Inducción de hiperlipidemia para caracterizar la disfunción diastólica en ratones HFpEF

Para comenzar, descongele los viales de stock de vectores virales en hielo durante 20 minutos y diluya las partículas de AAV en 100 microlitros de DPBS. Cargue la solución diluida de AAV en una jeringa de un mililitro con una aguja de calibre 28 a 30, evitando las burbujas de aire. Asegure el ratón anestesiado en un retenedor de iluminación de cola.

Y use una gasa para limpiar el sitio de la inyección con un antiséptico. Masajear la cola con dos dedos hasta observar la vena. Luego inyecte el vector en la vena de la cola en un ángulo bajo y retire la aguja.

Con un dedo, aplique presión inmediatamente en el sitio inyectado para detener el sangrado. Para preparar poloxamer 407, disuélvalo en DPBS en un rotador durante la noche a cuatro grados centígrados en un gabinete de bioseguridad. A continuación, sujete el ratón manualmente debajo de una campana extractora, colocando la cabeza y el cuerpo hacia abajo.

Con un antiséptico, limpie el lugar de inyección en el cuadrante inferior izquierdo del abdomen lateral a la línea media. Para inyectar P407, inserte la aguja en la cavidad peritoneal en un ángulo de 45 grados o menos. Después de cuatro semanas de inducción de hiperlipidemia, la ecocardiografía reveló insuficiencia cardíaca con fracción de eyección preservada, ya que el tiempo de relajación intraventricular fue prolongado.

Se observó un aumento de la relación entre la velocidad del flujo magro mitral temprano y la velocidad diastólica temprana del anillo mitral, junto con una disminución de la velocidad del flujo transmitral diastólico temprano a tardío.