Preparación de portaobjetos para inmunohistoquímica cíclica multiplex de secciones de tejido canceroso

Para empezar, obtenga tejido de metástasis cerebral de tumor de pulmón primario o cáncer de pulmón, incruste el tejido tumoral en bloques de parafina emparejados y, con un microtono, córtelo en secciones de cuatro micrómetros de grosor. Coloque las secciones en agua. Elija el mejor con unas pinzas y adhiéralo al portaobjetos recubierto de polilisina.

Para mejorar la adhesión del tejido, incube el portaobjetos en un horno a 65 grados centígrados durante 30 minutos. Para la deshidratación, sumerja el portaobjetos en xileno, seguido de soluciones de etanol de concentraciones decrecientes, luego lávelo con agua ionizada durante tres minutos. A continuación, sumerja el portaobjetos en una solución tampón de citrato de sodio.

Someta el portaobjetos a altas temperaturas y presión en una olla a presión y déjelo enfriar a temperatura ambiente en agua destilada durante tres minutos. Finalmente, lave el portaobjetos tres veces con PBS durante cinco minutos cada una.