Láser microdisección de captura de tejidos de mamíferos

Resumen

Resumen

Microscopía láser captura, también conocido como la microdisección por láser (LMD), permite al usuario aislar un pequeño número de células o tejidos de congelados o fijados con formalina, cortes de tejidos incluidos en parafina. LMD técnicas se basan en una membrana termo lábil colocar ya sea en la parte superior de o por debajo, la sección de tejido. En un método, la energía se centró láser se utiliza para derretir la membrana en las células subyacentes, que pueden ser sacados de la sección de tejido. En el otro, la energía del láser vaporiza el papel de aluminio a lo largo de un camino "dibujado" en el tejido, permitiendo que las células seleccionadas para caer en un dispositivo de recogida. Cada técnica permite la selección de células con una resolución mínima de varias micras. DNA, RNA, proteínas, lípidos y las muestras pueden ser aislados y analizados a partir de micro-disección de muestras. En este vídeo, que muestran el uso de la Leica AS-LMD instrumento microdisección láser en siete segmentos, incluyendo una introducción a los principios de la LMD, la inicialización del instrumento para su uso, consideraciones generales para la preparación de la muestra, el montaje de la muestra y la creación de los tubos de la captura , alineando el microscopio, ajustar los controles de captura y la captura de muestras de tejido. Láser de captura de micro-disección permite al investigador para aislar muestras de poblaciones celulares puras tan pequeño como un celular pocos equivalentes. Esto permite el análisis de las células de interés que están libres de contaminantes vecinos, que pueda influir en los resultados experimentales.