Para comenzar, coloque una botella estéril con tapón de nitrógeno y las botellas de cultivo, y una botella de recolección de muestras. Gotee etanol 100% sobre los tapones y préndales fuego con un encendedor. Una vez que los tapones ya no estén en llamas, inserte una jeringa de un mililitro equipada con una aguja de calibre 23 en la botella de nitrógeno y extraiga aproximadamente un mililitro de nitrógeno.
Extraiga la aguja y presione lentamente el émbolo para liberar el nitrógeno. Inserte inmediatamente la aguja en el frasco de recogida de muestras y extraiga 0,5 mililitros de la muestra ambiental. Inocular la muestra extraída en el frasco de cultivo que contiene los medios.
Agite suavemente el biberón y colóquelo en una incubadora a la temperatura deseada. Los recuentos celulares directos antes de la inoculación a menudo estaban por debajo del límite de detección. Después de la inoculación, los recuentos celulares aumentaron más de 10 millones de células por mililitro en los días 30, 37 y 44.
Aunque los recuentos celulares estaban por debajo del límite de detección antes de agregar el inóculo, la NGS indicó una presencia basal de microorganismos preinóculo en el sedimento y el género principal geobacillus se mantuvo estable en los días ocho, 15 y 22. Después de la inoculación con el inóculo BLM-1 el día 23, el geobacilo ya no dominó, y surgieron nuevos géneros principales junto con una multitud de géneros poco presentes.
