Para ensamblar las nanoantenas de origami de ADN o DONA, use las nanopartículas de oro recubiertas de ADN y las horquillas de origami de ADN ya ensambladas. Agregue la solución de nanofork a la solución de nanopartículas de oro recubiertas manteniendo una relación de concentración molar final de 1.5 es a uno. A la mezcla agregue cloruro de magnesio de una solución madre de 50 milimolares para alcanzar una concentración final de cloruro de magnesio de cuatro milimolares.
Ajuste el volumen final a 20 microlitros con agua ultrapura. Hibridar los DENA utilizando un gradiente de temperatura en un termociclador. Comenzando con un calentamiento rápido a 40 grados centígrados, siga paso a paso el programa de gradiente de temperatura mostrado.
Para la purificación de las DONAs preparar gel de agarosa al 1% disolviendo 0,8 gramos de agarosa en 80 mililitros de T A E suplementado con cinco milimolares de cloruro de magnesio. Agregue 2.25 microlitros de tampón de carga que contenga 30% de glicerol y 13 milimolares de cloruro de magnesio a 18 microlitros de solución DONA. Deje correr el gel durante 60 minutos a 70 voltios en un baño de agua helada.
Recorte la banda de interés y colóquela en un portaobjetos de microscopía envuelto con una película plástica de parafina. Luego exprima la solución con un segundo portaobjetos de microscopía envuelto en película de parafina. Usando una pipeta, recoja el líquido exprimido en un tubo de 500 microlitros.
Durante la purificación en gel de agarosa, apareció una banda dímero correspondiente a los DENA sobre la banda de nanopartículas de oro libre, la banda de ejecución más rápida de la muestra.
