Comience por diluir adecuadamente los productos farmacológicos de anticuerpos monoclonales para el enriquecimiento de proteínas de la célula huésped. Para diluir productos farmacéuticos con concentraciones superiores a 50 miligramos por mililitro, agregue agua desionizada a 15 miligramos del anticuerpo monoclonal en un tubo de microcentrífuga de dos mililitros. Para productos farmacéuticos con concentraciones inferiores a 50 miligramos por mililitro, transfiera 20 miligramos a un dispositivo de filtro centrífugo de 10 kilodalton.
Centrifugar el contenido a 14.000 G durante 25 minutos a temperatura ambiente para dejar aproximadamente 100 microlitros de solución en el tubo. A continuación, añadir 350 microlitros de tampón de histidina de 10 milimolares, con un pH de seis, en el filtro, tras lo cual se agita el tubo antes de centrifugarlo a 14.000 G durante 25 minutos a temperatura ambiente. Invierta el filtro y colóquelo en el tubo de recolección de muestras.
Centrifugar la muestra a 1000 G durante cinco minutos a temperatura ambiente, recuperando toda la solución en el tubo de recolección. Agregue 200 microlitros de tampón de histidina de 10 milimolares al filtro y pipetee hacia arriba y hacia abajo para recuperar la muestra de proteína restante. Transfiera toda la solución al mismo tubo de recolección.
Vórtice y gire hacia abajo como se demostró anteriormente. Después de medir la concentración de la muestra por nanogota, ajústela a 50 miligramos por mililitro agregando el tampón de histidina. Por último, transfiera 300 microlitros de la muestra a un tubo de microcentrífuga de dos mililitros.
