Comience recolectando el cultivo de BCG en la fase de crecimiento del tronco medio o tardío. Centrifugar 3000 G durante 10 minutos, luego desechar el sobrenadante. A continuación, agregue 10 mililitros de PBS para lavar las bacterias.
Después de la centrifugación, deseche el sobrenadante. Vuelva a suspender el gránulo en cinco mililitros de medio de infección. Coloque el tubo en un baño de ultrasonidos durante 15 minutos a máxima potencia con una frecuencia de 80 hercios.
Ahora centrifugar a 1.000 G durante 10 minutos. Recoja el sobrenadante y deseche el gránulo. Mida la densidad óptica del sobrenadante.