Comience revisando el ratón para ver si está anestesiado, golpee la oreja del ratón para identificarlo y coloque su nariz en el cono de la nariz para una anestesia sostenida. Use cinta de laboratorio para sujetar las extremidades del ratón contra la camilla. Coloque un lazo de alambre alrededor de cada extremidad y gírelo firmemente, asegurando el ratón a la camilla en las muñecas y los tobillos.
Coloca un lazo giratorio más grande alrededor del pecho, atándolo sin apretar. Levanta la cola del ratón y colócala debajo del pie izquierdo para evitar que se pellizque. Luego, abra la sección de exposición animal del tubo de choque y oriente el mouse para que mire hacia la onda expansiva que se aproxima.
Asegure la camilla en la sección de exposición de animales. Luego, cierre la puerta herméticamente, asegurándose de que la puerta no apriete el tubo de flujo anestésico. Reducir la anestesia a 2,5 a 3% de isoflurano con un litro por minuto de oxígeno.
A continuación, encienda el sistema. Conéctelo a la línea de suministro para el gas helio comprimido. Salga de la sala de granallado para acceder a la consola del tubo de control de granallado en una sala contigua.
Desde la consola, encienda el software de adquisición para registrar el evento de explosión, desactive cualquier bloqueo de seguridad, cierre ambas rejillas de ventilación de gas y presurice pasivamente el carrete. Continúe llenando hasta que la membrana se rompa a la presión objetivo. Apague el mecanismo de llenado.
Luego, registre la presión máxima, la duración de la fase positiva y el impulso en la ubicación del animal. Regrese al tubo de choque, desconecte la línea de alimentación de helio y apague la fuente de alimentación del circuito de control de voladura. Para realizar exposiciones repetidas de LLB en el mismo animal, abra el carrete, retire y reemplace la pila de membranas del carrete.
Después de completar las exposiciones a la LLB, retire al animal del tubo de choque, dejando la anestesia puesta. Desate al animal mientras está bajo anestesia y colóquelo boca arriba sobre la almohadilla de agua caliente. Registre el tiempo hasta que el mouse se voltee sobre su lado ventral como el tiempo de enderezamiento.
Una vez recuperado, regrese el ratón a su jaula de origen. Los experimentos para estudiar los efectos de las explosiones explosivas en ratones se evaluaron utilizando el análisis de presión frente al tiempo, con experimentos exitosos que presentaban un patrón de onda controlado con un aumento brusco de la presión y una disminución predecible. No se observaron lesiones manifiestas en los experimentos de explosiones de bajo nivel, incluso después de múltiples explosiones.
El análisis del tiempo de adrizamiento indicó que la exposición repetitiva a LLB condujo a una recuperación más rápida en los ratones blast que en los controles, lo que indica cambios en la excitación neuroconductual. Además, la correlación de los perfiles de presión-tiempo con las respuestas biológicas ayudó a establecer relaciones causales, lo que respaldó los estudios longitudinales sin pérdida de animales hasta seis meses después de la exposición.
