Comience colocando una almohadilla de banco limpia o material de cortina sobre la superficie de trabajo. Pega con cinta adhesiva el cono de la nariz de un vaporizador de isoflurano a la superficie, asegurándote de que esté en dirección opuesta al experimentador. Coloque una aguja de calibre 27 de 10 milímetros de largo con un bisel de 45 grados en una jeringa de vidrio de cinco microlitros.
Agregue un tubo de silicona a la aguja, permitiendo que sobresalgan 3,5 milímetros de la punta y asegure el tubo con cinta de laboratorio al cuerpo de la jeringa. A continuación, extraiga tres microlitros de medio de inyección en la jeringa de vidrio extrayendo inicialmente más de lo necesario, luego expulsando el exceso hasta que solo queden tres microlitros. Encienda un temporizador de laboratorio en modo de cuenta regresiva y colóquelo para una fácil visualización durante las inyecciones.
Después de practicar el movimiento de una aguja lateral y caudalmente, prepare el ratón anestesiado para la inyección limpiando primero el lugar de la inyección con yodo y luego con alcohol tres veces. Identifique el sitio de la inyección con una aguja de calibre 18, pasándola a través del sitio de la craneotomía. Para inyectar el mouse, primero, sostenga firmemente la cabeza del mouse con la mano no dominante.
Coloque la cabeza plana sobre la superficie de trabajo. A continuación, coloque la aguja de la jeringa de vidrio a través del orificio en el cráneo hasta que el tubo descanse sobre la piel del ratón. Sosteniendo la jeringa verticalmente en los planos coronal y sagital, inyecte lentamente el medio durante un minuto.
Sostenga la jeringa y la aguja durante un minuto más para minimizar el reflujo. Luego, retraiga lentamente la aguja. Retire el ratón del cono de la nariz.
Limpie la sangre del sitio de la inyección con una gasa estéril y coloque al ratón en una jaula sobre un calentador de jaulas hasta que esté despierto. La breve exposición a la anestesia gaseosa y la inyección de tres microlitros de líquido en el sistema ventricular por sí solos no alteraron la secreción pulsátil de la hormona luteinizante. Los tractos de inyección eran visibles en el tejido neural y se cruzaban con el ventrículo lateral.
