xB0B4;&#xBD80; Ca2 +, &#xB610;&#xB294; ATP &#xBB34;&#xB8CC; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xACFC; &#xB0B4;&#xBD80; &#xAD00;&#xB958;&#xC758; &#xC624;&#xB79C; &#xAE30;&#xAC04; &#xD734;&#xC2DD;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xC720;&#xB3C4; (-50 mV) &#xC804;&#xCCB4; &#xC140; Ba2 + &#xC804;&#xB3C4;&#xB3C4;. &#xC774; &#xC804;&#xB3C4;&#xC131;&#xC774; &#xB0AE;&#xC740; Ca2 + &#xC194;&#xB8E8;&#xC158; &#xD3EC;&#xD568; ATP&#xC640; Mg2 +&#xB97C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; perfusate&#xB97C; &#xBC18;&#xD658; &#xD558; &#xC5EC; &#xD574;&#xC81C;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC804;&#xC555; &#xC885;&#xC18D; Ca &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xBC18;&#xB300; &#xC758;&#xC874;&#xB3C4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC804;&#xC555;&#xC5D0; &#xAD00;&#xACC4; &#xC5C6;&#xC774; &#xD22C;&#xACFC;&#xC131; &#xBC14; &#xB968; &#xCC44;&#xB110; &#xB0B4;&#xBD80; &#xAD00;&#xB958; &#xB610;&#xB294; &#xD328;&#xCE58; &#xC808;&#xB2E8; &#xD558; &#xC5EC; Lymnaea &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

C&eacute;lulas nerviosas aisladas de Lymnaea stagnalis estudiaron usando las t&eacute;cnicas internas-perfusi&oacute;n y patch-clamp. Supresi&oacute;n de parche con frecuencia activa un voltaje independiente Ba2 +-canal permeable con una conductancia de la pendiente de 27 pS en potenciales negativos (50 mM Ba2 +). Este canal no se ve en parches en las c&eacute;lulas sanas y, a diferencia del canal dependientes de voltaje de Ca, no es l&aacute;bil en parches aislados. La actividad del canal en parches de adentro hacia afuera se ve afectada por la ATP intracelular, Ca2 + por debajo de 1 mM o la subunidad catal&iacute;tica de la prote&iacute;na quinasa dependiente de campo pero reversible est&aacute; bloqueada por milimolar Ca2 intracelulares + y Ba2 +. El canal puede activarse en parches en la celda o perfusi&oacute;n interna con alta Ca2 + o la perfusi&oacute;n interna a largo plazo de bajas Ca2 + soluciones que no contengan ATP. Estos canales pueden llevar el interior Ca2 + actual que causa un aumento regenerativo en CA intracelular + cuando las neuronas de caracol se perfusi&oacute;n con soluciones de Ca2 + alto. Alta interno Ca2 +, o largos per&iacute;odos de perfusi&oacute;n interna con soluciones libres de ATP, induce un aumento en reposo (-50 mV) celulares Ba2 + conductancia. Esta conductancia puede desactivarse devolviendo la soluci&oacute;n intracelular bajo Ca2 + ATP soluci&oacute;n conteniendo y Mg2 +. La actividad de este canal parece tener una dependencia opuesto en condiciones del canal voltaje-dependiente Ca intracelulares.

Independiente del voltaje canal permeable al bario activado en las neuronas stagnalis por escisi&oacute;n interna de perfusi&oacute;n o parche.

Abbiamo registrato delle correnti di membrana di cellule intere in risposta a esogenicamente applicata acetilcolina (ACh), nicotina, e 1,1 dimetil-4-fenil piperazinium ioduro sulle cellule gangliari retiniche enzimaticamente dissociato dalla retina goldfish. Applicazioni agonista indotta da risposte di tipo nicotinico nella maggioranza delle cellule quando le cellule sono state isolate in condizioni ottimali. Le correnti erano ricorda di tipo nicotinico ganglionica risposte. Misure di dose-risposta delle correnti indotte ACh indicano una EC50 di 52 microM e un coefficiente di Hill di 0,6. Correnti erano selettive per Na + Cl - e sono stati altamente interiormente che rettifica. Le risposte erano bloccate reversibilmente da d-tubocurarina, cloruro di hexamethonium e N-metil-D-glucamine. Nel 50% dei casi, alfa-bungarotoxin bloccato reversibilmente la corrente indotta dall&#39;applicazione di ACh. L&#39;azione di blocco di mecamylamine era irreversibile e indipendente dalla presenza di agonista ma pi&ugrave; efficacia in presenza di ACh. Concludiamo che funzionali recettori ACh nicotinici presenti sulla maggior parte delle cellule gangliari della retina di pesci rossi.

Cellule intere correnti attivate presso nicotinici acetilcolina recettori sulle cellule gangliari isolate dalla retina goldfish.

&#x6211;&#x3005; &#x306B;&#x5FDC;&#x3048;&#x3066;&#x5185;&#x751F;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3; (ACh)&#x3001;&#x30CB;&#x30B3;&#x30C1;&#x30F3;&#x3001;&#x5168;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x96FB;&#x6D41;&#x3092;&#x8A18;&#x9332;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x30E8;&#x30A6;&#x5316; piperazinium &#x30B8;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;-4-&#x30D5;&#x30A7;&#x30CB;&#x30EB; 1, 1 &#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x7684;&#x90E8;&#x5206;&#x304B;&#x3089;&#x89E3;&#x96E2;&#x91D1;&#x9B5A;&#x7DB2;&#x819C;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x9069;&#x306A;&#x6761;&#x4EF6;&#x306E;&#x4E0B;&#x3067;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8; &#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30CB;&#x30B3;&#x30C1;&#x30F3;&#x578B;&#x53CD;&#x5FDC;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x3067;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x96FB;&#x6D41;&#x578B;&#x30CB;&#x30B3;&#x30C1;&#x30F3;&#x6027;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x795E;&#x7D4C;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x9023;&#x60F3;&#x3055;&#x305B;&#x308B;.ACh &#x8A98;&#x8D77;&#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x7528;&#x91CF;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3001;52 microM &#x306E; ic50 &#x3067;&#x3001;0.6 &#x306E;&#x4E18;&#x4FC2;&#x6570;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x96FB;&#x6D41; Cl - &#x4E0A; Na + &#x3092;&#x9078;&#x629E;&#x3068;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5185;&#x5411;&#x304D;&#x6574;&#x6D41;&#x6027;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x3001;&#x5143;&#x306B;&#x623B;&#x305B;&#x308B;&#x72B6;&#x614B; d &#x30C4;&#x30DC;&#x30AF;&#x30E9;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;&#x30D8;&#x30AD;&#x30B5;&#x30E1;&#x30C8; &#x30CB;&#x30A6;&#x30E0;&#x5869;&#x5316;&#x7269;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; N &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;-D glucamine &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4F8B;&#x306E; 50 &#xFF05; &#x3067;&#x3001;&alpha;-&#x30D6;&#x30F3;&#x30AC;&#x30ED;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x306F;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x306B; ACh &#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x96FB;&#x6D41;&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Mecamylamine &#x306E;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x64CD;&#x4F5C;&#x306F;&#x4E0D;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x306A;&#x4F5C;&#x52D5;&#x85AC;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;ACh &#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x3088;&#x308A;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x91D1;&#x9B5A;&#x7DB2;&#x819C;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x30CB;&#x30B3;&#x30C1;&#x30F3;&#x6027;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x304C;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5168;&#x4F53;&#x30BB;&#x30EB;&#x96FB;&#x6D41;&#x304B;&#x3089;&#x91D1;&#x9B5A;&#x7DB2;&#x819C;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30CB;&#x30B3;&#x30C1;&#x30F3;&#x6027;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; exogenously &#xC801;&#xC6A9; &#xB41C; &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0; (ACh), &#xB2C8;&#xCF54;&#xD2F4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xCCB4; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9; &#xC804;&#xB958;&#xB97C; &#xAE30;&#xB85D; &#xD558; &#xACE0; &#xC694;&#xC624;&#xB4DC; &#xD654; &#xD398; &#xB2D0; &#xB514; &#xBA54; &#xD2F8;-4 piperazinium 1, 1 &#xB9DD;&#xB9C9; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC808; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; enzymatically&#xC5D0;&#xC11C; &#xD574;&#xB9AC; &#xAE08;&#xBD95;&#xC5B4; &#xB9DD;&#xB9C9;. &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xC140; &#xCD5C;&#xC801;&#xC758; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xB54C; &#xB300;&#xB2E4;&#xC218;&#xC758; &#xC140;&#xC5D0; nicotinic &#xD615;&#xC2DD; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4;. &#xC804;&#xB958; nicotinic &#xD615;&#xC2DD; ganglionic &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC5F0;&#xC0C1; &#xD588;&#xB2E4;. ACh &#xC720;&#xB3C4; &#xC804;&#xB958;&#xC758; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xC751;&#xB2F5; &#xCE21;&#xC815; &#xD45C;&#xC2DC;&#xC758; 52 microM EC50 &#xD790; &#xACC4;&#xC218; 0.6. &#xC804;&#xB958; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; Cl-Na +&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC18D;&#xC73C;&#xB85C; &#xC870;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC751;&#xB2F5; d tubocurarine, &#xB284; &#xC5FC;&#xD654; &#xBB3C;, &#xBC0F; N-&#xBA54; &#xD2F8;-D-glucamine&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5ED; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD588;&#xB2E4;. &#xACBD;&#xC6B0; 50%, &#xC54C;&#xD30C;-bungarotoxin &#xC5ED; ACh &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC804;&#xB958;&#xB97C; &#xCC28;&#xB2E8;. Mecamylamine&#xC758; &#xCC28;&#xB2E8; &#xB3D9;&#xC791; &#xB3CC;&#xC774;&#xD0AC; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294;, &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xC874;&#xC7AC;&#xC758; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC740; &#xD588;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB354; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; Ach&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5; nicotinic ACh &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xAE08;&#xBD95;&#xC5B4; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC808; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xACB0;&#xB860;.

&#xC804;&#xCCB4; &#xC140; &#xC804;&#xB958; nicotinic &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC808; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE08;&#xBD95;&#xC5B4; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xBD84;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x54CD;&#x5E94;&#x5916;&#x90E8;&#x5E94;&#x7528;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1; &#xFF08;ACh&#xFF09;&#xFF0C;&#x5C3C;&#x53E4;&#x4E01;&#xFF0C;&#x8BB0;&#x5F55;&#x5168;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x7535;&#x6D41;&#x548C; 1&#xFF0C;1 &#x4E8C;&#x7532;&#x57FA;-4-&#x82EF;&#x57FA; piperazinium &#x7898;&#x5BF9;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9176;&#x8131;&#x79BB;&#x91D1;&#x9C7C;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x3002;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x5E94;&#x7528;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x70DF;&#x78B1;&#x578B;&#x53CD;&#x5E94;&#x5728;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5F53;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x88AB;&#x9694;&#x79BB;&#x5728;&#x6700;&#x4F73;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3002;&#x7535;&#x6D41;&#x4F7F;&#x4EBA;&#x60F3;&#x8D77;&#x70DF;&#x78B1;&#x578B;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x54CD;&#x5E94;&#x3002;&#x5242;&#x91CF;-&#x53CD;&#x5E94;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684; ACh &#x8BF1;&#x53D1;&#x7535;&#x6D41;&#x8868;&#x793A; 52 microM &#x7684; EC50 &#x548C; 0.6 &#x5C71;&#x7CFB;&#x6570;&#x3002;&#x7535;&#x6D41;&#x662F;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x7684; Na + &#x5BF9; Cl-&#x548C;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x5185;&#x5FC3;&#x88AB;&#x7EA0;&#x6B63;&#x3002;D-&#x7B52;&#x7BAD;&#x6BD2;&#x78B1;&#x3001; &#x516D;&#x6C2F;&#x548C; N-&#x7532;&#x57FA;-D-&#x8461;&#x53EF;&#x9006;&#x88AB;&#x54CD;&#x5E94;&#x3002;50%&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x91D1;&#x73AF;&#x86C7;&#x53EF;&#x9006;&#x963B;&#x6B62;&#x5F53;&#x524D; ACh &#x5E94;&#x7528;&#x6240;&#x81F4;&#x3002;&#x7F8E;&#x52A0;&#x660E;&#x62E6;&#x622A;&#x52A8;&#x4F5C;&#x662F;&#x4E0D;&#x53EF;&#x9006;&#x8F6C;&#x7684;&#x548C;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x4FC3;&#x6548;&#x5242;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x4F46; ACh &#x66F4;&#x52A0;&#x6709;&#x6548;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x529F;&#x80FD;&#x70DF;&#x78B1;&#x578B;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x5B58;&#x5728;&#x4E8E;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x91D1;&#x9C7C;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

&#x5168;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7535;&#x6D41;&#x5728;&#x91D1;&#x9C7C;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x70DF;&#x78B1;&#x578B;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;

We have recorded whole-cell membrane currents in response to exogenously applied acetylcholine (ACh), nicotine, and 1,1 dimethyl-4-phenyl piperazinium iodide on retinal ganglion cells enzymatically dissociated from goldfish retina. Agonist applications induced nicotinic-type responses in a majority of cells when cells were isolated under optimal conditions. Currents were reminiscent of nicotinic-type ganglionic responses. Dose-response measurements of ACh-induced currents indicated an EC50 of 52 microM and a Hill coefficient of 0.6. Currents were selective for Na+ over Cl- and were highly inwardly rectifying. Responses were blocked reversibly by d-tubocurarine, hexamethonium chloride, and N-methyl-D-glucamine. In 50% of the cases, alpha-bungarotoxin reversibly blocked the current induced by ACh application. The blocking action of mecamylamine was irreversible and independent of the presence of agonist but was more effective in the presence of ACh. We conclude that functional nicotinic ACh receptors exist on most goldfish retinal ganglion cells.

Whole-cell currents activated at nicotinic acetylcholine receptors on ganglion cells isolated from goldfish retina.

Nous avons enregistr&eacute; les courants membranaires des cellules enti&egrave;res en r&eacute;ponse &agrave; exog&egrave;ne appliqu&eacute;e &agrave; l&#39;ac&eacute;tylcholine (ACh), la nicotine, et 1,1 dim&eacute;thyl-4-ph&eacute;nyl piperazinium iodure sur cellules ganglionnaires r&eacute;tiniennes enzymatiquement dissoci&eacute;e de r&eacute;tine de poisson rouge. Applications agoniste induit des r&eacute;ponses de type nicotinique dans la majorit&eacute; des cellules lorsque les cellules ont &eacute;t&eacute; isol&eacute;s dans des conditions optimales. Courants &eacute;taient r&eacute;miniscents de type nicotinique ganglionnaires r&eacute;ponses. Les mesures de dose-r&eacute;ponse des courants induite par l&#39;ACh indiquent une CE50 de microM 52 et un coefficient de Hill de 0,6. Courants sont s&eacute;lectives pour Na + Cl- et ont &eacute;t&eacute; fortement vers l&#39;int&eacute;rieur le. Les r&eacute;ponses ont &eacute;t&eacute; bloqu&eacute;s r&eacute;versible par la d-tubocurarine, chlorure d&#39;hexam&eacute;thonium et N-m&eacute;thyl-D-glucamine. Dans 50 % des cas, les alpha-bungarotoxine bloqu&eacute; r&eacute;versiblement le courant induit par l&#39;application d&#39;ACh. L&#39;action de blocage de la m&eacute;camylamine &eacute;tait irr&eacute;versible et ind&eacute;pendante de la pr&eacute;sence de l&#39;agoniste mais plus efficace en pr&eacute;sence de l&#39;ACh. Nous concluons que les r&eacute;cepteurs nicotiniques fonctionnels de ACh existent sur la plupart des cellules ganglionnaires r&eacute;tiniennes cyprin dor&eacute;.

Courants de cellules enti&egrave;res activ&eacute;s au niveau des r&eacute;cepteurs nicotiniques de l&#39;ac&eacute;tylcholine sur les cellules ganglionnaires isol&eacute;es de la r&eacute;tine de poisson rouge.

Haben wir ganz-Zellmembran Str&ouml;mungen als Reaktion auf exogen angewandte Acetylcholin (ACh), Nikotin, aufgezeichnet und 1,1 Dimethyl-4-Phenyl-Piperazinium-Iodid auf retinalen Ganglienzellen distanzierte enzymatisch von Goldfisch Netzhaut. Agonist Anwendungen induzierte nikotinische-Typ-Reaktionen in den meisten Zellen, wenn Zellen unter optimalen Bedingungen isoliert wurden. Str&ouml;mungen waren erinnert an nikotinische-Typ waren Antworten. Dosis-Wirkungs-Messungen der ACh-induzierte Str&ouml;me angegeben ein EC50 52 MicroM und ein Hill-Koeffizient von 0,6. Str&ouml;mungen waren &uuml;ber Cl - selektiv f&uuml;r Na + und waren sehr innerlich Rektifizieren. Antworten wurden von d-Tubocurarin, Hexamethonium Chlorid und N-Methyl-D-Glucamin reversibel blockiert. In 50 % der F&auml;lle blockiert Alpha-Bungarotoxin reversibel die aktuelle induziert durch ACh Anwendung. Die blockierende Wirkung von Mecamylamin war unumkehrbar und unabh&auml;ngig vom Vorhandensein von Agonist aber effektiver in Anwesenheit von ACh. Wir schlie&szlig;en, dass funktionale nikotinische ACh-Rezeptoren auf den meisten Goldfisch retinalen Ganglienzellen vorhanden.

Ganze Zelle Str&ouml;mungen nikotinische Acetylcholin-Rezeptoren in Ganglienzellen, die isoliert von Goldfisch Retina nicht aktiviert.

Hemos registrado corrientes de membrana de la c&eacute;lula entera en respuesta a ex&oacute;geno aplicada acetilcolina (ACh), nicotina, y 1,1 dimetil-4-fenil piperazinium yoduro en las c&eacute;lulas ganglionares de la retina enzim&aacute;ticamente disociado de la retina de peces de colores. Aplicaciones de agonista indujeron tipo nicot&iacute;nicos en la mayor&iacute;a de las c&eacute;lulas cuando se aislaron c&eacute;lulas en condiciones &oacute;ptimas. Las corrientes eran evocadores de tipo nicot&iacute;nicos ganglionares respuestas. Medidas de respuesta a la dosis de corrientes inducidas por ACh indican una EC50 de 52 microM y un coeficiente de Hill de 0,6. Corrientes fueron selectivas de Na + Cl- y fueron altamente interiormente rectificar. Las respuestas fueron bloqueadas reversible por d-tubocurarina cloruro de hexametonio y N-metil-D-glucamine. En el 50% de los casos, alfa-Bungarotoxina reversiblemente bloqueada la corriente inducida por aplicaci&oacute;n de ACh. La acci&oacute;n de bloqueo de la mecamilamina era irreversible e independiente de la presencia de agonista pero fue m&aacute;s efectiva en presencia de ACh. Concluimos que los receptores nicot&iacute;nicos funcionales de ACh existen en la mayor&iacute;a las c&eacute;lulas ganglionares de la retina de peces de colores.

Corrientes de celulares activadas en los receptores nicot&iacute;nicos de la acetilcolina en las c&eacute;lulas del ganglio aislados de la retina de peces de colores.

La comprensi&oacute;n de la liberaci&oacute;n de neurotransmisores en las sinapsis vertebradas ha sido obstaculizada por la escasez de los preparativos en el cual las corrientes i&oacute;nicas presin&aacute;pticas y postsin&aacute;pticas respuestas pueden ser supervisadas directamente. Utilizamos cultivadas embrionarios Xenopus uniones neuromusculares y procedimientos de corriente-grabaci&oacute;n simult&aacute;nea pre y postsin&aacute;pticos patch-clamp para identificar los principales conductancias presin&aacute;pticas subyacente a la iniciaci&oacute;n de la liberaci&oacute;n de neurotransmisores. Paso despolarizaciones y formas de onda de potencial de acci&oacute;n produce corrientes Na y K y Ca y K Ca-activado (KCa) corrientes. El inicio de la actual KCa hab&iacute;a precedido el pico del potencial de acci&oacute;n. La Ca predominante omega-CgTX GVIA-sensible actual ocurri&oacute; principalmente durante la fase de ca&iacute;da, pero tambi&eacute;n hubo importante Ca2 + entrada durante la fase ascendente del potencial de acci&oacute;n. La corriente postsin&aacute;ptica comenz&oacute; una media de 0,7 mseg despu&eacute;s del tiempo de la tasa m&aacute;xima de subida de la corriente de Ca. Omega-CgTX tambi&eacute;n bloqueado KCa corrientes y liberaci&oacute;n del transmisor durante un potencial de acci&oacute;n, lo que sugiere que los canales de Ca y KCa son colocalized en zonas activas presin&aacute;pticas. En experimentos de doble rampa voltaje-abrazadera, KCa activaci&oacute;n de canales se ha mejorado durante la segunda rampa. La constante de tiempo MS 1 del decaimiento del realce con el aumento del intervalo interpulse puede reflejar el curso temporal de la difusi&oacute;n/eliminaci&oacute;n de Ca2 + de sitios de liberaci&oacute;n de neurotransmisores o la desactivaci&oacute;n de KCa canales despu&eacute;s de un potencial de acci&oacute;n.

Dirigir medidas de calcio presin&aacute;ptico y corrientes de potasio activado por calcio regula la liberaci&oacute;n de neurotransmisores en las sinapsis de nervio-m&uacute;sculo cultivadas de Xenopus.

&#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x795E;&#x7ECF;&#x7A81;&#x89E6;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#x4E00;&#x76F4;&#x53D7;&#x5230;&#x7684;&#x7B79;&#x5907;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x4E2D;&#x7684;&#x79BB;&#x5B50;&#x7535;&#x6D41;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x548C;&#x7A81;&#x89E6;&#x540E;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x53EF;&#x4EE5;&#x76D1;&#x89C6;&#x76F4;&#x63A5;&#x532E;&#x4E4F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x80DA;&#x80CE;&#x795E;&#x7ECF;&#x808C;&#x8089;&#x63A5;&#x5934;&#x548C;&#x540C;&#x65F6;&#x524D;&#x548C;&#x7A81;&#x89E6;&#x540E;&#x819C;&#x7247;&#x94B3;&#x5F53;&#x524D;&#x5F55;&#x5236;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x6765;&#x6807;&#x8BC6;&#x57FA;&#x7840;&#x5F00;&#x59CB;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D; conductances&#x3002;&#x6B65; depolarizations &#x548C;&#x52A8;&#x4F5C;&#x7535;&#x4F4D;&#x6CE2;&#x5F62;&#x5F15;&#x8D77;&#x4E86; Na &#x548C; K &#x7535;&#x6D41;&#x4EE5;&#x53CA; Ca &#x548C; Ca &#x6FC0;&#x6D3B; K (&#x8BE5;&#x9879;&#x76EE;) &#x7535;&#x6D41;&#x3002;&#x8BE5;&#x9879;&#x76EE;&#x76EE;&#x524D;&#x7684;&#x53D1;&#x75C5;&#x4E4B;&#x524D;&#x52A8;&#x4F5C;&#x7535;&#x4F4D;&#x7684;&#x9AD8;&#x5CF0;&#x671F;&#x3002;&#x5F53;&#x524D;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x6B27;&#x7C73;&#x8304; CgTX GVIA &#x654F;&#x611F; Ca &#x4E3B;&#x8981;&#x9636;&#x6BB5;&#x53D1;&#x751F;&#x4E0B;&#x964D;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E5F;&#x6709;&#x5927;&#x91CF; Ca2 + &#x8FDB;&#x5165;&#x52A8;&#x4F5C;&#x7535;&#x4F4D;&#x7684;&#x4E0A;&#x5347;&#x9636;&#x6BB5;&#x3002;&#x7A81;&#x89E6;&#x540E;&#x7535;&#x6D41;&#x5F00;&#x59CB;&#x5E73;&#x5747; 0.7 &#x6BEB;&#x79D2;&#x540E;&#x5D1B;&#x8D77;&#x7684; Ca &#x5F53;&#x524D;&#x7684;&#x6700;&#x5927;&#x901F;&#x7387;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x3002;&#x6B27;&#x7C73;&#x8304; CgTX &#x8FD8;&#x963B;&#x6B62;&#x8BE5;&#x9879;&#x76EE;&#x7535;&#x6D41;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x91CA;&#x653E;&#x671F;&#x95F4;&#x52A8;&#x4F5C;&#x7535;&#x4F4D;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A; Ca &#x548C;&#x8BE5;&#x9879;&#x76EE;&#x7684;&#x6E20;&#x9053; colocalized &#x5728;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x6D3B;&#x52A8;&#x533A;&#x3002;&#x5728;&#x53CC;&#x5761;&#x9053;&#x7535;&#x538B;&#x94B3;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x9879;&#x76EE;&#x901A;&#x9053;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x589E;&#x5F3A;&#x671F;&#x95F4;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x531D;&#x9053;&#x3002;&#x8150;&#x70C2;&#x7684;&#x589E;&#x5F3A;&#x4E0E;&#x589E;&#x52A0;&#x8109;&#x65F6;&#x95F4;&#x95F4;&#x9694;&#x7684; 1 &#x6BEB;&#x79D2;&#x65F6;&#x95F4;&#x5E38;&#x6570;&#x53EF;&#x53CD;&#x6620;&#x8BE5;&#x9879;&#x76EE;&#x6E20;&#x9053;&#x7684;&#x5931;&#x6D3B;&#x6216;&#x6269;&#x6563;/&#x53BB;&#x9664; Ca2 + &#x4ECE;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x540E;&#x52A8;&#x4F5C;&#x7535;&#x4F4D;&#x3002;

&#x76F4;&#x63A5;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x9499;&#x548C;&#x9499;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x94BE;&#x7535;&#x6D41;&#x8C03;&#x8282;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x795E;&#x7ECF;-&#x808C;&#x8089;&#x7A81;&#x89E6;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x91CA;&#x653E;&#x3002;

The understanding of neurotransmitter release at vertebrate synapses has been hampered by the paucity of preparations in which presynaptic ionic currents and postsynaptic responses can be monitored directly. We used cultured embryonic Xenopus neuromuscular junctions and simultaneous pre- and postsynaptic patch-clamp current-recording procedures to identify the major presynaptic conductances underlying the initiation of neurotransmitter release. Step depolarizations and action potential waveforms elicited Na and K currents along with Ca and Ca-activated K (KCa) currents. The onset of KCa current preceded the peak of the action potential. The predominantly omega-CgTX GVIA-sensitive Ca current occurred primarily during the falling phase, but there was also significant Ca2+ entry during the rising phase of the action potential. The postsynaptic current began a mean of 0.7 msec after the time of maximum rate of rise of the Ca current. omega-CgTX also blocked KCa currents and transmitter release during an action potential, suggesting that Ca and KCa channels are colocalized at presynaptic active zones. In double-ramp voltage-clamp experiments, KCa channel activation is enhanced during the second ramp. The 1 msec time constant of decay of enhancement with increasing interpulse interval may reflect the time course of either the deactivation of KCa channels or the diffusion/removal of Ca2+ from sites of neurotransmitter release after an action potential.

Direct measurements of presynaptic calcium and calcium-activated potassium currents regulating neurotransmitter release at cultured Xenopus nerve-muscle synapses.

La compr&eacute;hension de la lib&eacute;ration des neurotransmetteurs au niveau des synapses vert&eacute;br&eacute;s a &eacute;t&eacute; entrav&eacute;e par l&#39;insuffisance des pr&eacute;parations dans lesquelles les courants ioniques pr&eacute;synaptiques et postsynaptiques r&eacute;ponses peuvent &ecirc;tre contr&ocirc;l&eacute;s directement. Nous avons utilis&eacute; des jonctions neuromusculaires Xenopus embryonnaires cultiv&eacute;es et les proc&eacute;dures d&#39;enregistrement courant simultan&eacute;e de pr&eacute;- et post-synaptiques patch-clamp pour identifier les conductances pr&eacute;synaptiques majeurs qui sous-tend l&#39;initiation de la lib&eacute;ration des neurotransmetteurs. &Eacute;tape d&eacute;polarisations et formes d&#39;onde des potentiels d&#39;action a suscit&eacute; des courants Na et K ainsi que Ca et K Ca-activ&eacute; (KCa) courants. L&#39;apparition du KCa actuel ont pr&eacute;c&eacute;d&eacute; le sommet du potentiel d&#39;action. Le courant de Ca surtout om&eacute;ga-CgTX GVIA sensibles ont eu lieu principalement pendant la phase de chute, mais il y avait aussi une entr&eacute;e importante du Ca2 + durant la phase ascendante du potentiel d&#39;action. Le courant postsynaptique a commenc&eacute; une moyenne de 0,7 msec apr&egrave;s l&#39;heure de la vitesse maximale de mont&eacute;e du courant Ca. om&eacute;ga-CgTX bloqu&eacute; aussi KCa courants et la sortie de l&#39;&eacute;metteur pendant un potentiel d&#39;action, ce qui sugg&egrave;re que les canaux Ca et KCa sont log&eacute;es &agrave; zones actives pr&eacute;synaptiques. Dans les exp&eacute;riences de voltage clamp double rampe, activation canal KCa est renforc&eacute;e au cours de la deuxi&egrave;me rampe. La constante de temps 1 msec de d&eacute;composition d&#39;am&eacute;lioration avec l&#39;intervalle inter-impulsions peut refl&eacute;ter l&#39;&eacute;volution temporelle de la diffusion/suppression du Ca2 + des sites de la lib&eacute;ration des neurotransmetteurs ou la d&eacute;sactivation des canaux KCa apr&egrave;s un potentiel d&#39;action.

Ordonner des mesures de calcium pr&eacute;synaptique et de courants activ&eacute;e par le calcium potassium r&eacute;gissant la lib&eacute;ration des neurotransmetteurs dans les synapses de nerf-muscle Xenopus cultiv&eacute;s.

Das Verst&auml;ndnis der Neurotransmitter-Freisetzung bei Wirbeltieren Synapsen hat durch die Mangel Vorbereitungen behindert in der pr&auml;synaptischen Ionische Str&ouml;mungen und postsynaptisches Antworten direkt &uuml;berwacht werden k&ouml;nnen. Wir verwendet kultivierten embryonalen Xenopus neuromuskul&auml;re Kreuzungen und gleichzeitige vor- und postsynaptisches Patch-Clamp-Strom-Aufnahme-Verfahren, um die gr&ouml;&szlig;eren pr&auml;synaptischen Conductances zugrunde liegt die Einleitung der Neurotransmitter-Freisetzung zu identifizieren. Schritt Depolarizations und Aktionspotential Wellenformen l&ouml;ste Na und K Str&ouml;mungen zusammen mit Ca und Ca-aktivierte K (KCa) Str&ouml;mungen. Beginn der KCa aktuelle voraus den H&ouml;hepunkt der Aktionspotential. Die aktuellen vorwiegend Omega-CgTX GVIA-Sensitive-Ca aufgetreten ist in erster Linie in der fallenden Phase, aber gab es auch bedeutende Ca2 + Eintrag in der steigenden Phase das Aktionspotenzial. Die postsynaptisches aktuelle begann einen Mittelwert von 0,7 msec nach der Zeit des H&ouml;chstsatzes des Aufstiegs des aktuellen Ca. Omega-CgTX blockiert auch KCa Str&ouml;mungen und Sender Release w&auml;hrend ein Aktionspotential, was darauf hindeutet, dass Ca und KCa-Kan&auml;le am pr&auml;synaptischen aktive Zonen colocalized sind. In Doppel-Rampe Spannung Klemm-Experimente ist KCa Kanal Aktivierung w&auml;hrend der zweiten Rampe erweitert. 1 Msec Zeitkonstante des Verfalls der Erweiterung mit zunehmender interpulse Intervall kann den zeitlichen Verlauf von der Deaktivierung der KCa-Kan&auml;le oder die Verbreitung bzw. Entfernen von Ca2 + von Seiten der Neurotransmitter-Freisetzung nach ein Aktionspotential zu ber&uuml;cksichtigen.

Direkte Messungen der pr&auml;synaptische Calcium und Kalium Kalzium aktivierte Str&ouml;mungen, die Regulierung der Neurotransmitter-Freisetzung bei kultivierten Xenopus-Nerven-Muskel-Synapsen.

La comprensione del rilascio di neurotrasmettitore alle sinapsi vertebrati &egrave; stata ostacolata dalla scarsit&agrave; di preparazioni in cui correnti ioniche presinaptiche e postsinaptiche risposte possono essere monitorate direttamente. Abbiamo usato la colture embrionale Xenopus giunzioni neuromuscolari e procedure correnti-registrazione simultanea pre e postsinaptiche patch-clamp per identificare i principali conductances presinaptica sottostante l&#39;avvio del rilascio di neurotrasmettitore. Passo depolarizations e forme d&#39;onda potenziale d&#39;azione ha suscitato le correnti di Na e K insieme a Ca e Ca-attivato K (KCa) correnti. L&#39;insorgenza di KCa corrente preceduto il picco del potenziale d&#39;azione. Ca prevalentemente omega-CgTX GVIA-sensibile corrente si &egrave; verificato soprattutto durante la fase di caduta, ma c&#39;era anche entrata Ca2 + significativo durante la fase di aumento del potenziale d&#39;azione. La corrente postsynaptic inizi&ograve; una media di 0,7 msec dopo il tempo del tasso massimo di aumento della corrente di Ca. Omega-CgTX bloccato anche le correnti KCa e rilascio del trasmettitore durante un potenziale d&#39;azione, suggerendo che i canali Ca e KCa sono colocalized a zone attive presinaptiche. In esperimenti di doppia rampa tensione-morsetto, attivazione canale KCa &egrave; migliorato durante la seconda rampa. La costante di tempo 1 msec di decadimento di un accessorio con l&#39;aumento dell&#39;intervallo di interpulse pu&ograve; riflettere il corso tempo di disattivazione della KCa canali o la diffusione/rimozione di Ca2 + dai siti di rilascio del neurotrasmettitore dopo un potenziale d&#39;azione.

Dirigere le misure del calcio presinaptico e le correnti del potassio calcio-attivati che regolano il rilascio di neurotrasmettitore alle sinapsi di nervo-muscolo Xenopus colte.

&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3067;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x653E;&#x51FA;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D;&#x306E;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x96FB;&#x6D41;&#x3068;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5FDC;&#x7B54;&#x304C;&#x76F4;&#x63A5;&#x76E3;&#x8996;&#x3059;&#x308B;&#x6E96;&#x5099;&#x306E;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x59A8;&#x3052;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x653E;&#x51FA;&#x306E;&#x57FA;&#x790E;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x57F9;&#x990A;&#x80DA;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x795E;&#x7D4C;&#x7B4B;&#x63A5;&#x5408;&#x90E8;&#x3068;&#x540C;&#x6642;&#x306E;&#x5F8C;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1; &#x30FB; &#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x96FB;&#x6D41;&#x8A18;&#x9332;&#x624B;&#x9806;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x5206;&#x6975;&#x3068;&#x6D3B;&#x52D5;&#x96FB;&#x4F4D;&#x6CE2;&#x5F62; Na &#x3068; K &#x306E;&#x96FB;&#x6D41;&#x3068;&#x5171;&#x306B; Ca &#x3068; Ca &#x6D3B;&#x6027;&#x5316; K (KCa) &#x96FB;&#x6D41;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;KCa &#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x767A;&#x75C7;&#x524D;&#x306B;&#x6D3B;&#x52D5;&#x96FB;&#x4F4D;&#x306E;&#x30D4;&#x30FC;&#x30AF;&#x3002;&#x4E3B;&#x306B;&#x843D;&#x4E0B;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x73FE;&#x5728;&#x4E3B;&#x306B;&#x30AA;&#x30E1;&#x30AC; CgTX GVIA &#x611F;&#x53D7;&#x6027; Ca &#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x6D3B;&#x52D5;&#x96FB;&#x4F4D;&#x306E;&#x7ACB;&#x3061;&#x4E0A;&#x304C;&#x308A;&#x6642;&#x306B;&#x3082;&#x91CD;&#x8981;&#x306A; ca 2 + &#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x96FB;&#x6D41;&#x306F;&#x3001;0.7 &#x306E;&#x610F;&#x5473;&#x3092;&#x59CB;&#x3081;&#x305F; msec &#x306E; Ca &#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x4E0A;&#x6607;&#x306E;&#x6700;&#x5927;&#x901F;&#x5EA6;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x5F8C;&#x3002;&#x30AA;&#x30E1;&#x30AC; CgTX &#x3082; KCa &#x96FB;&#x6D41;&#x3068;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x653E;&#x51FA; Ca &#x3068; KCa &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB; &#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x30BE;&#x30FC;&#x30F3;&#x3067;&#x7D50;&#x679C;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6D3B;&#x52D5;&#x96FB;&#x4F4D;&#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C0;&#x30D6;&#x30EB; &#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x96FB;&#x5727;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;, KCa &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x4E2D;&#x306B; 2 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Interpulse &#x9593;&#x9694;&#x3092;&#x5927;&#x304D;&#x304F;&#x3068;&#x5F37;&#x5316;&#x306E;&#x5D29;&#x58CA;&#x306E; 1 &#x30DF;&#x30EA;&#x79D2;&#x6642;&#x5B9A;&#x6570; KCa &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x975E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5316;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x62E1;&#x6563;/&#x524A;&#x9664;&#x306E; ca 2 + &#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x653E;&#x51FA;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x7D4C;&#x904E;&#x5F8C;&#x96FB;&#x4F4D;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x76F4;&#x63A5;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x524D;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9; &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x3068;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30AB;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x795E;&#x7D4C;&#x7B4B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3067;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E;&#x653E;&#x51FA;&#x3092;&#x898F;&#x5236;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xCC99;&#xCD94; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xBC29;&#xCD9C;&#xC758; &#xC774;&#xD574;&#xB294; &#xC774;&#xC628; &#xC804;&#xB958; presynaptic&#xACFC; postsynaptic &#xC751;&#xB2F5; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1;&#xD560; &#xC218; &#xC9C1;&#xC811; &#xC900;&#xBE44;&#xC758; &#xC18C;&#xC218;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC29;&#xD574; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xBC29;&#xCD9C;&#xC758; &#xAC1C;&#xC2DC;&#xB97C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC8FC;&#xC694; presynaptic conductances&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; &#xBC30;&#xC544; Xenopus &#xC2E0;&#xACBD; &#xADFC;&#xC721; &#xD559; &#xC811;&#xD569; &#xBC0F; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xC0AC;&#xC804; &#xBC0F; postsynaptic &#xD328;&#xCE58; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; &#xC804;&#xB958; &#xAE30;&#xB85D; &#xC808;&#xCC28;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E8;&#xACC4; depolarizations &#xBC0F; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC804;&#xC704; &#xD30C;&#xD615; Ca &#xD568;&#xAED8; Na&#xC640; K &#xC804;&#xB958; &#xBC0F; Ca &#xD65C;&#xC131;&#xD654; K (KCa) &#xC804;&#xB958; elicited. KCa &#xD604;&#xC7AC; &#xBC1C;&#xBCD1; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC804;&#xC704;&#xC758; &#xD53C;&#xD06C;&#xB97C; &#xC55E;. &#xD604;&#xC7AC; &#xC8FC;&#xB85C; &#xC624;&#xBA54;&#xAC00; CgTX GVIA &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; Ca &#xB5A8;&#xC5B4;&#xC9C0;&#xB294; &#xB2E8;&#xACC4; &#xB3D9;&#xC548; &#xC8FC;&#xB85C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB610;&#xD55C; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; Ca2 + &#xD56D;&#xBAA9; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC804;&#xC704;&#xC758; &#xC0C1;&#xC2B9; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB294;. Postsynaptic &#xD604;&#xC7AC; &#xC2DC;&#xC791; 0.7 &#xD3C9;&#xADE0; &#xBC00;&#xB9AC;&#xCD08;&#xC758; Ca &#xC804;&#xB958; &#xC0C1;&#xC2B9;&#xC758; &#xCD5C;&#xB300; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xC2DC;&#xAC04; &#xD6C4;. &#xC624;&#xBA54;&#xAC00; CgTX Ca &#xBC0F; KCa &#xCC44;&#xB110; presynaptic &#xD65C;&#xC131; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; colocalized&#xB294; &#xC81C;&#xC548; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC804;&#xC704; &#xC911; KCa &#xC804;&#xB958; &#xBC0F; &#xC1A1;&#xC2E0;&#xAE30; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xB3C4; &#xCC28;&#xB2E8;. &#xB354;&#xBE14; &#xB7A8;&#xD504; &#xC804;&#xC555; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; &#xC2E4;&#xD5D8; KCa &#xCC44;&#xB110; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC9C4;&#xC785;&#xB85C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. 1 &#xBC00;&#xB9AC;&#xCD08; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC0C1;&#xC218; interpulse &#xAC04;&#xACA9;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xD568;&#xAED8; &#xAC1C;&#xC120; &#xCDA9;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC804;&#xC704; &#xD6C4; KCa &#xCC44;&#xB110; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB610;&#xB294; &#xBCF4;&#xAE09;/&#xC81C;&#xAC70;&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xBC29;&#xCD9C;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; Ca2 +&#xC758; &#xC2DC;&#xAC04; &#xACFC;&#xC815;&#xC744; &#xBC18;&#xC601; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Presynaptic &#xCE7C;&#xC298;&#xACFC; &#xCE7C;&#xC298; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xCE7C;&#xB968; &#xC804;&#xB958; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; Xenopus &#xADFC;&#xC721; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xBC29;&#xCD9C; &#xADDC;&#xC81C;&#xC758; &#xCE21;&#xC815;&#xC744; &#xC9C1;&#xC811;.

Neurotransmitter release during action potentials is thought to require transient, localized [Ca2+]i as high as hundreds of micromolar near presynaptic release sites. Most experimental attempts to characterize the magnitude and time course of these Ca2+ domains involve optical methods that sample large volumes, require washout of endogenous buffers and often affect Ca2+ kinetics and transmitter release. Endogenous calcium-activated potassium (KCa) channels colocalize with presynaptic Ca2+ channels in Xenopus nerve-muscle cultures. We used these channels to quantify the rapid, dynamic changes in [Ca2+]i at active zones during synaptic activity. Confirming Ca2+-domain predictions, these KCa channels revealed [Ca2+]i over 100 microM during synaptic activity and much faster buildup and decay of Ca2+ domains than shown using other techniques.

Tracking presynaptic Ca2+ dynamics during neurotransmitter release with Ca2+-activated K+ channels.

&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x91CA;&#x653E;&#x52A8;&#x4F5C;&#x7535;&#x4F4D;&#x671F;&#x95F4;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x9700;&#x8981;&#x77ED;&#x6682;&#x6027;&#xFF0C;&#x672C;&#x5730;&#x5316; [Ca2 +] &#x6211;&#x9AD8;&#x8FBE;&#x6570;&#x5341;&#x4E07; micromolar &#x9644;&#x8FD1;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x7AD9;&#x70B9;&#x3002;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x6027;&#x5C1D;&#x8BD5;&#x63CF;&#x8FF0;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x57DF; Ca2 + &#x7684;&#x5E45;&#x5EA6;&#x548C;&#x65F6;&#x95F4;&#x8BFE;&#x7A0B;&#x6D89;&#x53CA;&#x5149;&#x5B66;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x6837;&#x672C;&#x91CF;&#x5F88;&#x5927;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981;&#x6C34;&#x6BC1;&#x7684;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x7F13;&#x51B2;&#x533A;&#x5E76;&#x4E14;&#x5F80;&#x5F80;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD; Ca2 + &#x53CD;&#x5E94;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x548C;&#x53D1;&#x5C04;&#x5668;&#x91CA;&#x653E;&#x3002;(&#x8BE5;&#x9879;&#x76EE;) &#x7684;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x9499;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x94BE;&#x901A;&#x9053; colocalize &#x7A81;&#x89E6;&#x524D; Ca2 + &#x901A;&#x9053;&#x5728;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x795E;&#x7ECF;&#x808C;&#x8089;&#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6E20;&#x9053;&#x6765;&#x91CF;&#x5316;&#x5FEB;&#x901F;&#x3001; &#x52A8;&#x6001;&#x53D8;&#x5316;&#x4E2D; [Ca2 +] &#x6211;&#x5728;&#x6D3B;&#x52A8;&#x533A;&#x7A81;&#x89E6;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x786E;&#x8BA4; Ca2 +-&#x57DF;&#x7684;&#x9884;&#x8A00;&#xFF0C;&#x63ED;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8BE5;&#x9879;&#x76EE;&#x6E20;&#x9053; [Ca2 +] &#x6211;&#x8D85;&#x8FC7; 100 microM &#x671F;&#x95F4;&#x7A81;&#x89E6;&#x6D3B;&#x52A8;&#x548C;&#x5F88;&#x591A;&#x66F4;&#x5FEB;&#x5730;&#x79EF;&#x805A;&#x548C;&#x8150;&#x70C2;&#x7684; Ca2 + &#x6BD4;&#x4F7F;&#x7528;&#x5176;&#x4ED6;&#x6280;&#x672F;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x57DF;&#x3002;

&#x8DDF;&#x8E2A;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D; Ca2 + &#x4E0E; Ca2 + &#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x52A8;&#x6001;-&#x6FC0;&#x6D3B; K + &#x901A;&#x9053;&#x3002;

La lib&eacute;ration des neurotransmetteurs dans les potentiels d&#39;action semble exiger transitoire, localis&eacute; [Ca2 +], j&#39;ai aussi hauts que des centaines de micromolaires pr&egrave;s pr&eacute;synaptique sites de lib&eacute;ration. Des tentatives plus exp&eacute;rimentales pour caract&eacute;riser le cours d&#39;amplitude et le temps de ces domaines de Ca2 + impliquent des m&eacute;thodes optiques que l&#39;&eacute;chantillon de grands volumes, exigent l&#39;affouillement des tampons endog&egrave;nes et affectent souvent la lib&eacute;ration de Ca2 + cin&eacute;tique et &eacute;metteur. Canaux potassiques activ&eacute;s par le calcium-endog&egrave;ne (KCa) sont colocalis&eacute;es avec pr&eacute;synaptiques canaux Ca2 + dans les cultures de nerf-muscle Xenopus. Nous avons utilis&eacute; ces canaux pour quantifier la rapide, dynamique change [Ca2 +] i &agrave; zones actives pendant l&#39;activit&eacute; synaptique. Confirmant le Ca2 +-pr&eacute;dictions du domaine, ces canaux KCa a r&eacute;v&eacute;l&eacute; [Ca2 +] j&#39;ai plus de 100 microM durant l&#39;activit&eacute; synaptique et beaucoup plus rapide l&#39;accumulation et la d&eacute;composition des domaines Ca2 + que montr&eacute; &agrave; l&#39;aide d&#39;autres techniques.

Suivi pr&eacute;synaptique Ca2 + dynamique au cours de la neurotransmetteur release avec Ca2 +-K + canaux.

Neurotransmitter-Freisetzung w&auml;hrend der Aktionspotentiale wird angenommen, dass Transienten, erfordern lokalisiert [Ca2 +] ich so hoch wie Hunderte von micromolar pr&auml;synaptischen in der N&auml;he von Websites zu ver&ouml;ffentlichen. Die meisten experimentelle Versuche, die Helligkeit und Zeit nat&uuml;rlich dieser Ca2 +-Domains zu charakterisieren umfassen optische Verfahren, die gro&szlig;e Mengen probieren, erfordern Auswaschung der endogenen Puffer und oft beeinflussen Ca2 + Kinetik und Transmitter Freigabe. Endogene Kalzium aktivierte (KCa) Kaliumkan&auml;le colocalize mit pr&auml;synaptischen Ca2 +-Kan&auml;le in Xenopus-Nerven-Muskel-Kulturen. Wir diese Kan&auml;le genutzt, um die schnelle Quantifizierung dynamische &Auml;nderungen in [Ca2 +] i am aktiven Zonen w&auml;hrend synaptische Aktivit&auml;t. Best&auml;tigung Ca2 +-Dom&auml;ne Vorhersagen, diese KCa-Kan&auml;le offenbart [Ca2 +] ich &uuml;ber 100 MicroM w&auml;hrend synaptische Aktivit&auml;t und viel schneller Aufbau und Zerfall von Ca2 + Domains als mit anderen Techniken gezeigt.

Nachverfolgen von pr&auml;synaptischen Ca2 + release Dynamik w&auml;hrend der Neurotransmitter mit Ca2 +-aktivierte K +-Kan&auml;le.

Neurotrasmettitore rilascio durante il potenziale d&#39;azione &egrave; pensato per richiedere transitorio, localizzato [Ca2 +] i alto come centinaia delle micromolari vicino presinaptica rilasciare siti. Tentativi pi&ugrave; sperimentali per caratterizzare il corso di grandezza e tempo di questi domini Ca2 + coinvolgono metodi ottici che campionare grandi volumi, richiedono il dilavamento dei buffer endogeno e spesso colpiscono Ca2 + trasmettitore e cinetica di rilascio. Canali del potassio calcio-attivati endogeno (KCa) colocalize con presinaptiche Ca2 + canali in Xenopus culture nervo-muscolo. Abbiamo usato questi canali per quantificare il rapido, dinamico cambiamenti [Ca2 +] i a zone attive durante attivit&agrave; sinaptica. Conferma di Ca2 +-previsioni di dominio, questi canali KCa ha rivelati [Ca2 +] i sopra 100 microM durante attivit&agrave; sinaptica e molto pi&ugrave; veloce accumulo e deperimento del Ca2 + domini quanto indicato utilizzando altre tecniche.

Rilevamento presinaptica Ca2 + dinamica durante il neurotrasmettitore rilascio con Ca2 +-attivazione canali K +.

&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x653E;&#x51FA;&#x6D3B;&#x52D5;&#x96FB;&#x4F4D;&#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x306A;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B; [&#x306E; ca 2 + &#x79C1;&#x306F;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x306E;&#x4F55;&#x767E;&#x3082;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D;&#x8FD1;&#x304F;&#x9AD8;&#x3044;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;] &#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E; ca 2 + &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x3068;&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x6700;&#x3082;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684;&#x306A;&#x8A66;&#x307F;&#x306F;&#x5927;&#x91CF;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3001;&#x30A6;&#x30A9;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5; &#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x306E;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x30D0;&#x30C3;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3057;&#x3001;&#x3057;&#x3070;&#x3057;&#x3070; ca 2 + &#x52D5;&#x614B;&#x3068;&#x9001;&#x4FE1;&#x6A5F;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x5149;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x542B;&#x307F;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30AB;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0; (KCa) &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D;&#x306E; ca 2 + &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB; &#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x795E;&#x7D4C;&#x7B4B;&#x6587;&#x5316;&#x3092; colocalize &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x52D5;&#x7684;&#x5909;&#x66F4; [ca 2 +] &#x79C1;&#x306F;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x30BE;&#x30FC;&#x30F3;&#x3067;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3002;Ca 2 + &#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3059;&#x308B;-&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x4E88;&#x6E2C;&#x306F;&#x3001;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E; KCa &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB; [ca 2 +] &#x79C1;&#x306F; 100 &#x306E; microM &#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3068;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x9AD8;&#x901F;&#x306A;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3068;&#x4ED6;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x306E; ca 2 + &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x5D29;&#x58CA;&#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x3002;

&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D; ca 2 + &#x8FFD;&#x8DE1;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x52D5;&#x614B; ca 2 + &#x304C;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;-K + &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xBC29;&#xCD9C; &#xC791;&#xC5C5; &#xD6C4;&#xBCF4; &#xC911; &#xACFC;&#xB3C4; &#xD544;&#xC694; &#xC0DD;&#xAC01; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB098; &#xC218;&#xBC31; &#xAC1C;&#xC758; micromolar presynaptic &#xADFC;&#xCC98; &#xB192;&#xC740; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xCD9C;&#xC2DC; &#xB41C; [Ca2 +]. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; Ca2 + &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xD06C;&#xAE30; &#xBC0F; &#xC2DC;&#xAC04; &#xACFC;&#xC815;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC801;&#xC778; &#xC2DC;&#xB3C4; &#xB300;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xC0D8;&#xD50C; &#xC720;&#xC2E4; &#xC0DD; &#xBC84;&#xD37C;&#xB97C; &#xC694;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xC885;&#xC885; Ca2 + &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860; &#xBC0F; &#xC1A1;&#xC2E0;&#xAE30; &#xCD9C;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xAD11;&#xD559; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0DD; &#xCE7C;&#xC298; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xCE7C;&#xB968; (KCa) &#xCC44;&#xB110; Xenopus &#xC2E0;&#xACBD; &#xADFC;&#xC721; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; presynaptic Ca2 + &#xCC44;&#xB110; colocalize. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C;, &#xACC4;&#xB7C9; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xCC44;&#xB110; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB3D9;&#xC801; &#xBCC0;&#xACBD; [Ca2 +] i &#xD65C;&#xC131; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC911;. &#xD655;&#xC778; Ca2 +-&#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC608;&#xCE21;, &#xBC1D;&#xD600; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; KCa &#xCC44;&#xB110; [Ca2 +] &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; &#xD6E8;&#xC52C; &#xBE60;&#xB978; &#xC0C1;&#xC2B9; &#xBC0F; Ca2 + &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBCF4;&#xB2E4;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD45C;&#xC2DC;&#xC758; &#xB3D9;&#xC548; 100 microM &#xC774;&#xC0C1; &#xB098;.

Ca2 +&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xCD9C;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xC911; &#xC5ED;&#xD559; &#xCD94;&#xC801; presynaptic Ca2 +-K + &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Liberaci&oacute;n de neurotransmisores en potenciales de acci&oacute;n se cree que requieren transitorios, localizada [Ca2 +] tan altos como cientos de micromolar cerca presin&aacute;ptica eximo a sitios. Los intentos m&aacute;s experimentales para caracterizar el curso de tiempo y la magnitud de estos dominios de Ca2 + implican m&eacute;todos &oacute;pticos que grandes vol&uacute;menes de muestra, requiere lavado de b&uacute;feres end&oacute;genos y afectan a menudo Ca2 + transmisor y cin&eacute;tica de liberaci&oacute;n. Canales de potasio de activada por calcio end&oacute;geno (KCa) colocalize con presin&aacute;pticos canales de Ca2 + en las culturas de nervio-m&uacute;sculo de Xenopus. Utilizamos estos canales para cuantificar la r&aacute;pida y din&aacute;mica cambia en la [Ca2 +] i en zonas activas durante la actividad sin&aacute;ptica. Confirmando Ca2 +-predicciones de dominio, estos canales KCa reveladas [Ca2 +] i sobre 100 microM durante la actividad sin&aacute;ptica y mucho m&aacute;s r&aacute;pida acumulaci&oacute;n y decaimiento de Ca2 + dominios que otras t&eacute;cnicas.

Seguimiento presin&aacute;ptica Ca2 + din&aacute;mica durante el neurotransmisor liberar con Ca2 +-activa los canales de K +.

&#x4F7F;&#x7528;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x795E;&#x7ECF;&#x808C;&#x8089;&#x83CC;&#x7FA4;&#x53D8;&#x5316;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x5BA1;&#x67E5;&#x7684;&#x8D21;&#x732E;&#x7684;&#x9499;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x94BE; &#xFF08;K(Ca)) &#x6E20;&#x9053;&#x5411;&#x5355;&#x4E2A;&#x52A8;&#x4F5C;&#x7535;&#x4F4D;&#x8BF1;&#x53D1;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x89C4;&#x7BA1;&#x3002;&#x808C;&#x8089;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x9759;&#x8109;&#x66F2;&#x5F20;&#x76F4;&#x63A5;&#x4F7F;&#x7528;&#x819C;&#x7247;&#x94B3;&#x8BB0;&#x5F55;&#x6280;&#x672F;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#xFF0C;&#x4E0E; iberiotoxin &#x6216; charybdotoxin K(Ca) &#x6E20;&#x9053;&#x5C01;&#x9501;&#x4E0B;&#x8DCC;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x91CA;&#x653E; 35%&#x7684;&#x5E73;&#x5747;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6548;&#x679C;&#x9884;&#x8BA1;&#x5C06;&#x4F1A;&#x5F15;&#x8D77;&#x52A8;&#x4F5C;&#x7535;&#x4F4D;&#x590D;&#x6781;&#x7684;&#x540E;&#x671F;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x63A8;&#x6D4B;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x53D8;&#x5316;&#x662F;&#x56E0;&#x4E3A;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86;&#x9499;&#x901A;&#x5E38;&#x7531;&#x5728;&#x81F4;&#x94BE;&#x7535;&#x6D41;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E0E;&#x9499;&#x79BB;&#x5B50;&#x901A;&#x9053; co-localize &#x7684; K(Ca) &#x6E20;&#x9053;&#x5728;&#x6D3B;&#x52A8;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x672C;&#x5730;&#x6781;&#x5316;&#x589E;&#x5F3A;&#x578B;&#x7684;&#x9A71;&#x52A8;&#x529B;&#x3002;&#x652F;&#x6301;&#x8FD9;&#x4E00;&#x5047;&#x8BBE;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x8868;&#x660E;&#x5F53;&#x52A8;&#x4F5C;&#x7535;&#x4F4D;&#x6CE2;&#x5F62;&#x88AB;&#x7528;&#x4F5C;&#x7535;&#x538B;&#x94B3;&#x547D;&#x4EE4;&#xFF0C;&#x5F81;&#x6C42;&#x9499;&#x7535;&#x6D41;&#x7684;&#x9759;&#x8109;&#x66F2;&#x5F20;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6CE2;&#x5F62;&#x88AB;&#x6269;&#x5927;&#x4E86;&#xFF0C;&#x5F00;&#x59CB;&#x65F6;&#x52A8;&#x4F5C;&#x7535;&#x4F4D;&#x590D;&#x6781;&#x662F;&#x5B8C;&#x6210; 20%&#x65F6;&#xFF0C;&#x624D;&#x51CF;&#x5C11;&#x9AD8;&#x5CF0;&#x671F;&#x9499;&#x7535;&#x6D41;&#x3002;&#x4E0E;&#x9AD8;&#x5CF0;&#x9499;&#x7535;&#x6D41;&#xFF0C;&#x603B;&#x9499;&#x6D8C;&#x5165;&#x662F;&#x59CB;&#x7EC8;&#x5982;&#x4E00;&#x5730;&#x589E;&#x52A0;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x52A8;&#x4F5C;&#x7535;&#x4F4D;&#x6269;&#x5927;&#x3002;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5148;&#x524D;&#x62A5;&#x544A;&#x5C5E;&#x6027;&#x7684;&#x79BB;&#x5B50;&#x901A;&#x9053;&#xFF0C;&#x5FE0;&#x5B9E;&#x5730;&#x518D;&#x73B0;&#x9884;&#x6D4B;&#x5BF9;&#x52A8;&#x4F5C;&#x7535;&#x4F4D;&#x590D;&#x6781;&#x548C;&#x9499;&#x7535;&#x6D41;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x4ECE;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x9759;&#x8109;&#x66F2;&#x5F20;&#x5927;&#x7535;&#x5BFC; K(Ca) &#x6E20;&#x9053;&#x5355;&#x4E00;&#x52A8;&#x4F5C;&#x7535;&#x4F4D;&#x671F;&#x95F4;&#x901A;&#x8FC7;&#x6539;&#x53D8;&#x52A8;&#x4F5C;&#x7535;&#x4F4D;&#x590D;&#x6781;&#xFF0C;&#x901F;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x9AD8;&#x5CF0;&#x9499;&#x7535;&#x6D41;&#x7684;&#x5E45;&#x5EA6;&#x8C03;&#x8282;&#x53D8;&#x9001;&#x5668;&#x53D1;&#x884C;&#x89C4;&#x6A21;&#x3002;

&#x53D8;&#x9001;&#x5668;&#x91CA;&#x653E;&#x89C4;&#x4F8B;&#x4E2D;&#x57F9;&#x517B;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x795E;&#x7ECF;-&#x808C;&#x8089;&#x7A81;&#x89E6;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x9499;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x94BE;&#x7535;&#x6D41;&#x7684;&#x8D21;&#x732E;&#x3002;

Using Xenopus nerve-muscle co-cultures, we have examined the contribution of calcium-activated potassium (K(Ca)) channels to the regulation of transmitter release evoked by single action potentials. The presynaptic varicosities that form on muscle cells in these cultures were studied directly using patch-clamp recording techniques. In these developing synapses, blockade of K(Ca) channels with iberiotoxin or charybdotoxin decreased transmitter release by an average of 35%. This effect would be expected to be caused by changes in the late phases of action potential repolarization. We hypothesize that these changes are due to a reduction in the driving force for calcium that is normally enhanced by the local hyperpolarization at the active zone caused by potassium current through the K(Ca) channels that co-localize with calcium channels. In support of this hypothesis, we have shown that when action potential waveforms were used as voltage-clamp commands to elicit calcium current in varicosities, peak calcium current was reduced only when these waveforms were broadened beginning when action potential repolarization was 20% complete. In contrast to peak calcium current, total calcium influx was consistently increased following action potential broadening. A model, based on previously reported properties of ion channels, faithfully reproduced predicted effects on action potential repolarization and calcium currents. From these data, we suggest that the large-conductance K(Ca) channels expressed at presynaptic varicosities regulate transmitter release magnitude during single action potentials by altering the rate of action potential repolarization, and thus the magnitude of peak calcium current.

Contribution of presynaptic calcium-activated potassium currents to transmitter release regulation in cultured Xenopus nerve-muscle synapses.

&Agrave; l&#39;aide de Xenopus co-cultures de nerf-muscle, nous avons examin&eacute; l&#39;apport de potassium activ&eacute;s par le calcium (K(Ca)) des canaux pour la r&eacute;gulation de la lib&eacute;ration des transmetteurs &eacute;voqu&eacute;e par les potentiels d&#39;action unique. Les varicosit&eacute;s pr&eacute;synaptiques qui se forment sur les cellules musculaires dans ces cultures ont &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;es directement &agrave; l&#39;aide de techniques d&#39;enregistrement patch clamp. Dans ces synapses en voie de d&eacute;veloppement, blocage des canaux de K(Ca) avec ib&eacute;riotoxine ou charybdotoxine ont diminu&eacute; la lib&eacute;ration de l&#39;&eacute;metteur de 35 % en moyenne. Cet effet devrait &ecirc;tre caus&eacute;e par des changements dans les phases de fin de repolarisation du potentiel d&#39;action. Nous &eacute;mettons l&#39;hypoth&egrave;se que ces modifications r&eacute;sultent d&#39;une r&eacute;duction de la force motrice pour le calcium qui est normalement renforc&eacute; par l&#39;hyperpolarisation locale &agrave; la zone active provoqu&eacute;e par le courant &agrave; travers les canaux K(Ca) qui colocalis&eacute;s avec les canaux calcium potassium. &Agrave; l&#39;appui de cette hypoth&egrave;se, nous avons montr&eacute; que lorsque les formes d&#39;onde des potentiels d&#39;action &eacute;taient utilis&eacute;s comme commandes de voltage clamp pour susciter le courant dans les varicosit&eacute;s calcium, calcium pic actuel a &eacute;t&eacute; r&eacute;duite uniquement lorsque ces signaux ont &eacute;t&eacute; &eacute;largis &agrave; compter du moment o&ugrave; la repolarisation du potentiel d&#39;action a &eacute;t&eacute; achev&eacute;e &agrave; 20 %. Contrairement au courant calcique de pic, influx de calcium total a &eacute;t&eacute; constamment accrue &eacute;largissement de potentiel d&#39;action suivants. Un mod&egrave;le fond&eacute; sur les propri&eacute;t&eacute;s des canaux ioniques, rapport&eacute;es ant&eacute;rieurement reproduit fid&egrave;lement les effets pr&eacute;vus sur le potentiel d&#39;action des courants calciques et de la repolarisation. D&#39;apr&egrave;s ces donn&eacute;es, nous sugg&egrave;rent que les canaux de K(Ca) grande conductance exprim&eacute;es lors des varicosit&eacute;s pr&eacute;synaptiques grandeur de sortie &eacute;metteur au cours des potentiels d&#39;action unique en modifiant la vitesse de repolarisation du potentiel d&#39;action et donc l&#39;importance du calcium de pointe actuel.

Contribution des courants pr&eacute;synaptique activ&eacute;e par le calcium potassium r&egrave;glement sortie &eacute;metteur dans les synapses de nerf-muscle Xenopus cultiv&eacute;s.

Mit Xenopus-Nerven-Muskel-Co-cultures, haben wir den Beitrag von Kalzium aktivierte Kalium (K(Ca)) Kan&auml;le f&uuml;r die Regulierung des Sender-Freigabe, hervorgerufen durch einzelne Aktionspotentiale. gepr&uuml;ft Die pr&auml;synaptische Varikose, die bilden auf Muskelzellen in diesen Kulturen wurden direkt mit Patch-Clamp-Aufnahmetechniken untersucht. Blockade der K(Ca) Kan&auml;le mit Iberiotoxin oder Charybdotoxin Sender Ver&ouml;ffentlichung in diesen Entwicklungsl&auml;ndern Synapsen verringerten durchschnittlich 35 %. Dieser Effekt w&uuml;rde erwarten, &uuml;ber &Auml;nderungen in den sp&auml;ten Phasen der Repolarisation Aktionspotential verursacht werden. Wir vermuten, dass diese &Auml;nderungen durch eine Reduzierung der treibende Kraft f&uuml;r Kalzium sind, die normalerweise durch die lokale Hyperpolarisation an der aktiven Zone verursacht durch Kalium Strom durch die K(Ca)-Kan&auml;le, die co-localize mit Kalzium-Kan&auml;len verbessert wird. Zur Unterst&uuml;tzung dieser Hypothese haben wir gezeigt, dass beim Aktionspotential Wellenformen zu Kalzium in Varikose aktuelle entlocken als Spannung Klemm-Befehle verwendet wurden, Spitze Kalzium aktuelle reduziert wurde, nur dann, wenn diese Wellenformen erweitert wurden, beginnend beim Aktionspotential Repolarisation 20 % abgeschlossen wurde. Im Gegensatz zu aktuellen H&ouml;hepunkt-Kalzium war total Kalzium Zustrom konsequent erh&ouml;hte folgende Aktionspotential Verbreiterung. Ein Modell, basierend auf bereits berichtet Eigenschaften der Ionenkan&auml;le, reproduziert originalgetreu prognostizierte Auswirkungen auf Aktionspotential Repolarisation und Kalzium Str&ouml;me. Aus diesen Angaben empfehlen wir die gro&szlig;en Leitwert K(Ca) Kan&auml;le ausgedr&uuml;ckt am pr&auml;synaptischen Varikose Sender Freigabe Helligkeit w&auml;hrend der einzelnen Aktionspotentiale zu regulieren, durch &Auml;nderung der Rate von Aktionspotenzial Repolarisation und damit das Ausma&szlig; der aktuellen H&ouml;hepunkt Kalzium.

Beitrag der pr&auml;synaptischen Kalzium aktivierte Kalium Str&ouml;me Sender Freigabe Regulation in kultivierten Xenopus-Nerven-Muskel-Synapsen.

Utilizzando co-cultures nervo-muscolo Xenopus, abbiamo esaminato l&#39;apporto di potassio calcio-attivati (K(Ca)) canali per la regolazione del rilascio del trasmettitore evocata dal singoli potenziale d&#39;azione. Le varicosit&agrave; presinaptica che si formano sulle cellule del muscolo in queste culture sono state studiate direttamente utilizzando tecniche di registrazione di patch-clamp. In queste sinapsi in via di sviluppo, blocco dei canali del K(Ca) con iberiotoxin o charybdotoxin &egrave; diminuito rilascio del trasmettitore in media del 35%. Questo effetto dovrebbe essere causato da cambiamenti nella fase tardiva della ripolarizzazione del potenziale d&#39;azione. Ipotizziamo che questi cambiamenti sono dovuti a una riduzione della forza motrice per il calcio che normalmente &egrave; rafforzata dal hyperpolarization locali presso la zona attiva causata da potassio corrente attraverso i canali di K(Ca) co-localize con canali di calcio. A sostegno di questa ipotesi, abbiamo dimostrato che quando le forme d&#39;onda potenziale d&#39;azione sono state usate come comandi di tensione-morsetto a suscitare calcio corrente in varicosit&agrave;, calcio picco corrente &egrave; stata ridotta solo quando queste forme d&#39;onda sono state ampliate all&#39;inizio quando ripolarizzazione del potenziale d&#39;azione &egrave; stato 20% completo. In contrasto con il calcio di punta corrente, afflusso di calcio totale &egrave; stato costantemente aumentato seguente ampliamento potenziale d&#39;azione. Un modello, basato sulle propriet&agrave; precedentemente segnalati di canali ionici, riprodotto fedelmente previsti effetti sul potenziale d&#39;azione correnti della ripolarizzazione e calcio. Da questi dati, si consiglia che i canali K(Ca) grande conduttanza espressi al presinaptico varicosit&agrave; regolano grandezza rilascio trasmettitore durante singoli potenziali d&#39;azione alterando il tasso di ripolarizzazione del potenziale d&#39;azione e cos&igrave; la grandezza del calcio di punta corrente.

Contributo delle correnti di potassio calcio-attivati presinaptica regolamento rilascio trasmettitore nelle sinapsi di nervo-muscolo Xenopus colte.

&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x795E;&#x7D4C;&#x7B4B;&#x5171;&#x57F9;&#x990A;&#x7CFB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30AB;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0; (K(Ca)) &#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3067; 1 &#x3064;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x96FB;&#x4F4D;&#x306E;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x653E;&#x51FA;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306F;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D; varicosities &#x306F;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1; &#x30FB; &#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x8A18;&#x9332;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;.&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x958B;&#x767A;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x5C01;&#x9396; K(Ca) &#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB; iberiotoxin &#x307E;&#x305F;&#x306F; charybdotoxin &#x306E;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x653E;&#x51FA;&#x306F;&#x5E73;&#x5747;&#x3067; 35% &#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x518D;&#x5206;&#x6975;&#x96FB;&#x4F4D;&#x306E;&#x5F8C;&#x671F;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x898B;&#x8FBC;&#x307F;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x901A;&#x5E38;&#x30AB;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0; co-localize K(Ca) &#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3067;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x6D41;&#x308C;&#x308B;&#x96FB;&#x6D41;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x30BE;&#x30FC;&#x30F3;&#x306B;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x904E;&#x5206;&#x6975;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9AD8;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x539F;&#x52D5;&#x529B;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x6D3B;&#x52D5;&#x96FB;&#x4F4D;&#x6CE2;&#x5F62;&#x96FB;&#x5727;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7; &#x30B3;&#x30DE;&#x30F3;&#x30C9;&#x3068;&#x3057;&#x3066; varicosities &#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x51FA;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306F;&#x3001;&#x306E;&#x307F;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6CE2;&#x5F62;&#x306F;&#x3001;&#x518D;&#x5206;&#x6975;&#x96FB;&#x4F4D; 20% &#x5B8C;&#x4E86;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x304B;&#x3089;&#x5E83;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x30D4;&#x30FC;&#x30AF; &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x96FB;&#x6D41;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x30D4;&#x30FC;&#x30AF; &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6D41;&#x5165;&#x306F;&#x4E00;&#x8CAB;&#x3057;&#x3066;&#x5897;&#x52A0;&#x6B21;&#x6D3B;&#x52D5;&#x96FB;&#x4F4D;&#x306E;&#x62E1;&#x5927;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3; &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x4E88;&#x6E2C;&#x5F71;&#x97FF;&#x6D3B;&#x52D5;&#x96FB;&#x4F4D;&#x5206;&#x6975;&#x3068;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x96FB;&#x6D41;&#x3092;&#x5FE0;&#x5B9F;&#x306B;&#x518D;&#x73FE;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x304B;&#x3089;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D; varicosities &#x3067;&#x8868;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x5927;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30F3;&#x30B9; K(Ca) &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x4E2D;&#x306B; 1 &#x3064;&#x306E;&#x96FB;&#x4F4D;&#x96FB;&#x4F4D;&#x5206;&#x6975;&#x7387;&#x3068;&#x30D4;&#x30FC;&#x30AF; &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x3092;&#x5909;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x9001;&#x4FE1;&#x6A5F;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x3092;&#x8ABF;&#x6574;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x9001;&#x4FE1;&#x6A5F;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x898F;&#x5236;&#x57F9;&#x990A;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x795E;&#x7D4C;&#x7B4B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30AB;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x8CA2;&#x732E;&#x3002;

Xenopus &#xC2E0;&#xACBD; &#xADFC;&#xC721; co-cultures&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCE7C;&#xC298; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xCE7C;&#xB968; (&#xB2E8;&#xC77C; &#xC791;&#xC5C5; &#xD6C4;&#xBCF4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; evoked &#xC1A1;&#xC2E0;&#xAE30; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xC758; &#xADDC;&#xC815; K(Ca)) &#xCC44;&#xB110; &#xAE30;&#xC5EC; &#xAC80;&#xC0AC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADFC;&#xC721; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD615;&#xC131; presynaptic varicosities &#xD328;&#xCE58; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; &#xAE30;&#xB85D; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC9C1;&#xC811; &#xACF5;&#xBD80;&#xB97C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; iberiotoxin &#xB610;&#xB294; charybdotoxin K(Ca) &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xBD09;&#xC1C4; &#xC1A1;&#xC2E0;&#xAE30; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xB97C; 35%&#xC758; &#xD3C9;&#xADE0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC561;&#xC158; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825; repolarization&#xC758; &#xD6C4;&#xBC18; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC778; &#xB41C; &#xAC83;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBCC0;&#xD654; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAE30;&#xC778;&#xD55C; &#xB2E4; &#xCE7C;&#xB968; &#xCE7C;&#xC298; &#xCC44;&#xB110; co-localize K(Ca) &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xD604;&#xC7AC; &#xD65C;&#xC131; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xB85C;&#xCEEC; hyperpolarization&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xCE7C;&#xC298;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6D0;&#xB3D9;&#xB825;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;&#xB294; &#xAC00;&#xC124;. &#xC774; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xC9C0; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8; &#xB54C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC804;&#xC704; &#xD30C;&#xD615; &#xC804;&#xC555; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; &#xBA85;&#xB839;&#xC73C;&#xB85C; &#xCE7C;&#xC298; varicosities&#xC5D0; &#xC804;&#xB958;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD55C;, &#xD53C;&#xD06C; &#xCE7C;&#xC298; &#xC804;&#xB958;&#xB294; &#xAC10;&#xC18C;&#xC774; &#xC6E8;&#xC774;&#xBE0C;&#xD3FC; &#xC2DC;&#xC791; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC804;&#xC704; repolarization&#xB294; 20% &#xC644;&#xB8CC; &#xB420; &#xB54C; &#xD655;&#xB300; &#xB41C; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC; &#xD53C;&#xD06C; &#xCE7C;&#xC298;, &#xB300;&#xC870; &#xCD1D; &#xCE7C;&#xC298; &#xC720;&#xC785; &#xC77C;&#xAD00; &#xB418; &#xAC8C; &#xC99D;&#xAC00; &#xB2E4;&#xC74C; &#xD589;&#xB3D9; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825; &#xD655;&#xB300; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC628; &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB41C; &#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xCDA9;&#xC2E4; &#xD558; &#xAC8C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC804;&#xC704; repolarization &#xBC0F; &#xCE7C;&#xC298; &#xC804;&#xB958;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC608;&#xC0C1;&#xB41C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC7AC;&#xD604;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD070; &#xC804;&#xB3C4;&#xB3C4; K(Ca) &#xCC44;&#xB110; presynaptic varicosities&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC804;&#xC704; repolarization&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xD604;&#xC7AC; &#xD53C;&#xD06C; &#xCE7C;&#xC298;&#xC758; &#xD06C;&#xAE30;&#xB97C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC791;&#xC5C5; &#xD6C4;&#xBCF4; &#xC911; &#xC1A1;&#xC2E0;&#xAE30; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xADDC;&#xBAA8; &#xADDC;&#xC81C;&#xB294; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xAD50;&#xC591;&#xB41C; Xenopus &#xC2E0;&#xACBD; &#xADFC;&#xC721; &#xB0C5;&#xC5D0; &#xC1A1;&#xC2E0;&#xAE30; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xADDC;&#xC815; &#xC804;&#xB958; presynaptic &#xCE7C;&#xC298; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xCE7C;&#xB968;&#xC758; &#xAE30;&#xC5EC;.

Usando Co-cultivos de nervio-m&uacute;sculo de Xenopus, hemos examinado el aporte de potasio activado por calcio (canales de K(Ca)) para la regulaci&oacute;n de la liberaci&oacute;n de transmisor evocada por potenciales de acci&oacute;n &uacute;nico. Las presin&aacute;pticas v&aacute;rices que se forman en las c&eacute;lulas musculares en estas culturas fueron estudiadas directamente utilizando t&eacute;cnicas de grabaci&oacute;n de patch-clamp. En estas sinapsis en desarrollo, bloqueo de canales de K(Ca) con iberiotoxin o charybdotoxin disminuido liberaci&oacute;n del transmisor en un promedio de 35%. Este efecto se espera para ser causado por cambios en las &uacute;ltimas fases de la repolarizaci&oacute;n del potencial de acci&oacute;n. Presumimos que estos cambios son debido a una reducci&oacute;n en la fuerza motriz de calcio que normalmente se ve reforzada por la hiperpolarizaci&oacute;n local en la zona activa causada por potasio actual a trav&eacute;s de los canales de K(Ca) que co-localizan con los canales de calcio. En apoyo de esta hip&oacute;tesis, hemos demostrado que cuando ondas de potencial de acci&oacute;n se utilizaron como comandos de voltaje-abrazadera para obtener calcio actual en v&aacute;rices, calcio pico actual se redujo s&oacute;lo cuando estas formas de onda se ampliaron comenzando cuando la repolarizaci&oacute;n del potencial de acci&oacute;n fue 20% completa. A diferencia de calcio pico actual, la afluencia de calcio total fue constantemente creciente ampliaci&oacute;n de potencial de acci&oacute;n siguientes. Un modelo, basado en propiedades previamente divulgados de los canales i&oacute;nicos, reproduce fielmente los efectos previstos en las corrientes de calcio y repolarizaci&oacute;n de potencial de acci&oacute;n. De estos datos, sugerimos que los canales de K(Ca) de gran conductancia expresados en v&aacute;rices presin&aacute;pticas regulan magnitud de liberaci&oacute;n del transmisor durante solos los potenciales de acci&oacute;n alterando la tasa de repolarizaci&oacute;n del potencial de acci&oacute;n y as&iacute; la magnitud de la corriente de calcio de pico.

Contribuci&oacute;n de corrientes de potasio activado por calcio presin&aacute;ptica a regulaci&oacute;n de liberaci&oacute;n de transmisor en sinapsis de nervio-m&uacute;sculo de Xenopus cultivadas.

&Acirc;g&eacute;s de 4 &agrave; 8 ans en fonction de la qualit&eacute; de leurs exp&eacute;riences pr&eacute;scolaires dans des centres de soins communautaires, apr&egrave;s ajustement pour le d&eacute;veloppement et la s&eacute;lection familiale facteurs qualit&eacute; li&eacute;s &agrave; la garde d&#39;enfants a &eacute;t&eacute; examin&eacute; le d&eacute;veloppement cognitif et socio-affectives de 733 enfants longitudinalement. Ces r&eacute;sultats d&eacute;montrent que la qualit&eacute; de garde d&#39;enfants a un l&eacute;ger effet &agrave; long terme sur les comportements de l&#39;enfant de cognitif et socio-affectives au moins par le biais de maternelle et dans certains cas, jusqu&#39;&agrave; la deuxi&egrave;me ann&eacute;e. Les effets diff&eacute;rentiels sur le d&eacute;veloppement de l&#39;enfant ont &eacute;t&eacute; trouv&eacute;s pour deux aspects de la qualit&eacute; de garde d&#39;enfants. Pratiques p&eacute;dagogiques observ&eacute;s &eacute;taient li&eacute;s &agrave; des enfants langue et comp&eacute;tences acad&eacute;miques, tandis que l&#39;&eacute;troitesse de la relation enseignant-enfant &eacute;tait reli&eacute;e &agrave; des comp&eacute;tences cognitives et sociales, avec des effets plus forts pour ces derniers. L&#39;influence mod&eacute;ratrice des caract&eacute;ristiques familiales ont &eacute;t&eacute; observ&eacute;s pour certains r&eacute;sultats, indiquant des effets positifs plus forts de la qualit&eacute; de garde d&#39;enfants pour les enfants issus de milieux &agrave; risque plus. Ces r&eacute;sultats contribuent davantage de preuve de l&#39;influence &agrave; long terme de la qualit&eacute; des milieux de garde d&#39;enfants sur les comp&eacute;tences cognitives et sociales des enfants &agrave; travers les ann&eacute;es de l&#39;&eacute;cole &eacute;l&eacute;mentaire et sont compatibles avec un mod&egrave;le bio&eacute;cologique de d&eacute;veloppement qui consid&egrave;re les multiples contextes environnementaux qu&#39;&eacute;prouve l&#39;enfant.

La relation entre qualit&eacute; de garde d&#39;enfants pr&eacute;scolaire aux cognitives et sociales trajectoires de d&eacute;veloppement enfants jusqu&#39;&agrave; la deuxi&egrave;me ann&eacute;e.

733 &#x513F;&#x7AE5;&#x7684;&#x8BA4;&#x77E5;&#x548C; socioemotional &#x53D1;&#x5C55;&#x4ECE;&#x5E74;&#x9F84; 4 &#x81F3; 8 &#x5E74;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x51FD;&#x6570;&#x7684;&#x8D28;&#x91CF;&#x7684;&#x793E;&#x533A;&#x6258;&#x513F;&#x4E2D;&#x5FC3;&#xFF0C;&#x5176;&#x5B66;&#x9F84;&#x524D;&#x7ECF;&#x9A8C;&#x540E;&#x8C03;&#x6574;&#x4E3A;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x9009;&#x62E9;&#x8D28;&#x91CF;&#x56E0;&#x7D20;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x513F;&#x7AE5;&#x4FDD;&#x80B2;&#x548C;&#x53D1;&#x5C55;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x7EB5;&#x5411;&#x7684;&#x68C0;&#x67E5;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x513F;&#x7AE5;&#x4FDD;&#x80B2;&#x8D28;&#x91CF;&#x5177;&#x6709;&#x9002;&#x5EA6;&#x7684;&#x957F;&#x671F;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x513F;&#x7AE5;&#x7684;&#x8BA4;&#x77E5;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x548C; socioemotional &#x53D1;&#x5C55;&#x81F3;&#x5C11;&#x901A;&#x8FC7;&#x5E7C;&#x513F;&#x56ED;&#xFF0C;&#x548C;&#x5728;&#x67D0;&#x4E9B;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x7B49;&#x7EA7;&#x3002;&#x5BF9;&#x513F;&#x7AE5;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x5DEE;&#x5F02;&#x5F71;&#x54CD;&#x627E;&#x6258;&#x513F;&#x8D28;&#x91CF;&#x4E24;&#x4E2A;&#x65B9;&#x9762;&#x3002;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x6559;&#x5BA4;&#x505A;&#x6CD5;&#x5747;&#x4E0E;&#x513F;&#x7AE5;&#x8BED;&#x8A00;&#x5B66;&#x672F;&#x6280;&#x80FD;&#xFF0C;&#x800C;&#x4EB2;&#x8FD1;&#x7684;&#x8001;&#x5E08;&#x4E0E;&#x5B50;&#x5973;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x88AB;&#x4E0E;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x8BA4;&#x77E5;&#x548C;&#x793E;&#x4F1A;&#x6280;&#x80FD;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x540E;&#x8005;&#x7684;&#x5F3A;&#x70C8;&#x6548;&#x679C;&#x3002;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x7279;&#x5F81;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x5F71;&#x54CD;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x67D0;&#x4E9B;&#x6210;&#x679C;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x98CE;&#x9669;&#x80CC;&#x666F;&#x513F;&#x7AE5;&#x6307;&#x793A;&#x513F;&#x7AE5;&#x4FDD;&#x80B2;&#x8D28;&#x91CF;&#x66F4;&#x6709;&#x529B;&#x7684;&#x79EF;&#x6781;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x8D28;&#x91CF;&#x7684;&#x513F;&#x7AE5;&#x4FDD;&#x80B2;&#x73AF;&#x5883;&#x5BF9;&#x513F;&#x7AE5;&#x7684;&#x8BA4;&#x77E5;&#x548C;&#x793E;&#x4F1A;&#x6280;&#x80FD;&#x5C0F;&#x5B66;&#x591A;&#x5E74;&#x6765;&#x957F;&#x671F;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x7B26;&#x5408;&#x751F;&#x7269;&#x751F;&#x6001;&#x5B66;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x6A21;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x513F;&#x7AE5;&#x7ECF;&#x9A8C;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x73AF;&#x5883;&#x4E0A;&#x4E0B;&#x6587;&#x3002;

&#x5BF9;&#x513F;&#x7AE5;&#x7684;&#x8BA4;&#x77E5;&#x548C;&#x793E;&#x4F1A;&#x53D1;&#x5C55;&#x8F68;&#x8FF9;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E8C;&#x5E74;&#x7EA7;&#x7684;&#x5B66;&#x9F84;&#x524D;&#x513F;&#x7AE5;&#x4FDD;&#x80B2;&#x8D28;&#x91CF;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;

The cognitive and socioemotional development of 733 children was examined longitudinally from ages 4 to 8 years as a function of the quality of their preschool experiences in community child-care centers, after adjusting for family selection factors related to child-care quality and development. These results provide evidence that child-care quality has a modest long-term effect on children's patterns of cognitive and socioemotional development at least through kindergarten, and in some cases, through second grade. Differential effects on children's development were found for two aspects of child-care quality. Observed classroom practices were related to children's language and academic skills, whereas the closeness of the teacher-child relationship was related to both cognitive and social skills, with the strongest effects for the latter. Moderating influences of family characteristics were observed for some outcomes, indicating stronger positive effects of child-care quality for children from more at-risk backgrounds. These findings contribute further evidence of the long-term influences of the quality of child-care environments on children's cognitive and social skills through the elementary school years and are consistent with a bioecological model of development that considers the multiple environmental contexts that the child experiences.

The relation of preschool child-care quality to children's cognitive and social developmental trajectories through second grade.

Die kognitive und Socioemotional Entwicklung von 733 Kindern wurde in L&auml;ngsrichtung von 4 bis 8 Jahren in Abh&auml;ngigkeit von der Qualit&auml;t ihrer vorschulischen Erfahrungen in der Kindererziehung Gemeindezentren, bereinigt um Familie Auswahl Faktoren im Zusammenhang mit der Kindererziehung Qualit&auml;t und Entwicklung untersucht. Diese Ergebnisse belegen, dass der Kindererziehung Qualit&auml;t eine bescheidene langfristige Wirkung auf Kinder Muster der kognitiven hat und Socioemotional Entwicklung am wenigsten durch Kindergarten, und in einigen F&auml;llen bis zur zweiten Klasse. Wirkungen auf die Entwicklung der Kinder wurden f&uuml;r zwei Aspekte der Kinderbetreuung Qualit&auml;t gefunden. Beobachteten Klassenzimmer Praktiken bezogen sich auf Kinder Sprache und akademischen F&auml;higkeiten, w&auml;hrend die N&auml;he der Lehrer-Kind-Beziehung mit sowohl kognitive und soziale F&auml;higkeiten, mit den st&auml;rksten Auswirkungen f&uuml;r letztere verwandt war. M&auml;&szlig;igenden Einfluss der Familie Merkmale wurden f&uuml;r manches Ergebnis angibt, st&auml;rkere positive Effekte der Kindererziehung Qualit&auml;t f&uuml;r Kinder mehr gef&auml;hrdeten Hintergrund beobachtet. Diese Erkenntnisse tragen weitere Beweise f&uuml;r die langfristige Einfl&uuml;sse der Qualit&auml;t der Kinderbetreuung Umgebungen auf Kinder kognitiven und sozialen F&auml;higkeiten im Laufe der Jahre Grundschule und stehen im Einklang mit einem Bio&ouml;kologische Entwicklungsmodell, die mehrere &ouml;kologische Kontexte ber&uuml;cksichtigt, die das Kind erlebt.

Die Beziehung der vorschulischen Kinderbetreuung Qualit&auml;t f&uuml;r Kinder kognitiven und sozialen Entwicklungsverl&auml;ufe bis zur zweiten Klasse.

Lo sviluppo cognitivo e socioemotional dei 733 bambini &egrave; stato esaminato longitudinalmente da 4 a 8 anni in funzione della qualit&agrave; delle loro esperienze prescolari in centri di comunit&agrave; per l&#39;infanzia, dopo la regolazione per sviluppo e selezione famiglia fattori relativi alla puericultura qualit&agrave; Evo. Questi risultati forniscono la prova che la qualit&agrave; per l&#39;infanzia ha un modesto effetto a lungo termine su modelli di bambini di cognitivo e lo sviluppo di socioemotional al minimo attraverso la scuola materna e in alcuni casi, attraverso il secondo grado. Differenziali effetti sullo sviluppo dei bambini sono stati trovati per due aspetti della qualit&agrave; per l&#39;infanzia. Aula osservato pratiche erano legate ai bambini competenze linguistiche e accademiche, considerando la vicinanza del rapporto insegnante-bambino era imparentata con competenze sia cognitive e sociali, con gli effetti pi&ugrave; forti per quest&#39;ultimo. Influenza moderatrice delle caratteristiche familiari sono stati osservati per alcuni risultati, indicando forti effetti positivi di qualit&agrave; per l&#39;infanzia per i bambini provenienti da ambienti pi&ugrave; a rischio. Queste scoperte contribuiscono ulteriormente prove delle influenze a lungo termine della qualit&agrave; degli ambienti per l&#39;infanzia, le abilit&agrave; cognitive e sociali dei bambini attraverso gli anni di scuola elementare e sono coerenti con il modello di sviluppo che considera pi&ugrave; contesti ambientali che il bambino sperimenta bioecologici.

Il rapporto di qualit&agrave; per l&#39;infanzia prescolare ai cognitivi e sociali dello sviluppo traiettorie bambini attraverso il secondo grado.

733 &#x5B50;&#x3069;&#x3082;&#x306E;&#x8A8D;&#x77E5;&#x3068;&#x793E;&#x4F1A;&#x7684;&#x611F;&#x60C5;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x306F;&#x7E26;&#x5E74;&#x9F62; 4 &#x301C; 8 &#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x8981;&#x56E0;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x80B2;&#x5150;&#x54C1;&#x8CEA;&#x3068;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8ABF;&#x6574;&#x5F8C;&#x6B73;&#x30B3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30CB;&#x30C6;&#x30A3;&#x4FDD;&#x80B2;&#x6240;&#x3067;&#x4FDD;&#x80B2;&#x5712;&#x306E;&#x7D4C;&#x9A13;&#x306E;&#x8CEA;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x304B;&#x3089;&#x80B2;&#x5150;&#x54C1;&#x8CEA;&#x5B50;&#x4F9B;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x8A8D;&#x77E5;&#x306E;&#x3055;&#x3055;&#x3084;&#x304B;&#x306A;&#x9577;&#x671F;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x793E;&#x4F1A;&#x7684;&#x611F;&#x60C5;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x3067;&#x5E7C;&#x7A1A;&#x5712;&#x3068;&#x7B2C; 2 &#x5E74;&#x751F;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;&#x3002;&#x5DEE;&#x5206;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x80B2;&#x5150;&#x54C1;&#x8CEA;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x5074;&#x9762;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6559;&#x5E2B;&#x3068;&#x5B50;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306E;&#x89AA;&#x5BC6;&#x3055;&#x3068;&#x3001;&#x5F8C;&#x8005;&#x306E;&#x6700;&#x5F37;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x8A8D;&#x77E5;&#x7684;&#x3001;&#x793E;&#x4F1A;&#x7684;&#x30B9;&#x30AD;&#x30EB;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x304A;&#x308A;, &#x89B3;&#x5BDF;&#x6388;&#x696D;&#x5B9F;&#x8DF5;&#x5B50;&#x4F9B;&#x306E;&#x8A00;&#x8A9E;&#x3068;&#x5B66;&#x8853;&#x306E;&#x30B9;&#x30AD;&#x30EB;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x5BB6;&#x65CF;&#x7279;&#x6027;&#x306E;&#x6E1B;&#x901F;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3088;&#x308A;&#x30EA;&#x30B9;&#x30AF;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x80CC;&#x666F;&#x304B;&#x3089;&#x5B50;&#x4F9B;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4FDD;&#x80B2;&#x306E;&#x8CEA;&#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x80AF;&#x5B9A;&#x7684;&#x306A;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x5C0F;&#x5B66;&#x6821;&#x5E74;&#x9593;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x5B50;&#x3069;&#x3082;&#x306E;&#x8A8D;&#x77E5;&#x3068;&#x793E;&#x4F1A;&#x7684;&#x30B9;&#x30AD;&#x30EB;&#x306B;&#x4FDD;&#x80B2;&#x74B0;&#x5883;&#x306E;&#x8CEA;&#x306E;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x5F71;&#x97FF;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x3001;&#x5B50;&#x4F9B;&#x306E;&#x7D4C;&#x9A13;&#x8907;&#x6570;&#x74B0;&#x5883;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x8003;&#x616E;&#x3057;&#x305F;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x65AC;&#x65B0;&#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x751F;&#x614B;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5B50;&#x4F9B;&#x306E;&#x8A8D;&#x77E5;&#x7684;&#x3001;&#x793E;&#x4F1A;&#x7684;&#x767A;&#x9054;&#x306E;&#x8ECC;&#x8DE1;&#x7B2C; 2 &#x5E74;&#x751F;&#x307E;&#x3067;&#x5E7C;&#x7A1A;&#x5712;&#x4FDD;&#x80B2;&#x54C1;&#x8CEA;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3002;

733 &#xC5B4;&#xB9B0;&#xC774;&#xC758; &#xC778;&#xC9C0;&#xC640; socioemotional &#xAC1C;&#xBC1C; longitudinally &#xC138; &#xAC00;&#xC871; &#xC120;&#xD0DD; &#xC694;&#xC778; &#xBCF4;&#xC721;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xD488;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC870;&#xC815; &#xD6C4; &#xCEE4;&#xBBA4;&#xB2C8;&#xD2F0; &#xBCF4;&#xC721; &#xC13C;&#xD130;&#xC5D0; &#xCDE8;&#xD559; &#xC804; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xACBD;&#xD5D8;&#xC758; &#xD488;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; 4 ~ 8 &#xB144;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC870;&#xC0AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; &#xBCF4;&#xC721; &#xD488;&#xC9C8; &#xC778;&#xC9C0;&#xC758; &#xC5B4;&#xB9B0;&#xC774; &#xD328;&#xD134;&#xC5D0; &#xACB8;&#xC190; &#xD55C; &#xC7A5;&#xAE30; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xBC0F; &#xAC1C;&#xBC1C; socioemotional &#xBC0F; &#xC77C;&#xBD80;&#xC758; &#xACBD;&#xC6B0;, 2 &#xD559;&#xB144;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC720;&#xCE58;&#xC6D0;, &#xD1B5;&#xD574; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4;. &#xC5B4;&#xB9B0;&#xC774; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xCC28;&#xB4F1; &#xC601;&#xD5A5; &#xBCF4;&#xC721; &#xD488;&#xC9C8;&#xC758; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAD00;&#xCC30;&#xB41C; &#xAD50;&#xC2E4; &#xC0AC;&#xB840; &#xC5B4;&#xB9B0;&#xC774; &#xC5B8;&#xC5B4;&#xC640; &#xD559;&#xB825;, &#xAD50;&#xC0AC;-&#xC544;&#xB3D9; &#xAD00;&#xACC4;&#xC758; &#xCE5C;&#xBC00;&#xAC10; &#xAC00;&#xC7A5; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD6C4;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC778;&#xC9C0; &#xBC0F; &#xC0AC;&#xD68C; &#xAE30;&#xC220;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBC18;&#xBA74; &#xAD00;&#xB828;&#xC774; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xAC00;&#xC871; &#xD2B9;&#xC131;&#xC758; &#xC911;&#xC7AC; &#xC601;&#xD5A5; &#xB354; &#xC704;&#xD5D8; &#xBC30;&#xACBD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5B4;&#xB9B0;&#xC774; &#xC704;&#xD55C; &#xBCF4;&#xC721; &#xD488;&#xC9C8;&#xC758; &#xAC15;&#xD55C; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xD6A8;&#xACFC; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xACB0;&#xACFC; &#xB300; &#xD55C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xCD08;&#xB4F1;&#xD559;&#xAD50; &#xB144;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC5B4;&#xB9B0;&#xC774; &#xC778;&#xC9C0; &#xBC0F; &#xC0AC;&#xD68C;&#xC801; &#xB2A5;&#xB825;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xC721; &#xD658;&#xACBD;&#xC758; &#xD488;&#xC9C8;&#xC758; &#xC7A5;&#xAE30;&#xC801;&#xC778; &#xC601;&#xD5A5;&#xC758; &#xC99D;&#xAC70; &#xCD94;&#xAC00; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558; &#xACE0; &#xC544;&#xC774;&#xAC00; &#xACBD;&#xD5D8; &#xD558;&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xD658;&#xACBD; &#xCEE8;&#xD14D;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xACE0;&#xB824; &#xD558;&#xB294; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; bioecological &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xB294;.

&#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xD559;&#xB144;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC5B4;&#xB9B0;&#xC774; &#xC778; &#xC9C0;&#xC801;, &#xC0AC;&#xD68C;&#xC801; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xADA4;&#xC801;&#xC744; &#xC720;&#xCE58;&#xC6D0; &#xBCF4;&#xC721; &#xD488;&#xC9C8;&#xC758; &#xAD00;&#xACC4;.

El desarrollo cognitivo y socioemocional de los 733 ni&ntilde;os fue examinado longitudinalmente de 4 a 8 a&ntilde;os en funci&oacute;n de la calidad de sus experiencias preescolares en centros de cuidado infantil, despu&eacute;s de ajustar para el desarrollo y calidad relacionada a guarder&iacute;a de factores de selecci&oacute;n familiar. Estos resultados proporcionan evidencia que la calidad de cuidado de ni&ntilde;os tiene un modesto efecto a largo plazo en los patrones infantiles de cognitivo y desarrollo socioemocional en por lo menos a trav&eacute;s del jard&iacute;n de la infancia y en algunos casos, hasta el segundo grado. Efectos diferenciales en el desarrollo de los ni&ntilde;os se encontraron dos aspectos de la calidad del cuidado infantil. Las pr&aacute;cticas de aula observada se relacionaron infantiles lengua y habilidades acad&eacute;micas, considerando la cercan&iacute;a de la relaci&oacute;n maestro-ni&ntilde;o estuvo relacionado con habilidades tanto cognitivas y sociales, con los efectos m&aacute;s fuertes para el &uacute;ltimo. Influencias moderadoras de las caracter&iacute;sticas familiares se observaron algunos resultados, indicando m&aacute;s fuertes efectos positivos de la calidad del cuidado infantil para ni&ntilde;os de m&aacute;s fondos en riesgo. Estos resultados contribuyen m&aacute;s evidencia de las influencias a largo plazo de la calidad de cuidado de ni&ntilde;os ambientes en habilidades cognitivas y sociales de ni&ntilde;os a trav&eacute;s de los a&ntilde;os de escuela primaria y son consistentes con un modelo bioecol&oacute;gica de desarrollo que considere los m&uacute;ltiples contextos ambientales que el ni&ntilde;o experimenta.

La relaci&oacute;n de calidad guarder&iacute;a preescolar a trayectorias de desarrollo cognitivo y social de ni&ntilde;os hasta el segundo grado.

Propiedades de canal &uacute;nico de canales de k Ca(2+)-activado (BK o Maxi-K) han sido investigados en las membranas presin&aacute;pticas en cultivos de c&eacute;lulas de m&uacute;sculo motoneurona Xenopus. La ocurrencia y la densidad de los canales BK aument&oacute; con maduraci&oacute;n/sinaptog&eacute;nesis y no fue uniformes: mayor en la cara de la liberaci&oacute;n de v&aacute;rices sin&aacute;pticas bouton-como en contacto con las c&eacute;lulas musculares y menor en v&aacute;rices que no contacto con las c&eacute;lulas musculares. La afinidad de la CA del canal (K(d) = 7.7 microM en un potencial de membrana de + 20 mV) fue inferior a los de los canales BK que se han caracterizado en otros terminales. Coeficientes de colina variaron entre 1.5 y 2.8 en diferentes potenciales y abierto probabilidad aumentada e veces por 16 mV cambio en el potencial de membrana en un rango de [Ca(2+)](i) de 1 microM a 1 mM. La tasa m&aacute;xima activaci&oacute;n de armados corrientes de canal BK solas estaba en la gama de submillisecond en &gt; = + 20 mV. La tasa de activaci&oacute;n aument&oacute; aproximadamente 10 veces en respuesta a una [Ca(2+)](i) aumentar de 1 a 100 microM, pero aument&oacute; s&oacute;lo aproximadamente 2 con un cambio de voltaje de + 20 a + 130 mV. La cin&eacute;tica de activaci&oacute;n m&aacute;s r&aacute;pida de los canales BK en parches de conexi&oacute;n celular asemej&oacute; en parches de adentro hacia afuera con [Ca(2+)](i) de microM 100 o m&aacute;s, lo que sugiere que muchos canales de BK se encuentra muy cerca de los canales de calcio. Dada la baja afinidad de CA y propiedades de uni&oacute;n/desuni&oacute;n de CA r&aacute;pidas, concluimos que los canales BK en esta preparaci&oacute;n se adaptan a desempe&ntilde;ar un papel importante en la regulaci&oacute;n de la liberaci&oacute;n de neurotransmisores, y son ideales reporteros locales [CA] en la superficie de la membrana interna.

Propiedades electrofisiol&oacute;gicas de los canales BK en Xenopus motor terminales nerviosos.

&#x5728;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x7269;&#x4E2D;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x819C;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E86;&#x6FC0;&#x6D3B; Ca(2+) K(+) (BK &#x6216; Maxi K) &#x901A;&#x9053;&#x7684;&#x5355;&#x901A;&#x9053;&#x5C5E;&#x6027;&#x3002;&#x53D1;&#x751F;&#x548C;&#x6D45;&#x6EE9;&#x6E20;&#x9053;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x589E;&#x52A0;&#x4E0E;&#x6210;&#x719F;/&#x7A81;&#x89E6;&#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x5E76;&#x4E0D;&#x4E00;&#x81F4;&#xFF1A; &#x91CA;&#x653E;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x9762; bouton &#x6837;&#x7A81;&#x89E6;&#x9759;&#x8109;&#x66F2;&#x5F20;&#x4E0E;&#x808C;&#x8089;&#x7EC6;&#x80DE;&#x63A5;&#x89E6;&#x7684;&#x6700;&#x9AD8;&#x548C;&#x6700;&#x4F4E;&#x5728;&#x6CA1;&#x6709;&#x63A5;&#x89E6;&#x808C;&#x8089;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x9759;&#x8109;&#x66F2;&#x5F20;&#x3002;&#x7ECF;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#x7684;&#x901A;&#x9053; (K(d) = 7.7 microM + 20 &#x819C;&#x7535;&#x4F4D;&#x5728; mV) &#x4F4E;&#x4E8E;&#x90A3;&#x4E9B;&#x5728;&#x5176;&#x4ED6;&#x7EC8;&#x7AEF;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x7684;&#x6D45;&#x6EE9;&#x6E20;&#x9053;&#x3002;&#x5E0C;&#x5C14;&#x7CFB;&#x6570; 1.5 &#x81F3; 2.8 &#x4E0D;&#x540C;&#x6F5C;&#x80FD;&#x548C;&#x5F00;&#x653E;&#x6982;&#x7387;&#x589E;&#x52A0; e-&#x6298;&#x6BCF; 16 mV &#x819C;&#x7535;&#x4F4D;&#x53D8;&#x5316;&#xFF0C;&#x968F;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217; [Ca(2+)](i) 1 microM &#x81F3; 1 &#x6BEB;&#x7C73;&#x3002;&#x6574;&#x4F53;&#x5F0F;&#x9632;&#x9759;&#x7535;&#x5355; BK &#x901A;&#x9053;&#x7535;&#x6D41;&#x6700;&#x5927;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7387;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E9A;&#x6BEB;&#x79D2;&#x7EA7;&#x8303;&#x56F4; &gt; = + 20 &#x6216; mV&#x3002;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7387;&#x589E;&#x52A0;&#x5927;&#x7EA6; 10 &#x500D;&#x54CD;&#x5E94; [Ca(2+)](i) &#x4ECE; 1 &#x589E;&#x52A0;&#x5230; 100 microM&#xFF0C;&#x4F46;&#x53EA;&#x6709;&#x7EA6; 2 &#x6298;&#x9875;&#x589E;&#x52A0;&#x7535;&#x538B;&#x53D8;&#x5316;&#x4ECE; + 20 &#x81F3; + 130 mV&#x3002;&#x6700;&#x5FEB;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7684; BK &#x901A;&#x9053;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FDE;&#x63A5;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x7C7B;&#x4F3C;&#xFF0C;&#x5728;&#x91CC;&#x9762;&#x51FA;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x4E0E; [Ca(2+)](i) 100 microM &#x6216;&#x66F4;&#x591A;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x5F88;&#x591A;&#x6D45;&#x6EE9;&#x6E20;&#x9053;&#x975E;&#x5E38;&#x63A5;&#x8FD1;&#x9499;&#x901A;&#x9053;&#x4F4D;&#x4E8E;&#x3002;&#x9274;&#x4E8E;&#x4F4E;&#x7ECF;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#x548C;&#x5FEB;&#x901F;&#x7ECF;&#x89E3;&#x9664;&#x7ED1;&#x5B9A;/&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5C5E;&#x6027;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA; BK &#x901A;&#x9053;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x51C6;&#x5907;&#x9002;&#x5E94;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x8C03;&#x63A7;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x7740;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4EEC;&#x662F;&#x672C;&#x5730; [&#x7ECF;] &#x7684;&#x5185;&#x5728;&#x819C;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x7406;&#x60F3;&#x8BB0;&#x8005;&#x3002;

&#x5728;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x7684; BK &#x901A;&#x9053;&#x7535;&#x751F;&#x7406;&#x7279;&#x6027;&#x7535;&#x673A;&#x795E;&#x7ECF;&#x672B;&#x68A2;&#x3002;

Single channel properties of Ca(2+)-activated K(+) (BK or Maxi-K) channels have been investigated in presynaptic membranes in Xenopus motoneurone-muscle cell cultures. The occurrence and density of BK channels increased with maturation/synaptogenesis and was not uniform: highest at the release face of bouton-like synaptic varicosities in contact with muscle cells, and lowest in varicosities that did not contact muscle cells. The Ca(2+) affinity of the channel (K(d)= 7.7 microM at a membrane potential of +20 mV) was lower than those of BK channels that have been characterized in other terminals. Hill coefficients varied between 1.5 and 2.8 at different potentials and open probability increased e-fold per 16 mV change in membrane potential over a range of [Ca(2+)](i) from 1 microM to 1 mM. The maximal activation rate of ensembled single BK channel currents was in the submillisecond range at > or =+20 mV. The activation rate increased approximately 10-fold in response to a [Ca(2+)](i) increase from 1 to 100 microM, but increased only approximately 2-fold with a voltage change from +20 to +130 mV. The fastest activation kinetics of BK channels in cell-attached patches resembled that in inside-out patches with [Ca(2+)](i) of 100 microM or more, suggesting that many BK channels are located very close to calcium channels. Given the low Ca(2+) affinity and rapid Ca(2+) binding/unbinding properties, we conclude that BK channels in this preparation are adapted to play an important role in regulation of neurotransmitter release, and they are ideal reporters of local [Ca(2+)] at the inner membrane surface.

Electrophysiological properties of BK channels in Xenopus motor nerve terminals.

Monocanal propri&eacute;t&eacute;s des canaux activ&eacute;s par Ca(2+) k (BK ou Maxi-K) ont &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;es dans les membranes pr&eacute;synaptiques dans les cultures de cellules de muscle-motoneurones Xenopus. La pr&eacute;sence et la densit&eacute; des canaux de BK augmente avec la maturation/synaptog&eacute;n&egrave;se et n&#39;&eacute;tait pas uniformes : plus haut &agrave; la face de sortie de type bouton synaptiques varicosit&eacute;s au contact des cellules musculaires et le plus bas dans les varicosit&eacute;s qui n&#39;a pas contact&eacute; les cellules musculaires. L&#39;affinit&eacute; de la Ca(2+) du canal (K(d) = 7,7 microM &agrave; un potentiel de membrane de + 20 mV) &eacute;tait inf&eacute;rieur &agrave; celui des canaux de BK qui ont &eacute;t&eacute; caract&eacute;ris&eacute;s dans d&#39;autres terminaux. Coefficients de Hill varient entre 1,5 et 2,8 &agrave; potentiels diff&eacute;rents et la probabilit&eacute; d&#39;ouverture augment&eacute;e e-pli / 16 mV change dans le potentiel de membrane sur une gamme de [Ca(2+)](i) de 1 microM &agrave; 1 mM. Le taux d&#39;activation maximale de &amp;amp; courants des canaux BK unique se situait &agrave; submillisecond &gt; ou = + 20 mV. Le taux d&#39;activation a augment&eacute; d&#39;environ 10 fois en r&eacute;ponse &agrave; un [Ca(2+)](i) augmenter de 1 &agrave; 100 microM, mais a augment&eacute; de seulement environ 2 fois avec un changement de tension de + 20 &agrave; + 130 mV. La cin&eacute;tique d&#39;activation plus rapide des canaux de BK dans les patchs cellule-attach&eacute;e ressemble &agrave; celle de patches inside-out avec [Ca(2+)](i) de microM 100 ou plus, ce qui sugg&egrave;re que de nombreux canaux de BK est tr&egrave;s proches des canaux calciques. Compte tenu de la faible affinit&eacute; Ca(2+) et les propri&eacute;t&eacute;s de liaison/dissocier Ca(2+) rapides, nous concluons que les canaux de BK dans cette pr&eacute;paration sont adapt&eacute;s &agrave; jouer un r&ocirc;le important dans la r&eacute;gulation de la lib&eacute;ration des neurotransmetteurs, et ils sont id&eacute;ales reporters locaux [Ca(2+)] &agrave; la surface de la membrane interne de.

Les propri&eacute;t&eacute;s &eacute;lectrophysiologiques des canaux de BK chez Xenopus automobiles de terminaisons nerveuses.

Einkanal-Eigenschaften Ca(2+) aktivierte K(+) (BK oder Maxi-K)-Kan&auml;le wurden in pr&auml;synaptischen Membranen in Xenopus-Motoneurone-Muskel-Zellkulturen untersucht. Das auftreten und die Dichte der BK-Kan&auml;le mit Reifung/Synaptogenese erh&ouml;ht und war nicht einheitlich: auf das Freigabe-Gesicht des synaptische Bouton-wie Krampfadern in Kontakt mit Muskelzellen h&ouml;chsten und am niedrigsten in Varikose, die Muskelzellen nicht kontaktiert. Die Ca(2+)-Affinit&auml;t des Kanals (K(d) = 7.7 MicroM eine Membran-Potential von + 20 mV) war niedriger als die der BK-Kan&auml;le, die in anderen Terminals gepr&auml;gt haben. Hill-Koeffizienten schwankte zwischen 1,5 und 2,8 auf unterschiedliche Potentiale und offene Wahrscheinlichkeit erh&ouml;ht e-Fach pro 16 mV &Auml;nderung der Membran potenzielle &uuml;ber einen Bereich von [Ca(2+)](i) aus 1 MicroM bis 1 mM. Die maximale Aktivierung ensembled einzelnen BK Kanal Str&ouml;me lag im Bereich von submillisekundenschnelle bei &gt; oder = + 20 mV. Die Aktivierung erh&ouml;ht etwa 10fach verbesserter in Reaktion auf eine [Ca(2+)](i) von 1 auf 100 MicroM erh&ouml;hen, sondern erh&ouml;ht nur ca. 2-fach mit einer Spannungs&auml;nderung von + 20 bis + 130 mV. Die schnellste Aktivierung-Kinetik der BK-Kan&auml;le in Zelle verbundene Flecken &auml;hnelte dem Inside-Out-Patches mit [Ca(2+)](i) von MicroM 100 oder mehr, was darauf hindeutet, dass viele BK-Kan&auml;le befinden sich ganz in der N&auml;he von Kalzium-Kan&auml;le. Angesichts der niedrigen Ca(2+) Affinit&auml;t und schnelle Ca(2+) binden/Bindung an Eigenschaften, schlie&szlig;en wir, dass die BK-Kan&auml;le in dieser Zubereitung eine wichtige Rolle in der Regulierung der Neurotransmitter-Freisetzung spielen angepasst sind und sie sind ideale Reporter der lokalen [Ca(2+)] an die innere Membran-Oberfl&auml;che.

Elektrophysiologische Eigenschaften des BK-Kan&auml;le in Xenopus motor Nervenenden.

Propriet&agrave; del singolo canale dei canali attivati da Ca(2+) K(+) (BK o Maxi-K) sono state indagate in membrane presinaptiche in colture cellulari di Xenopus motoneurone-muscolare. La ricorrenza e la densit&agrave; di canali BK aumentato con maturazione/pervasivi e non era uniforme: pi&ugrave; alto il volto di rilascio di simil-bouton sinaptico varicosit&agrave; a contatto con le cellule muscolari e pi&ugrave; basso in varicosit&agrave; che ha fatto non a contatto con le cellule muscolari. L&#39;affinit&agrave; di Ca(2+) del canale (K(d) = 7,7 microM a un potenziale di membrana di + 20 mV) era inferiore a quelli dei canali BK che sono state caratterizzate in altri terminali. Coefficienti di Hill variavano tra 1,5 e 2,8 a potenziali differenti e aperto probabilit&agrave; aumentata e piega per 16 mV cambiamento nel potenziale di membrana in un intervallo di [Ca(2+)](i) da 1 microM di 1 mM. Il tasso di attivazione massimale di ensembled correnti di canale BK singole era nella gamma submillisecond a &amp;gt; o = + 20 mV. Il tasso di attivazione aumentata circa 10 volte in risposta a un [Ca(2+)](i) aumentare da 1 a 100 microM, ma solo circa 2 volte maggiore con una variazione di tensione da + 20 a + 130 mV. La cinetica di attivazione pi&ugrave; veloce dei canali BK in cella-attached patch che assomigliava in inside out patch con [Ca(2+)](i) di 100 microM o pi&ugrave;, suggerendo che molti canali BK sono situati molto vicino ai canali del calcio. Data la bassa affinit&agrave; Ca(2+) e propriet&agrave; di associazione/disassocia rapida Ca(2+), concludiamo che BK canali in questa preparazione sono adattati a svolgere un ruolo importante nella regolazione del rilascio di neurotrasmettitore, e sono ideali ai giornalisti locali [Ca(2+)] alla superficie della membrana interna.

Propriet&agrave; elettrofisiologiche dei canali BK in Xenopus motore di terminali nervosi.

Ca(2+) &#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x65BC;&#x3044;&#x3066;&#x30DE;&#x30AD;&#x30B7; K (BK) &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x5358;&#x4E00;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB; &#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x306F;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB; motoneurone &#x7B4B;&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x524D;&#x819C;&#x3067;&#x691C;&#x8A0E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;.&#x767A;&#x751F;&#x3068; BK &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x5897;&#x52A0;&#x6210;&#x719F;/&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x5747;&#x4E00;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;: &#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9; varicosities &#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x306E;&#x63A5;&#x89E6;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x9854;&#x3067;&#x6700;&#x9AD8;&#x3068;&#x6700;&#x4F4E;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9023;&#x7D61;&#x3092;&#x53D6;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F; varicosities &#x3067;&#x3002;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x89AA;&#x548C;&#x6027; (K(d) = 7.7 microM &#x819C;&#x96FB;&#x4F4D;&#x3092; +20 mV) &#x4ED6;&#x306E;&#x7AEF;&#x672B;&#x3067;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B; BK &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3088;&#x308A;&#x4F4E;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;1.5 &#x3068;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x96FB;&#x4F4D;&#x3068;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;&#x78BA;&#x7387;&#x306E;&#x5897;&#x52A0; e &#x500D; 16 mV &#x306E;&#x819C;&#x96FB;&#x4F4D;&#x5909;&#x5316;&#x3042;&#x305F;&#x308A; 2.8 &#x306E;&#x9593;&#x4E18;&#x4FC2;&#x6570;&#x3092;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306F; 1 microM &#x304B;&#x3089; i &#x306F; 1 mM&#x3002;Ensembled &#x5358;&#x4E00; BK &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x6700;&#x5927;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x7387;&#x3067;&#x30B5;&#x30D6;&#x30DF;&#x30EA;&#x79D2;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x76EE;&#x307E;&#x305F;&#x306F; = +20 mV&#x3002;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x7387;&#x306F;&#x7D04; 10 &#x500D;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3001;[Ca(2+)](i) 1 &#x304B;&#x3089; 100 &#x306E; microM &#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x304C;&#x3001;+20 &#x304B;&#x3089; 130 &#x306E;&#x96FB;&#x5727;&#x5909;&#x66F4;&#x306E;&#x307F;&#x7D04;&#x500D;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F; mV&#x3002;&#x30BB;&#x30EB;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x306E; BK &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x6700;&#x901F;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x901F;&#x5EA6;&#x8AD6;&#x306F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C9; &#x30A2;&#x30A6;&#x30C8; &#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x3068; i 100 microM &#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E; BK &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x304C;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306B;&#x8FD1;&#x3044;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; &#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x4F4E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3068;&#x8FC5;&#x901F;&#x306A;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;/&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x89E3;&#x9664;&#x3092;&#x8003;&#x3048;&#x308B;&#x3068;&#x3001;BK &#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3053;&#x306E;&#x6E96;&#x5099;&#x3067;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x653E;&#x51FA;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x306B;&#x9069;&#x5FDC;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x306F;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB; [&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;] &#x5185;&#x819C;&#x8868;&#x9762;&#x3067;&#x306E;&#x7406;&#x60F3;&#x7684;&#x306A;&#x8A18;&#x8005;&#x3092;&#x7DE0;&#x7D50;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x306E; BK &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D42;&#x672B;&#x3092;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

(&#xBCF4; &#xB9AC; &#xB610;&#xB294; &#xB9E5;&#xC2DC;-K) K(+) Ca(2+) &#xD65C;&#xC131; &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xB2E8;&#xC77C; &#xCC44;&#xB110; &#xC18D;&#xC131; Xenopus motoneurone &#xADFC;&#xC721; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC30;&#xC591; presynaptic &#xB9C9;&#xC5D0; &#xC870;&#xC0AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC1C;&#xC0DD;&#xACFC; &#xBCF4; &#xB9AC; &#xCC44;&#xB110; &#xBC00;&#xB3C4; &#xC131;&#xC219;/synaptogenesis&#xB85C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xC720;&#xB2C8;&#xD3FC;&#xC774; &#xC544;&#xB2C8;&#xC5C8;&#xB2E4;: bouton &#xAC19;&#xC740; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; varicosities &#xADFC;&#xC721; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC811;&#xCD09;&#xC758; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xC5BC;&#xAD74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD5C;&#xACE0; &#xBC0F; &#xCD5C;&#xC800; varicosities &#xADFC;&#xC721; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC5F0;&#xB77D; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xCC44;&#xB110;&#xC758; Ca(2+) &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; (K(d) + 20&#xC758; &#xB9C9; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC5D0; 7.7 microM = mV) &#xBCF4; &#xB9AC; &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xB2E4;&#xB978; &#xB2E8;&#xB9D0;&#xAE30;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC758; &#xAC83; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB0AE;&#xC740;. [1Mm 1 Microm&#xC5D0;&#xC11C; Ca(2+)](i) &#xBC94;&#xC704; 1.5&#xC640; &#xB2E4;&#xB978; &#xD6C4;&#xBCF4;&#xC640; &#xC624;&#xD508; &#xD655;&#xB960; &#xC99D;&#xAC00; &#xC804;&#xC790; &#xBC30; &#xB9C9; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; 16 mV &#xBCC0;&#xD654; &#xB2F9; 2.8 &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD790; &#xACC4;&#xC218;. Ensembled &#xB2E8;&#xC77C; BK &#xCC44;&#xB110; &#xC804;&#xB958; &#xCD5C;&#xB300;&#xD55C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; submillisecond &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0; &amp;gt; &#xB610;&#xB294; + 20 = mV. &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00; &#xC57D; &#xC0AC;&#xC9C4;&#xC5D0; &#xC751;&#xB2F5; &#xD558;&#xB294; [Ca(2+)](i) 100 microM 1&#xC5D0;&#xC11C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC804;&#xC555; &#xBCC0;&#xACBD; + 20&#xC5D0;&#xC11C; + 130&#xB9CC; &#xC57D; 2-fold &#xC99D;&#xAC00; mV. &#xC140; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD328;&#xCE58;&#xC5D0; &#xBCF4; &#xB9AC; &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xBE60;&#xB978; &#xC778;&#xC99D; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860; &#xB0B4;&#xBD80; &#xC544;&#xC6C3; &#xD328;&#xCE58; [Ca(2+)](i) 100 microM &#xC774;&#xC0C1; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xB9CE;&#xC740; &#xBCF4; &#xB9AC; &#xCC44;&#xB110;&#xC740; &#xCE7C;&#xC298; &#xCC44;&#xB110;&#xC5D0; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xAC00;&#xAE5D;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC640; &#xADF8;&#xB97C; &#xB2EE;&#xC740;. &#xB0AE;&#xC740; Ca(2+) &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xBE60;&#xB978; Ca(2+) &#xBC14;&#xC778;&#xB529;/&#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xAC10;&#xC548;&#xD560; &#xB54C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC774; &#xC900;&#xBE44; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4; &#xB9AC; &#xCC44;&#xB110; &#xC801;&#xC751; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xBC29;&#xCD9C;&#xC758; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xB85C;&#xCEEC; [Ca(2+)] &#xB0B4;&#xBD80; &#xB9C9; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC774;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xC790;&#xB294; &#xACB0;&#xB860;.

&#xBCF4; &#xB9AC; &#xCC44;&#xB110; Xenopus electrophysiological &#xC18D;&#xC131; &#xBAA8;&#xD130; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110;.

&#xCCAD;&#xAC01; &#xBC0F; vestibular &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; basolateral &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xBC29;&#xCD9C; &#xC804;&#xC555; &#xAC1C;&#xD3D0; Ca(2+) &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; Ca(2+) &#xC720;&#xC785;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD65C;&#xC131; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xB3C4;&#xC131;&#xC774; &#xD070; Ca(2+) &#xD65C;&#xC131; K(+) (BK) &#xCC44;&#xB110;&#xC758; co-localization &#xC1A1;&#xC2E0;&#xAE30; &#xCD9C;&#xC2DC;&#xC758; &#xD65C;&#xC131; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; Ca(2+) &#xB18D;&#xB3C4; &#xBCC0;&#xD654;&#xB294; &#xAE30;&#xC790; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xCD5C;&#xC801;&#xC758; &#xC704;&#xCE58; &#xADF8;&#xB4E4; &#xC694; &#xADF9;&#xC744;. &#xC774; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4; &#xB9AC; &#xCC44;&#xB110; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xAC1C;&#xAD6C;&#xB9AC; (Rana pipiens) &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca(2+) &#xB18D;&#xB3C4; &#xACFC;&#xB3C4; &#xC720;&#xC785; &#xB3D9;&#xC548; &#xBCF4; &#xB9AC; &#xD604;&#xC7AC; &#xADDC;&#xBAA8;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; ca(2+)&#xC758; &#xB3D9;&#xC801; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xD558; &#xACE0; &#xBC1C;&#xBCD1;&#xC744; &#xC9C0;&#xC5F0; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC640; &#xAE30;&#xAC04; Ca(2+) &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; Ca(2+) &#xD56D;&#xBAA9;&#xC758; &#xC0C1;&#xAD00;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xBCF4; &#xB9AC; &#xCC44;&#xB110; &#xD3D0;&#xC1C4; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC5F4;&#xB9B0; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB192;&#xC740; Ca(2+) &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xC804;&#xC2DC; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB300;&#xD615; &#xC804;&#xB3C4;&#xB3C4; Ca2 +&#xC640; Ca2 + &#xC5ED;&#xD559; &#xACFC;&#xB3C4; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1;-&#xAC1C;&#xAD6C;&#xB9AC; saccular &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xC131; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC885;&#xC18D; K + &#xCC44;&#xB110;.

&#x4ECE;&#x542C;&#x89C9;&#x548C;&#x524D;&#x5EAD;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x57FA;&#x5E95;&#x5916;&#x4FA7;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x91CA;&#x653E;&#x88AB;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7ECF;&#x7535;&#x538B;&#x95E8;&#x63A7;&#x6027;&#x7ECF;&#x6E20;&#x9053;&#x6D8C;&#x5165;&#x3002;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x7684;&#x5927;&#x7535;&#x5BFC;&#x6FC0;&#x6D3B; Ca(2+) K(+) (BK) &#x6E20;&#x9053;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x533A;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x4E0E;&#x5145;&#x5F53;&#x8BB0;&#x8005;&#x5728;&#x6D3B;&#x52A8;&#x533A;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x7ECF;&#x6D53;&#x5EA6;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x6700;&#x4F73;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x62A5;&#x544A;&#x4E2D;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528; BK &#x6E20;&#x9053;&#x86D9; (Rana &#x868A;) &#x6BDB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6765;&#x76D1;&#x6D4B;&#x7ECF;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A;&#x90A3; BK &#x5F53;&#x524D;&#x89C4;&#x6A21;&#x5728;&#x77AC;&#x95F4;&#x6D8C;&#x5165;&#x671F;&#x95F4;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x53D8;&#x5316;&#x548C;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x7684;&#x53D1;&#x75C5;&#x90FD;&#x4E0E;&#x7387;&#x548C;&#x7ECF;&#x6761;&#x76EE;&#x901A;&#x8FC7;&#x7ECF;&#x6E20;&#x9053;&#x7684;&#x6301;&#x7EED;&#x65F6;&#x95F4;&#x76F8;&#x5173;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x663E;&#x793A; BK &#x6E20;&#x9053;&#x5C55;&#x793A;&#x9AD8;&#x5F97;&#x591A;&#x7684;&#x7ECF;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x4EB2;&#x548C;&#x5904;&#x4E8E;&#x6253;&#x5F00;&#x72B6;&#x6001;&#x6BD4;&#x5904;&#x4E8E;&#x5173;&#x95ED;&#x72B6;&#x6001;&#x3002;

&#x76D1;&#x6D4B;&#x4E0E;&#x5927;&#x7535;&#x5BFC; Ca2 + &#x7684;&#x77AC;&#x6001;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66; Ca2 +-K + &#x4F9D;&#x8D56;&#x6E20;&#x9053;&#x5728;&#x9752;&#x86D9;&#x56CA;&#x72B6;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x533A;&#x3002;

Neurotransmitter release from the basolateral surface of auditory and vestibular hair cells is mediated by Ca(2+) influx through voltage-gated Ca(2+) channels. Co-localization of large-conductance Ca(2+)-activated K(+) (BK) channels at the active zones of these cells affords them with an optimal location to act as reporters of the Ca(2+) concentration changes at active zones of transmitter release. In this report we use BK channels in frog (Rana pipiens) hair cells to monitor dynamic changes in intracellular Ca(2+) concentration during transient influxes of Ca(2+), showing that BK current magnitude and delay to onset are correlated with the rate and duration of Ca(2+) entry through Ca(2+) channels. We also show that BK channels exhibit a much higher Ca(2+) binding affinity in the open state than in the closed state.

Monitoring transient Ca2+ dynamics with large-conductance Ca2+-dependent K+ channels at active zones in frog saccular hair cells.

La lib&eacute;ration des neurotransmetteurs de la surface basolat&eacute;rale des cellules cili&eacute;es d&#39;auditifs et vestibulaires est v&eacute;hicul&eacute;e par l&#39;influx de Ca(2+) &agrave; travers les canaux voltage-d&eacute;pendants de Ca(2+). Co-localisation des canaux de grande conductance activ&eacute;s par Ca(2+) k (BK) dans les zones actives de ces cellules leur offre avec une localisation optimale pour agir en tant que journalistes, les changements de concentration de Ca(2+) &agrave; des zones actives de la sortie de l&#39;&eacute;metteur. Dans le pr&eacute;sent rapport, nous utilisons des canaux de BK dans les cellules cili&eacute;es de grenouille (Rana pipiens) pour surveiller les variations dynamiques de la concentration intracellulaire de Ca(2+) au cours de l&#39;afflux temporaire de Ca(2+), montrant l&#39;ampleur actuelle de BK et le d&eacute;lai d&#39;apparition sont corr&eacute;l&eacute;s avec les taux et la dur&eacute;e d&#39;entr&eacute;e de Ca(2+) par les voies Ca(2+). Nous montrons &eacute;galement que les canaux de BK pr&eacute;sentent une affinit&eacute; de liaison Ca(2+) beaucoup plus &eacute;lev&eacute;e dans l&#39;&eacute;tat ouvert que dans l&#39;&eacute;tat closed.

Surveillance dynamique de Ca2 + transitoire avec grande conductance Ca2 +-K + canaux d&eacute;pendants &agrave; des zones actives dans les cellules cili&eacute;es sacculaire de grenouille.

Neurotransmitter-Freisetzung aus der Basolateraler Oberfl&auml;che des auditorischen und vestibul&auml;ren Haarzellen wird durch Ca(2+) Zustrom durch Spannung-Gating Ca(2+) Kan&auml;le vermittelt. Doppelhybridisierung der gro&szlig;en Leitwert Ca(2+) aktivierte K(+) (BK)-Kan&auml;le in den aktiven Zonen dieser Zellen bietet ihnen mit einer optimalen Lage als Reporter der Ca(2+) Konzentration Ver&auml;nderungen bei aktiven Zonen der Sender Version handeln. In diesem Bericht verwenden wir BK Kan&auml;le in Frosch (Rana Pipiens) Haarzellen dynamische &Auml;nderungen im intrazellul&auml;ren Ca(2+) Konzentration w&auml;hrend transient Zustrom von Ca(2+), zeigt die aktuelle Gr&ouml;&szlig;e der BK &uuml;berwacht und Verz&ouml;gerung zu Beginn mit der Rate und der Dauer der Ca(2+)-Eintrag durch Ca(2+) Kan&auml;le korreliert sind. Wir zeigen auch, dass BK-Kan&auml;le eine viel h&ouml;here Ca(2+) verbindliche Affinit&auml;t im ge&ouml;ffneten Zustand als in geschlossenem Zustand zeigen.

&Uuml;berwachung vor&uuml;bergehender Ca2 + Dynamik mit gro&szlig;en Leitwert Ca2 +-abh&auml;ngigen K +-Kan&auml;le bei aktiven Zonen in Frosch ein sackf&ouml;rmiges Haarzellen.

Neurotrasmettitore rilascio dalla superficie basolaterale delle cellule ciliate uditive e vestibolari &egrave; mediata da Ca(2+) afflusso attraverso canali Ca(2+) voltaggio-dipendenti. Collocazione dei canali attivati da Ca(2+) K(+) (BK) grande conduttanza presso le zone attive di queste cellule li offre in una posizione ottimale per agire come reporter delle modifiche Ca(2+) concentrazione a zone attive di rilascio del trasmettitore. In questa relazione usiamo canali BK in cellule ciliate rana (Rana pipiens) per monitorare i cambiamenti dinamici nella concentrazione intracellulare di Ca(2+) durante il transitori afflussi di Ca(2+), mostrando che grandezza attuale BK e ritardo di esordio sono correlate con la frequenza e la durata della voce Ca(2+) attraverso canali Ca(2+). Mostriamo anche che canali BK esibiscono un&#39;affinit&agrave; di legame di Ca(2+) molto pi&ugrave; elevata nello stato aperto rispetto nello stato chiuso.

Monitoraggio transitoria Ca2 + dinamica con grande conduttanza Ca2 +-dipendente canali K + a zone attive nelle cellule ciliate sacculare rana.

&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x653E;&#x51FA;&#x8074;&#x899A;&#x3068;&#x524D;&#x5EAD;&#x306E;&#x6709;&#x6BDB;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x57FA;&#x5E95;&#x9762;&#x304B;&#x3089;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x96FB;&#x5727;&#x30B2;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6D41;&#x5165;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x5C0E;&#x96FB;&#x7387; Ca(2+) &#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x65BC;&#x3044;&#x3066; (BK) &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x30BE;&#x30FC;&#x30F3;&#x3067;&#x306E;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x653E;&#x51FA;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x30BE;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x8A18;&#x8005;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6700;&#x9069;&#x306A;&#x30ED;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x5831;&#x544A;&#x3067;&#x306F;&#x6211;&#x3005; BK &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x86D9; &#xFF08;&#x30E9;&#x30CA; &#x30A2;&#x30AB;&#x30A4;&#x30A8;&#x30AB;&#xFF09; &#x6709;&#x6BDB;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x975E;&#x5B9A;&#x5E38;&#x6D41;&#x5165;&#x3001;BK &#x306E;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x4E2D;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x76E3;&#x8996;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x9045;&#x5EF6;&#x767A;&#x75C7;&#x306B;&#x306F;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x306E;&#x671F;&#x9593;&#x3068;&#x901F;&#x5EA6;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F; BK &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x9589;&#x3058;&#x305F;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x7D50;&#x5408;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;.

&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x306A; ca 2 + &#x52D5;&#x614B;&#x3068;&#x5927;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30F3;&#x30B9; ca 2 +-&#x30AB;&#x30A8;&#x30EB;&#x56A2;&#x72B6;&#x6709;&#x6BDB;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x30BE;&#x30FC;&#x30F3;&#x3067;&#x306E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E; K + &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3002;

Liberaci&oacute;n de neurotransmisores desde la superficie basolateral de las c&eacute;lulas de pelo auditivas y vestibulares est&aacute; mediada por la afluencia de CA a trav&eacute;s de canales voltaje-bloqueados del CA. Co-localizaci&oacute;n de canales de gran conductancia activados por Ca(2+) k (BK) en las zonas activas de estas c&eacute;lulas les brinda una ubicaci&oacute;n &oacute;ptima para actuar como reporteros de los cambios de la concentraci&oacute;n de CA en zonas activas de la liberaci&oacute;n del transmisor. En este informe utilizamos canales de BK en c&eacute;lulas de pelo de rana (Rana pipiens) para monitorizar los cambios din&aacute;micos en la concentraci&oacute;n intracelular de CA durante transitorios afluencias de CA, mostrando esa magnitud actual de BK y retardo de inicio se correlacionan con la velocidad y la duraci&oacute;n de la entrada de CA a trav&eacute;s de canales de CA. Tambi&eacute;n mostramos que los canales BK exhiben una mayor afinidad de uni&oacute;n de CA en el estado abierto que en el estado cerrado.

Monitoreo transitoria Ca2 + din&aacute;mica con gran conductancia Ca2 +-dependientes canales de K + en zonas activas en las c&eacute;lulas de pelo sacular de rana.

Rita M. Yazejian

Department of Physiology

David Geffen School of Medicine at UCLA

Simultaneous Pre- and Post-synaptic Electrophysiological Recording from Xenopus Nerve-muscle Co-cultures

Rita M. Yazejian

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David Geffen School of Medicine at UCLA

Simultaneous Pre- and Post-synaptic Electrophysiological Recording from Xenopus Nerve-muscle Co-cultures

Department of Physiology