Después de al menos tres o cuatro días desde la cirugía de la cámara de ventana, asegure el ratón anestesiado en una etapa de imagen con un accesorio de anestesia gaseosa. Utilizando microscopía de campo claro, obtenga una imagen de amplio campo de visión, lo que garantiza la visibilidad de las hendiduras del marcador de referencia en el marco frontal de la DSFC. El mismo día, utilice la modalidad de microscopía intravital para capturar una imagen microvascular.
Después de colocar el ratón en la cama de resonancia magnética, inserte una aguja de mariposa de calibre 27 con microtubos conectados a la vena de la cola. Asegure la cámara de la ventana en un dispositivo de inmovilización impreso en 3D Con una aguja de calibre 18, inyecte lubricante ocular veterinario en los siete tubos del marcador fiducial de resonancia magnética. Fije el marcador de referencia a la DSFC.
Inserte la cama en un escáner de resonancia magnética preclínica de siete teslas. Para la adquisición, establezca un campo de visión de 32 por 32 milímetros con una matriz de 64 por 64 para 0,5 por 0,5 milímetros en resolución simple con pulsos de RF consistentes. Adquiera conjuntos de imágenes ponderadas T2 coronales y axiales para visualizar el plano de la cámara de la ventana.
Prescribir y reorientar de forma iterativa un conjunto ponderado de T2 sagital para alinear los cortes de imágenes con la DSFC y los marcadores de referencia, asegurándose de que el corte cinco contenga señal tisular en el DSFC y el corte cuatro no. Realizar imágenes microvasculares utilizando el método de resonancia magnética dinámica con contraste seleccionado. En el espacio de trabajo de MATLAB, cargue los datos de microvascular, microscopía de campo claro y resonancia magnética microvascular y, a continuación, haga clic en el botón Ejecutar.
Navegue hasta el archivo que contiene los cortes de resonancia magnética ponderados T2 y seleccione hasta cuatro cortes que muestren los marcadores de referencia. Coloque un punto en cada uno de los siete marcadores de referencia en la imagen de resonancia magnética y hágalos coincidir con su punto correspondiente en la imagen de microscopía. Seleccione al menos tres puntos de referencia microvascular en la imagen microvascular de la svOCT y los puntos correspondientes en la imagen de microscopía.
Contornee el tumor en la imagen de microscopía corregistrada y, a continuación, aparecen el conjunto de datos microvasculares de svOCC, la imagen de microscopía corregistrada y los mapas de parámetros de resonancia magnética corregistrados. Guarde el mapa para su posterior análisis. El registro conjunto de imágenes microvasculares, microscopía de campo amplio y resonancia magnética en ratones sanos y portadores de tumores permite el análisis de correlación de las métricas microvasculares y macrovasculares.
Las métricas macrovasculares de resonancia magnética dinámicas con contraste mostraron fuertes correlaciones entre las métricas microvasculares derivadas de svOCT, como lo indican los valores de R cuadrado en ambos gráficos. Se midieron las correlaciones tanto en ratones sanos como en ratones portadores de tumores para evaluar la capacidad de la resonancia magnética dinámica con contraste para medir las características vasculares en arquitecturas microvasculares muy diferentes.
