Comience preparándose para una craneotomía colocando una almohadilla de banco limpia en la superficie de trabajo. Pega con cinta adhesiva el cono de la nariz de un vaporizador de isoflurano a la superficie de trabajo. A continuación, coloque un tubo de silicona en el extremo de una aguja de calibre 18, asegurándose de que sobresalga un milímetro de la punta de la aguja.
Practica el movimiento de la aguja marcando una hoja de papel con un punto de partida para bregma, otros 0,2 milímetros lateralmente, y haz una marca final, un milímetro caudal a la segunda marca. Practique moviendo la aguja desde el punto inicial hasta la segunda marca, luego la marca final, asegurándose de que el movimiento sea repetible sin guías. A continuación, afeita la cabeza del animal anestesiado.
Coloque el ratón sobre la superficie de trabajo, manteniendo la cabeza en el cono de la nariz para mantener la anestesia y aplique lubricante ocular en ambos ojos. Ahora, frote el lugar de la inyección con una gasa estéril humedecida en una solución de yodo. Luego, limpie el área con una almohadilla para fregar con alcohol.
Repitiendo este proceso tres veces. Sostenga firmemente la cabeza con la mano no dominante, colocando el mouse plano sobre la superficie de trabajo. Arrastre la aguja preparada de calibre 18 a través de la piel de la cabeza, a lo largo de la línea media en dirección rostral, caudal para identificar el bregma.
Ahora, mueva la aguja dos milímetros lateralmente y un milímetro caudal hasta el lugar de la inyección. Sosteniendo la aguja verticalmente, empújela firmemente a través de la piel y el hueso, hasta que el tubo quede al ras de la piel. Retraiga la aguja, gírela y presione a través de la piel y el hueso nuevamente, repitiendo el proceso para crear un pequeño orificio en el hueso.
Con la aguja roma, verifique que haya un orificio suficiente en el hueso, lo suficientemente grande como para permitir el paso de la aguja. Retire el ratón del cono de la nariz. Proceda a limpiar la sangre del lugar de la inyección con una gasa estéril.
Coloque al ratón en una jaula, en un calentador de jaulas, hasta que se despierte.
