Separación electroforética de las proteínas

Resumen

En este vídeo, se demuestra un método para la separación electroforética de las proteínas usando poli-acrylimide electroforesis en gel (PAGE).

Resumen

Electroforesis se utiliza para separar mezclas complejas de proteínas (por ejemplo, a partir de células, fracciones subcelulares, las fracciones de la columna, o inmunoprecipitados), para investigar las composiciones de subunidades, y para verificar la homogeneidad de las muestras de proteínas. También puede servir para purificar las proteínas para su uso en otras aplicaciones. En la electroforesis en gel de poliacrilamida, las proteínas migran en respuesta a un campo eléctrico a través de los poros de una matriz de gel de poliacrilamida; tamaño de poro disminuye con la concentración de acrilamida en aumento. La combinación de tamaño de poro y la carga de proteínas, el tamaño y forma que determina la tasa de migración de la proteína. En esta unidad, el método estándar de Laemmli se describe, por electroforesis en gel discontinuo bajo condiciones de desnaturalización, es decir, en presencia de dodecil sulfato sódico (SDS).

Protocolo

El protocolo de texto completo de este enfoque experimental está disponible en Current Protocols in Molecular Biology .