11.10 : Cromatografía en Capa Fina (TLC).

La cromatografía en capa fina (TLC) es una técnica cromatográfica que separa los compuestos en función de su polaridad. La TLC suele utilizar gel de sílice polar, una forma de dióxido de silicio, como fase estacionaria. El gel de sílice contiene grupos hidroxilo (OH) en su superficie, que forman enlaces de hidrógeno con los compuestos polares, lo que influye en su adhesión a la fase estacionaria.

Para comenzar el análisis, se coloca una mezcla de compuestos en la línea de partida de la placa de TLC utilizando un capilar fino. La parte inferior de la placa se sumerge en la fase móvil, que suele ser un disolvente orgánico menos polar que la fase estacionaria. El disolvente asciende por la placa por acción capilar, llevando la mancha de soluto. A medida que el disolvente asciende por la placa, los componentes de la mezcla se reparten entre la fase móvil o la fase estacionaria. Los componentes polares interactúan con mayor fuerza con la fase estacionaria polar, lo que hace que se desplacen lentamente y sólo a una corta distancia en la placa de TLC. Los componentes menos polares de la muestra son más solubles en la fase móvil y tienden a interactuar más con ella, lo que les permite viajar más lejos en la placa de TLC.

Comprender la polaridad de los componentes y la fase móvil es esencial para predecir los resultados de la separación. La fase móvil (solvente) debe ser lo suficientemente polar para mover el soluto más polar de manera efectiva y, al mismo tiempo, garantizar una buena separación del compuesto. El factor de retardo, Rf, se define como la relación entre la distancia recorrida por un componente y la distancia recorrida por la fase móvil. Comprender este concepto es crucial en el análisis del TLC. El Rf de un compuesto depende de la fase móvil utilizada. El Rf es alto para compuestos no polares con una fase móvil no polar. Se observan valores bajos de Rf para componentes polares con una fase móvil no polar.