Comience los experimentos de interferometría de biocapas, o BLI con sensores codificados por estreptococos, a temperatura ambiente. Asegúrese de que los sensores estén estacionarios en una sola fila. Pipetear 200 microlitros de la muestra en los pocillos.
A continuación, sumerja el sensor en una solución que contenga VHL durante 80 segundos para cargar el sensor a una velocidad de uno a tres nanómetros. Ahora sumérgete en el búfer durante 60 segundos para establecer la primera fase de referencia. Para la fase de inmovilización, sumerja los sensores en la proteína VHL durante 80 segundos y luego vuelva a sumergirlos en el tampón durante 60 segundos para establecer la segunda fase basal.
A continuación, sumérjase en una concentración fija de las siguientes inyecciones durante 300 segundos. Finalmente, sumerja los sensores en el tampón una vez más durante 600 segundos para establecer la fase de disociación. Utilice el software del instrumento para analizar los datos y estimar la tasa de encendido, la velocidad de apagado y la constante de disociación de equilibrio.
Se realizó la caracterización del complejo binario BVS/MZ1 y del complejo ternario BVS/MZ1 BRD4. Se encontró que MZ1 media la formación del complejo ternario.
