Para comenzar, lleve un solo mouse desde la carcasa hasta la sala de pruebas en una jaula de plástico cubierta sin material de cama. Coloque la jaula frente a una cámara de video. A continuación, coloque un espejo para ver la cara del ratón cuando esté de espaldas a la cámara.
Registre el comportamiento del mouse durante 10 minutos. Después de grabar, limpie la jaula de observación antes de grabar al siguiente animal. Tener un observador ciego a las condiciones experimentales para analizar el comportamiento registrado del ratón.
Fíjate en cada episodio de aseo facial durante la grabación de 10 minutos. Haga una distinción entre el acicalamiento facial aislado y los comportamientos de acicalamiento facial durante el aseo corporal. Determine el número de episodios de acicalamiento facial con un criterio de corte de cuatro segundos.
El tiempo entre acciones de acicalamiento de menos de cuatro segundos se define como una pausa dentro de un solo episodio. Un tiempo superior a cuatro segundos se define como una interrupción completa de las acciones de acicalamiento entre dos episodios. Coloque la cola del ratón en una abrazadera de silicona suave y fije la abrazadera magnéticamente a una placa de metal sobre la mesa.
Coloque un soporte de plástico de tres paredes sobre el mouse de modo que solo la cabeza sobresalga del recipiente. Coloque un peso encima del soporte para mantenerlo en su lugar. Utilice una serie graduada de cuatro pelos de von Frey para aplicar fuerza al ratón.
Habitúe el ratón al retenedor y a los movimientos de alcance durante 10 minutos. Cuando el ratón esté relajado, aplique lentamente el pelo de von Frey más claro dentro del territorio nervioso infraorbitario cerca del centro de las vibrisas hasta que se doble. Puntúe la respuesta del ratón a la estimulación en una de las siguientes categorías.
Calcule la puntuación media de las respuestas ipsilaterales a los cuatro pelos de von Frey y, a continuación, calcule las puntuaciones medias de los lados contralaterales. Los ratones con lesión crónica por constricción del nervio infraorbitario distal mostraron un aumento postoperatorio significativo en el tiempo y los episodios de acicalamiento facial aislado, alcanzando su punto máximo en la primera semana y luego disminuyendo gradualmente, permaneciendo elevado durante seis semanas. Inicialmente, los ratones con lesión crónica por constricción del nervio infraorbitario distal mostraron una falta de respuesta casi completa a la estimulación mecánica, que, durante las semanas siguientes, se transformó en una hiperreactividad que duró seis semanas.
También se observó un ligero aumento en la capacidad de respuesta a la estimulación mecánica contralateral.
