Para comenzar, recupere el vial criogénico con células de nitrógeno líquido y descongélelo en un baño de agua a 37 grados centígrados durante dos minutos. Después de transferir las células descongeladas a un tubo de 15 mililitros, agregue gradualmente 10 mililitros de medio precalentado y centrifugue el tubo. Deseche el sobrenadante y vuelva a suspender las células en un mililitro de DPBS suplementado que contenga FBS y cloruro de calcio.
A continuación, mezcle un mililitro de la suspensión celular con 50 microlitros del cóctel de eliminación de células muertas y el cóctel de selección de biotina en un tubo de poliestireno de fondo redondo de cinco mililitros e incube. Después del vórtice, agregue 100 microlitros de perlas de dextrano a la suspensión celular y mezcle suavemente dos veces con la pipeta. A continuación, añada 1,3 mililitros de DPBS suplementado a la mezcla e incube con un imán durante tres minutos a temperatura ambiente.
Invierta el imán y el tubo para verter la suspensión de celda viva en un nuevo tubo cónico de 15 mililitros. Impregne las células en una centrífuga. Después de eliminar la mayor parte del sobrenadante, vuelva a suspender las células en un mililitro de DPBS que contenga 0,04% de albúmina sérica bovina.
