Para cubrir las nanopartículas de oro con ADN, tome 400 microlitros de solución de nanopartículas de oro obtenida comercialmente y centrifugarla a 3, 500G a temperatura ambiente durante cinco minutos. Con una pipeta, retire el sobrenadante y resolubilice el pellet en 25 microlitros de agua UltraPure. A continuación, agregue cuatro microlitros de ADN modificado con tiol micromolar de 100 obtenidos comercialmente.
Agregue un microlitro de solución TCEP de 100 milimolares. Incubar la mezcla durante 10 minutos a temperatura ambiente. Después de la incubación, agregue cinco microlitros de la mezcla a la solución de nanopartículas de oro previamente concentrada.
Vortex la mezcla resultante durante cinco segundos y congelar durante al menos dos horas a menos 20 grados centígrados. Después de descongelar la mezcla congelada a temperatura ambiente, centrifugar la misma a 3, 500 G durante cinco minutos a temperatura ambiente para eliminar el exceso de recubrimiento de ADN agregado. Con una pipeta, retire el sobrenadante y resolubilice el pellet en 10 microlitros de agua.
El color cambiante de la solución en cada paso indicaba un recubrimiento adecuado de la nanopartícula de oro. El color rojo intenso de las nanopartículas de oro cambió a rojo púrpura oscuro tan pronto como se agregó el ADN. La congelación cambió el color a púrpura, y la descongelación lo devolvió a rojo intenso.
Los espectros de absorbancia de las nanopartículas de oro recubiertas de ADN de 60 nanómetros mostraron un cambio en el pico de absorbancia en comparación con el de las nanopartículas de oro desnudas.
