Para comenzar, coloque las larvas de Drosophila en una placa de Petri vacía de 35 milímetros y use fórceps para lavarlas dos veces con agua del grifo para eliminar cualquier resto de comida. Coloque 10 larvas en un plato de disección que contenga PBS helado. Coloca el lado dorsal de la larva hacia arriba y sujeta cada extremo al plato.
Haga una pequeña incisión en la pared del cuerpo del extremo posterior. Con unas tijeras de microdisección, corte la pared del cuerpo a lo largo de la línea media dorsal hacia el extremo anterior. Enjuague el interior de la larva tres veces con PBS usando una pipeta Pasteur para exponer el cerebro.
Localice y levante el cerebro con fórceps, y aísle el cerebro con unas tijeras de microdisección. Transfiera los cerebros diseccionados a un tubo de microcentrífuga lleno de PBS helado y recoja todos los cerebros en hielo. Realice la extracción de ARN con un kit de micropreparación de ARN.
Para el aislamiento de células Schneider S2, agregue cinco mililitros de PBS helado al cultivo celular de Schneider. Transfiera las células a un tubo de 15 mililitros, luego centrifugue a 1000 G durante cinco minutos a cuatro grados centígrados para granular las células. Con una pipeta, enjuague las células dos veces con PBS helado y vuelva a centrifugar.
Realice la extracción de ARN con un kit de minipreparación de ARN.
