Collection of Primordial Germ Cells from Drosophila Donor Embryos

Proceda a recolectar las células germinales primordiales o PGC de los embriones de escoria filia. Después de montar el sistema de micromanipulador. Mientras trabaja bajo un microscopio estereoscópico, use fórceps para transferir los embriones.

Alinee los embriones recubiertos en dos filas en un portaobjetos de vidrio de recolección de PGC a lo largo de dos líneas de referencia. Orientar los embriones con la parte anterior hacia la derecha y el lado ventral hacia arriba. Mueva suavemente la punta de la aguja de trasplante hasta el extremo anterior de un embrión.

Penetrar en el embrión moviendo la platina del microscopio y retraer ligeramente la aguja. Cuando la punta llega al extremo posterior. Descargue cualquier yugo en la aguja dentro de la capa de células somáticas.

Mueva la punta de la aguja hacia el polo posterior y cargue suavemente los PGC en la aguja sin tomar mucho tiempo. Saca la aguja del embrión rápidamente. Descargue la yema y otros contaminantes de la aguja mientras mantiene los PGC.

Cargue el aceite de silicona limpio de la piscina en la aguja. Antes de recolectar PGC de un nuevo embrión, deposite la mayor cantidad posible de aceite de silicona dentro de la capa de células somáticas mientras mantiene las PGC cargadas en la aguja. Después de recolectar PGC de todos los embriones en una fila, deposite los PGC en la superficie de un embrión y descargue cualquier yugo u otros contaminantes en otro embrión vecino.

De manera similar, recoja y combine las PGC de los embriones de la segunda fila.