El estrés social Trier Protocolo de prueba para la inducción de estrés psicológico

Resumen

En este artículo se describe un protocolo para la inducción de estrés psicológico en los participantes, lo que permite a los investigadores para medir las respuestas psicológicas, fisiológicas y neuroendocrina al estrés en los participantes o entre grupos.

Resumen

En este artículo muestra un protocolo de estrés psicológico para su uso en un entorno de laboratorio. Protocolos que permiten a los investigadores a estudiar los procesos biológicos de la respuesta al estrés en la salud y la enfermedad son fundamentales para el progreso de la investigación en el estrés y la ansiedad. ¹ Aunque existen numerosos protocolos para la inducción de la respuesta al estrés en el laboratorio, el abandono muchas de proporcionar un contexto naturalista o para incorporar los aspectos de la tensión social y psicológico. De los protocolos de estrés psicológico, el meta-análisis sugiere que la prueba de estrés social Trier (TSST) es el protocolo estándar más apropiado y útil para los estudios de la reactividad de la hormona del estrés. ² En la descripción original de la TSST, los investigadores trataron de diseñar y evaluar un procedimiento de capaz de inducir una respuesta de estrés fiable en la mayoría de los voluntarios sanos. ³ Estos investigadores encontraron elevaciones de la frecuencia cardiaca, presión arterial y el estrés endocrinas markers en respuesta a la TSST (un factor de estrés psicológico) en comparación con una inyección de solución salina (un factor de estrés físico). ³ Aunque la TSST ha sido modificado para satisfacer las necesidades de diversos grupos de investigación, por lo general consiste en un período de espera a la llegada, el discurso de anticipación preparación, el habla de rendimiento, y la aritmética verbal períodos de desempeño, seguido de uno o más períodos de recuperación. La TSST exige a los participantes para preparar y pronunciar un discurso, verbal y responder a un problema de aritmética difícil en presencia de un público socialmente evaluación. ³ Evaluación social y falta de control han sido identificados como componentes clave de la inducción de estrés por la TSST. ⁴ En el uso de más de una década, el objetivo de la TSST es inducir una respuesta de estrés de manera sistemática con el fin de medir las diferencias en la reactividad, la ansiedad y la activación del eje hipotálamo-pituitario-adrenal (HPA) o simpático-adrenal medular (SAM), el eje en la tarea ^1. Researcella en general, evaluar los cambios en el auto-reporte de la ansiedad, las medidas fisiológicas (por ejemplo, tasa cardiaca), y / o índices neuroendocrinos (por ejemplo, la hormona del estrés cortisol) en respuesta a la TSST. Muchos investigadores han adoptado muestras salivales de los marcadores de estrés como el cortisol y la alfa-amilasa (un marcador de activación del sistema nervioso autónomo) como alternativa a la extracción de sangre para reducir el estrés de confusión de las técnicas de recogida de sangre. Además de los cambios experimentados por un individuo de completar la TSST, los investigadores pueden comparar los cambios entre diferentes grupos de tratamiento (por ejemplo, las muestras clínicas en comparación con controles sanos) o la eficacia de las intervenciones para reducir el estrés ^1.

Protocolo

1. Configurar

1. Todas las investigaciones deben ser aprobados por la Junta de Revisión Institucional o del comité apropiado humanos revisión de sujetos antes de la recolección de datos.
2. Idealmente, dos habitaciones deben estar disponibles para llevar a cabo la TSST. Una cómoda sala de espera debe estar disponible para los participantes antes del comienzo del TSST y durante los períodos de recuperación. Una sala de entrevistas por separado se debe utilizar durante la preparación del discurso, el rendimiento del habla y las porciones de matemáticas de la TSST para introducir la novedad y la uncontrolability.
3. Organizar la sala de entrevistas para que el participante se enfrentará a los entrevistadores de la Confederación y de vídeo de posición o equipo de grabación de audio en el campo visual de los participantes. Las batas de laboratorio debe estar disponible para los entrevistadores para usar durante el TSST para aumentar la tensión durante la TSST. Instruir a los entrevistadores para mantener el contacto visual con los participantes y abstenerse de hacer expresiones faciales emocionales durante la TSST.
4. Considere cuidadosamente ªe pregunta de investigación (s) al seleccionar las mediciones dependientes. Directrices para el análisis y la publicación de varias medidas de respuesta al estrés son proporcionados por diversas fuentes (directrices para la publicación y análisis de las medidas psicofisiológicas son proporcionados por la Sociedad para la Investigación psicofisiológicos: http://www.sprweb.org/journal/index. pcm # guidelines ). ⁵ Consulta de estos recursos en el diseño de experimentos es recomendable.
5. Configurar todos los equipos necesarios para registrar las respuestas fisiológicas, psicológicas o endocrino a la TSST. Este equipo puede incluir (pero no limitados a) los electrodos y equipos electrónicos y / o software para registrar la frecuencia cardíaca, la reactividad cardiovascular, conductancia de la piel o la respuesta, abrir y cerrar los ojos, la contracción muscular / tono, la frecuencia respiratoria, papel y lápiz o las versiones electrónicas de instrumentos psicológicos como la ansiedad Estado-Rasgo Inventory, ⁶ tubos y otros materiales de recolección de muestras de orina, sangre o saliva;. o equipos de grabación de vídeo Para esta demostración, vamos a utilizar tres derivaciones del electrocardiograma (ECG) electrodos para medir la frecuencia cardíaca durante el TSST, y la administración repetida de la Inventario de Ansiedad Estado-Rasgo para medir la respuesta psicológica antes y después del factor estresante. Vamos a utilizar un sistema de registro básico diseñado para medir las respuestas fisiológicas (Biopac sistema MP36) para registrar la frecuencia cardíaca.
6. Si las muestras de sangre (en lugar de saliva) se recogerán durante el experimento, los esfuerzos para minimizar el dolor y la angustia durante la recolección debe hacerse. Los procedimientos de recolección de sangre se puede introducir una carga adicional física o psicológica, la respuesta de la confusión a la TSST.
7. Cuando el participante llega, les damos la bienvenida al laboratorio. Obtener el consentimiento informado y el asiento del participante cómodamente.
8. Recopilar información demográfica, la información de investigación o additional llegada medidas que son requeridas por el experimento. Verificar que el participante no ha consumido alimentos o bebidas (excepto agua) en la última hora si recoger las mediciones de cortisol. Un breve período de ayuno se recomienda si va a recoger muestras de saliva para el análisis. Cambios en el pH asociados a los alimentos ácidos o bebéis, o la contaminación visible puede interferir con la medición precisa de los marcadores salivales. Examen de toxicología de orina puede ser necesario si las medidas de interés pueden estar contaminados por la medicación u otros metabolitos. Información sobre los factores que pueden afectar la respuesta al estrés (por ejemplo, los medicamentos, la enfermedad, el sueño, los últimos acontecimientos estresantes, la fobia social) también debe ser considerado cuando los participantes de detección.

2. Las mediciones pre-tensión

1. Instruir a los participantes a esperar cómodamente durante 45 minutos en la sala de espera. Usted puede optar por ofrecer al participante con material de lectura, tales como revistas que contienen emotradicionalmente neutral en el contenido, o cualquier otra actividad emocional-neutral durante este período.
2. Después del período de 45 minutos de espera, para administrar el Estado-Rasgo de Ansiedad para evaluar el estrés pre-ansiedad. ⁶ Por otra parte, otros instrumentos que están diseñados para evaluar los cambios de estado de estrés, la ansiedad o la relajación pueden ser administrados (por ejemplo, las escalas analógicas visuales).
3. Se recoge una "pre-tensión" muestra de saliva. Instruir a los participantes a enjuagarse la boca con agua. Darle al participante una sección de 5-10 cm de paja para beber y un lugar limpio, desechable 2,0 ml vial de polipropileno. Instruir a los participantes a inclinar la cabeza hacia delante para permitir la saliva a la piscina en el piso de la boca y pasar la saliva a través de la paja en el vial. Recoger aproximadamente 1,5-2,0 ml de saliva de los participantes. Por otra parte, la saliva puede ser recogida mediante el uso de mecha absorbente dental (u otro material similar) e instruir a los participantes para masticar o para saturar el material con la saliva. Si posposible, salir de la habitación para proporcionar al participante en la vida privada. Etiqueta y guardar todas las muestras de saliva a -20 ° C tan pronto como sea posible.
4. Registro de 5 minutos de pre-tensión mediciones fisiológicas.

3. La TSST

1. Si usted va a utilizar una sala de entrevistas por separado (para aumentar los efectos del estrés de la TSST), llevar el participante de la sala de espera en la sala de entrevistas.
2. Para comenzar el período de preparación TSST discurso, leyó el guión siguiente a la participante: "Esta es la parte de preparación del discurso de la tarea, usted debe prepararse mentalmente un discurso de cinco minutos que describe por qué sería un buen candidato para su trabajo ideal. Su discurso será grabado y revisado por un panel de jueces entrenados para hablar en público. Tienes diez minutos para preparar y el tiempo comienza ahora ".
3. Registro de las mediciones fisiológicas durante el período discurso de 10 minutos de preparación. Establecer un temporizador digital para 10 minutos y salir de la habitación.
4. Después de 10 minutos, volver a la sala vistiendo una bata de laboratorio. Lea el siguiente script para el participante: "Esta es la parte del habla de la tarea que está a pronunciar un discurso que explique por qué usted sería un buen candidato para su trabajo ideal Usted debe hablar para todo el período de tiempo de cinco minutos... Su tiempo comienza ahora ". La cámara de vídeo apoyo debe ser activado ahora, para aumentar la evaluación calidad / estrés.
5. Registro de las mediciones fisiológicas durante el período discurso de 5 minutos el rendimiento. Si el participante deja de hablar durante el discurso, permite que él o ella a permanecer en silencio durante 20 segundos. Si él o ella no volver a hablar, pedir al participante a seguir hablando enseñándoles: "Todavía hay tiempo restante."
6. Al final del período discurso de 5 minutos el rendimiento, lea el siguiente script para el participante: "Durante la porción de matemáticas últimos cinco minutos de esta tarea, se le pedirá a restar de forma secuencial el número 13 de 1022 Usted verbal.mente informe sus respuestas en voz alta, y se le pedirá que empezar de nuevo desde 1022, si se comete un error. . El tiempo empieza ahora "Si el participante comete un error, le informarán con:" Eso es incorrecto, por favor, empezar de nuevo desde 1022 "Establecer un temporizador digital por 5 minutos..
7. Registro de las mediciones fisiológicas durante el período de matemáticas de 5 minutos el rendimiento.
8. Al final del periodo de rendimiento en matemáticas de la TSST, se recoge una "post-estrés" muestra de saliva.
9. Administrar el estrés post-Estado-Rasgo de Ansiedad.

4. Estrés post-Medidas de recuperación

1. Volver a los participantes a la sala de espera inicial. Durante el período de recuperación en primer lugar, instruir a los participantes a esperar cómodamente durante 20 minutos. Establecer un temporizador digital para 20 minutos y salir de la habitación.
2. Volver a la sala de espera después de 20 minutos y se recoge una "recuperación de una" muestra de saliva.
3. Durante el período de recuperación en segundo lugar, instruir a los participantes que esperar de nuevo cómodamente durante 20 minutos. Establecer un temporizador digital para 20 minutos y salir de la habitación.
4. Volver a la sala de espera después de 20 minutos y se recoge "una recuperación de 2" muestra de saliva.
5. Instruir a los participantes para completar la "recuperación" Estado-Rasgo de Ansiedad.
6. Interrogar al participante como a la verdadera naturaleza del experimento. Informará al participante que su desempeño no fue registrado y que ningún análisis de su discurso o el rendimiento en matemáticas se llevará a cabo. Explique a los participantes que las tareas con las que se presentaron eran demasiado difíciles y no reflexionar sobre la aptitud del participante o de la capacidad.

5. Análisis de Datos

1. Para analizar las medidas psicológicas, la puntuación de cada Estado-Rasgo de Ansiedad de la tensión pre-, post-estrés y los puntos de tiempo de recuperación ^6.
2. Para analizar las medidas fisiológicas, calcular una puntuación media de frecuencia cardiaca para cada uno de los cinco minutos de "estrés pre", "preparación del discurso", "el rendimiento del habla", y m "ATH "períodos de la TSST. Por otra parte, calcular las puntuaciones medias de cada minuto de la TSST o la frecuencia cardíaca medida en puntos discretos de tiempo durante el TSST.
3. Para analizar las medidas neuroendocrinas, las muestras de saliva para la prueba de la concentración de hormona utilizando kits EIA disponibles comercialmente.

6 Opcional:. Ensayo adicional de cortisol salival Protocolo de información (que se reproduce a partir de insertar Salimetrics cortisol salival kit de ensayo)

1. Lleve todos los reactivos de ensayo salivales kit a temperatura ambiente.
2. Prepare el tampón de lavado de acuerdo a las instrucciones del kit.
3. Determinar el diseño de placas y pipeta de 25 l de normas y controles en los pozos apropiados por duplicado.
4. Descongele las muestras de saliva, vortex y centrifugar a 1500 XG (@ 3000 RPM) durante 15 minutos.
5. Pipeta de 25 l de líquido claro de las muestras se centrifugaron en los pozos apropiados en la placa (por duplicado).
6. Prepare la enzima conjugada y la pipeta 200 l en todos los pocillos.
7. Mezcla de la placa durante 5 minutos a 500 rpm y se incuba durante otros 55 minutos.
8. Lave y seque la placa 4 veces con tampón de lavado.
9. Añadir 200 l tetrametilbenzidina (TMB) a cada pocillo utilizando una pipeta multicanal.
10. Mezcla de la placa durante 5 minutos a 500 rpm y se incuban en la oscuridad durante 25 minutos adicionales.
11. Añadir 50 l de solución de parada a cada pocillo y mezclar durante 3 minutos a 500 rpm para detener la reacción.
12. Limpie la parte inferior del plato limpio y leer la placa en un lector de placas a 450 nm a los 10 minutos de la adición de la solución de parada.
13. Para calcular la concentración de cortisol, calcular la densidad óptica media para todos los pocillos. Resta la densidad óptica media de los pozos de unión no específica de la densidad óptica media del cero, el control estándar, y los pozos de la muestra.
14. Calcular el porcentaje límite (B / Bo) para cada estándar, control y muestra dividiendo la densidad óptica media de estos pozos (B) por el promedioedad de densidad óptica de los pozos de cero (Bo). Determinar la concentración de los controles y las muestras mediante interpolación utilizando un software capaz de logística.

7. Los resultados representativos:

Los datos representativos que aquí se presenta es una compilación de revisión de la literatura y dos estudios que se realizaron en nuestro laboratorio durante la tarde con los participantes adultos sanos de sexo masculino. Estos datos están destinadas a representar aproximadamente los resultados que se pueden encontrar a través del protocolo presentado en este artículo.

Este protocolo TSST (Figura 1) induce un incremento de auto-reporte de la ansiedad (medida por el Inventario de Ansiedad Estado Rasgo, Figura 2), la frecuencia cardiaca (Figura 3), y las concentraciones de cortisol en saliva (Figura 4). El protocolo experimental se ilustra en la Figura 1 tiene por objeto proporcionar un ejemplo de cómo las diferentes medidas pueden ser hechas durante una sesión de recogida de datos con la TSST. El momento de la MEDIDAts y la inclusión de diferentes medidas será dictado por la pregunta de investigación específica. Si se utiliza una intervención que tiene por objeto reducir la ansiedad y / o respuesta al estrés, aumenta desapercibida o atenuada en estas medidas se prevé.

Figura 1. Protocolo experimental Nota: Prueba de Estrés Social Trier (TSST); Estado-Rasgo de Ansiedad (STAI), 5 minutos en período de estrés pre (PS), el período de estrés anticipatorio de 10 minutos (preparación del discurso) (AS), 5 minutos en período de voz. (S), 5 minutos período de Matemáticas (M).

Figura 2. Representante de las puntuaciones de ansiedad estado. Nota: puntuación de Ansiedad Estado calcula a partir de 20 Iten medir la ansiedad estado de Inventario de Ansiedad Estado Rasgo (STAI) Representante resultados reflejan los datos recogidos en nuestro laboratorio y publicados en la literatura..

Figura 3. Representante de datos de frecuencia cardiaca Nota:.. La frecuencia cardíaca en latidos por minuto (BPM) Valores representativos reflejan los datos recogidos en nuestro laboratorio y publicados en la literatura.

Figura 4. Datos representativos cortisol salival Nota:.. La concentración de cortisol en UL / DL valores representativos reflejan los datos recogidos en nuestro laboratorio y publicados en la literatura.

Discusión

En este artículo, hemos demostrado cómo llevar a cabo la prueba de Trier estrés social en un voluntario sano. El TSST es un factor estresante de laboratorio estandarizadas social que induce un incremento robusto y fiable de las medidas psicológicas, fisiológicas y neuroendocrinos. El TSST es una alternativa útil a los estresores físicos, en la prueba de prensa-frío o caminata en cinta rodante, y se reproduce la tensión psicológica más naturalista de rendimiento en presencia de una audiencia de evaluación.

Materiales

Name	Company	Catalog Number	Comments
Nombre del equipo / suministro	Empresa	Número de catálogo
BSL Psicofisiología del sistema, incluyendo Mac OS MP36 Unidad de Adquisición de Datos y tres electrodos de electrocardiograma	Biopac Systems Inc.	BSLPSY-M
Inventario de Ansiedad Estado-Rasgo	Mente Jardín, Inc.	Conservador-B
Enzima de cortisol en saliva Inmunoensayo Kit	Salimetrics	1-3002
2,0 ml de polipropileno viales	Fisher Scientific	05 40B 146
Lector de microplacas BioRad, modelo 680, con software de gestión de microplacas	BioRad	Lector de Placas: 168 1000 Software: 1706800