Comience configurando el sistema de bombeo para las pinzas hipoglucémicas o hiperglucémicas. Para hacerlo, llene dos jeringas Hamilton con el infundido de insulina y la solución de glucosa al 30%. Conecte las jeringas llenas a los dos tubos largos de la configuración del tubo de extensión destinado a la infusión de glucosa e insulina.
Después de conectar el conjunto de jeringa a las bombas de jeringa respectivas, llene cada solución en los tubos de extensión respectivos. A continuación, llene la solución salina en la jeringa de un mililitro y el tubo de extensión para extraer sangre de la arteria. A continuación, conecte el tubo de extensión para la infusión al catéter de la vena yugular preinstalado del ratón debidamente anestesiado.
Tubo de extensión para extraer sangre al catéter de la arteria carótida del animal. Usa cinta de celofán para asegurar los tubos. Coloque el ratón con los tubos dentro de un vaso de precipitados vacío de 500 mililitros con ropa de cama.
Sujete con pinza el extremo superior del tubo de extensión para extraer sangre mientras lo conecta a una jeringa nueva. Extraiga 50 microlitros de sangre, transfiéralos a un tubo de 1,5 mililitros y mida el nivel de glucosa en sangre. Luego infundir 50 microlitros de solución salina.
Para recolectar sangre para mediciones hormonales, extraiga 50 microlitros adicionales de sangre y transfiérala a un tubo de 1,5 mililitros en hielo. Después de la medición de glucosa en sangre de cero minutos, encienda la bomba de jeringa de insulina para infundir la cantidad adecuada de insulina. Siga midiendo el nivel de glucosa en sangre y cambie la velocidad de infusión de glucosa cada 5 a 10 minutos durante el tiempo de monitoreo de 120 minutos hasta que se alcance un estado estable.
Para la pinza hiperglucémica, siga los pasos indicados para la pinza hipoglucémica, excluyendo la infusión de insulina, y un nivel ajustado de glucosa en sangre en estado estacionario.
